公共文化服务平台

共 3 条记录，以下是 1-3

全选清除导出

排序方式：

猪圆环病毒2型天津株的全基因组克隆与序列分析被引量：7: 2014年; 利用PCR方法对采自天津地区某猪场的疑似猪圆环病毒2型（PCV-2）感染的病料进行检测，并确定病料中PCV-2的分子特征。将阳性病料接种无PCV污染的PK-15细胞并传代8次，分离出l株PCV-2毒株，命名为PCV-2TJ-1，同时对其全基因组进行克隆和序列分析。结果表明，该分离株基因组全长1767bp，与我国上海LN-19株和韩国的A4099株的核苷酸同源性最高，均达到99．6％。PCV-2全基因组序列的进化分析表明，分离毒株为PCV-2b基因亚型；对分离毒株与5个不同基因亚型的10个参考株的ORF2和ORF3氨基酸序列进行比较，同源性分别为87．1％～97．4％和93．3％～99．0％。结果表明，在天津地区流行的PCV-2毒株为PCV-2b，为PCV-2的分子流行病学、遗传变异及防控奠定了基础。; 李海花李秀丽张莉孙英峰任卫科路超田向学; 关键词：猪圆环病毒2型基因组克隆

猪圆环病毒2型Cap全基因的克隆与原核表达被引量：7: 2015年; Cap蛋白是猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)的主要结构蛋白,能诱导免疫保护,是临床上利用血清学诊断PCV2的主要依据。本研究根据PCV2TJ株全基因核苷酸序列(GenBank登录号:KC751546)设计特异性引物,利用PCR从PCV2TJ株扩增获得Cap全基因,将该基因片段连接到原核表达载体pET-32a(+)中,获得重组质粒pET32a-Cap,经IPTG诱导获得约48ku的重组融合蛋白,Western blotting分析结果表明其与小鼠抗6×His单克隆抗体和PCV2阳性猪血清均呈阳性反应。本研究成功克隆Cap全基因,构建原核表达载体,并实现Cap融合蛋白的表达,这为PCV2Cap蛋白的功能研究及诊断方法的建立和亚单位疫苗的研制奠定了基础。; 李海花覃尧张全红李秀丽; 关键词：猪圆环病毒2型克隆原核表达

PCV2通过NF-κB/NLRP3信号通路调控体外培养PAMs分泌IL-1β被引量：7: 2016年; 为探讨猪圆环病毒2型(porcine circovirus 2,PCV2)诱导猪肺泡巨噬细胞(porcine alveolar macrophages,PAMs)产生白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)的分子机制,试验选取2头PCV2和PRRSV抗原、抗体均为阴性的6周龄普通仔猪,无菌分离PAMs,以体外培养的PAMs为研究对象,采用ELISA方法检测PAMs培养上清液中IL-1β的生成,采用实时荧光定量PCR方法检测PAMs中NLRP3和凋亡相关点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD,ASC)的mRNA表达水平,分别用小干扰RNA(siRNA)方法和核因子-kappa B(NF-κB)抑制试验分析NLRP3和NF-κB对PCV2诱导PAMs产生IL-1β的调控作用。结果显示,PCV2感染PAMs后能够显著或极显著增加IL-1β、NLRP3(1h除外)和ASC(1、3h除外)的生成(P<0.05;P<0.01)。siRNA能使58.3%的NLRP3基因沉默,且NLRP3沉默后PCV2诱导PAMs产生IL-1β的水平显著下降(P<0.05)。NF-κB被抑制后PCV2诱导PAMs产生IL-1β的水平也明显下降。结果表明,PCV2通过NF-κB/NLRP3信号通路调控体外培养PAMs分泌IL-1β。; 李海花张蕾杨春蕾赵向华乔家运王文杰; 关键词：猪圆环病毒2型猪肺泡巨噬细胞白细胞介素-1Β 核因子-KAPPA NLRP3

全选清除导出

共1页<1>

天津市农业科学院院长基金(13004)