广东省自然科学基金(5011589) 作品数:11 被引量:37 H指数:4 相关作者: 刘华锋 梁东 陈孝文 姚翠微 唐德燊 更多>> 相关机构: 广东医学院附属医院 更多>> 发文基金: 广东省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
IL-18对人近端肾小管上皮细胞增殖及凋亡的影响 被引量:3 2008年 目的探讨白细胞介素18(IL-18)对肾小管上皮细胞增殖及凋亡的作用以进一步明确其在慢性肾病进展中的作用。方法在体外实验中应用不同质量浓度(0.1、1、10、100 mg/L)的IL-18分别处理人类近端肾小管上皮细胞株(HK-2)24、36、48、72h,应用改良的MTT法检测细胞增殖,应用Hoechst33258染色法检测细胞凋亡。结果同一质量浓度不同作用时间,随时间的延长其光吸收值(A值)增加,两两比较差异有统计学意义(均P<0.05);同一作用时间不同质量浓度时的A值,各组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);IL-18作用24、36、48h随时间增加凋亡百分数与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05),IL-18作用72h细胞凋亡明显增多,且随质量浓度增加而增加,凋亡百分数与对照组相比差异有统计学义(P<0.01)。结论慢性肾病状态下IL-18可能具有促进肾小管萎缩以至丢失的作用。 皇甫长梅 刘华锋 唐德燊 陈孝文 梁东关键词:白细胞介素18 肾小管上皮细胞 增殖 凋亡 Imbalance of Interleukin 18 and Interleukin 18 Binding Protein in Patients with Lupus Nephritis 被引量:10 2006年 To evaluate the balance status of interleukin 18 (IL-18) and interleukin 18 binding protein (IL-18BP) in circulation in patients with lupus nephritis (LN) and primary nephrotic syndrome (PNS), plasma levels as well as mRNA expression in peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) of IL-18 and IL-18BP were measured by ELISA and RT-PCR respectively. The ratio of IL-18/IL-18BP was also calculated. Both plasma IL-18 and IL-18BP increased significantly in LN patients while only IL-18BP increased in PNS, which resulted in an elevated ratio of IL-18/IL-18BP in LN but not in PNS patients when compared with normal controls. In contrast, increased level of IL-18 mRNA was only detected in LN but not in PNS group, although IL-18BP mRNA expressions in PBMCs in both groups were higher than that in control. The imbalance of IL-18 and IL-18BP might be involved in the pathogenesis of LN, based on which a therapeutic approach is valuable to be developed for LN. Dong Liang Wenfeng Ma Cuiwei Yao Huafeng Liu Xiaowen Chen关键词:IL-18 脂多糖对人近端肾小管上皮细胞IL-18及其受体复合物表达的影响 被引量:1 2006年 观察脂多糖(LPS)对体外培养人近端肾小管上皮细胞IL-18及其受体表达的影响,以初步探讨IL-18在肾小管-间质炎症损伤过程中的作用。以不同浓度LPS(0.01、0.1、1、5、10μg/ml)处理人近端肾小管上皮细胞株(HK-2)24 h、36 h及48 h,然后应用RT-PCR及ELISA测定IL-18及其受体α链(IL-18Rα)和β链(IL-18Rβ)mRNA及蛋白的表达水平变化。静息培养的HK-2细胞表达IL-18 m RNA和蛋白、IL-18Rα和IL-18Rβm RNA,LPS促进HK-2细胞IL-18 mRNA和蛋白的表达及IL-18Rα和IL-18RβmRNA的表达,并呈剂量和时间依赖趋势。肾小管上皮细胞可能既是IL-18的产生者,又是IL-18的靶细胞之一,炎症状态下肾小管上皮细胞通过IL-18自分泌方式参与肾小管-间质的炎症损伤过程。 皇甫长梅 唐德燊 刘华锋 陈孝文 梁东关键词:脂多糖 肾小管上皮细胞 白细胞介素18 IL-18对肾小管上皮细胞表型转化的影响 被引量:4 2006年 目的:研究IL-18对体外培养肾小管上皮细胞表型转化的影响,以明确IL-18在慢性肾脏疾病中的可能作用机制。方法:应用体外细胞培养技术培养人肾小管上皮细胞株(HK2)。应用RTPCR技术检测α平滑肌肌动蛋白(αSMA)、转化生长因子β1(TGFβ1)mRNA水平,用免疫细胞化学方法(ICC)及Westernblot技术分别检测IL18对HK2细胞表达αSMA蛋白的影响。结果:(1)IL-18可促进HK2细胞表达αSMA、TGFβ1mRNA,且两者之间呈正相关(P<0.05)。(2)IL18增加αSMA阳性HK2细胞百分数(P<0.05)。(3)IL18使HK2细胞αSMA蛋白表达水平增加。结论:IL-18可剂量和时间依赖性地促进肾小管上皮细胞转分化为肌成纤维细胞,促进肾间质纤维化。 姚翠微 梁东 刘华锋 唐德燊 陈孝文关键词:白细胞介素18 肾小管上皮细胞 转分化 Α-平滑肌肌动蛋白 BXSB狼疮性肾炎小鼠白细胞介素18的动态表达 2009年 为了观察IL-18在BXSB狼疮性肾炎小鼠的动态表达,并探讨IL-18在LN发生发展中的作用,将C57BL/6小鼠(正常对照)和BXSB小鼠(LN模型)各24只分别随机分为4组,观察至10、12、16、20周,PASM染色法观察不同周龄小鼠肾组织病理变化,直接免疫荧光法检测肾组织IgG的沉积,ELISA法检测小鼠血清IL-18水平,RT-PCR法检测肾组织和脾组织IL-18 mRNA表达水平,免疫组化法检测肾组织IL-18表达水平,并分析LN小鼠系统和肾脏IL-18表达与肾组织病理和免疫病理的相关性。结果显示,LN组小鼠肾组织IgG沉积随时间进展逐渐增多,肾组织病理损伤评分、血清IL-18水平和肾小管IL-18表达量在12周后进行性升高,肾小球IL-18表达量在16周后进行性升高,且均较正常对照组明显升高(P<0.05);不同周龄LN小鼠肾组织和脾组织IL-18 mRNA表达与正常对照组之间无统计学差异,LN小鼠血清IL-18水平、肾小球及肾小管IL-18表达量与肾小球损伤评分及肾组织IgG沉积评分呈正相关。推测IL-18可能在LN发生发展中发挥重要作用,且转录后过程对于系统和肾脏局部IL-18的高表达起主要作用。 路杰 刘华锋 唐德燊 梁东 陈孝文关键词:狼疮性肾炎 白细胞介素18 BXSB小鼠 p^(38)MAPK在IL-18诱导肾小管上皮细胞转分化中的作用 被引量:3 2010年 目的:白细胞介素18(IL-18)可诱导肾小管上皮细胞转分化,本研究探讨其是否是通过p38MAPK途径而起作用。方法:应用不同浓度的p38MAPK通路特异性阻断剂SB203580(0、5、10、20μmol/L)预孵育人近端肾小管上皮细胞(HK-2细胞)30min后,加入IL-18(100ng/ml)共培养24、48、72h。应用RT-PCR法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)mRNA的表达水平;应用ELISA法测定细胞浆中α-SMA蛋白质含量。结果:SB203580呈剂量依赖性地抑制IL-18诱导的HK-2细胞α-SMA基因表达(P<0.05)。结论:p38MAPK通路是调控IL-18诱导肾小管上皮细胞转分化的主要信号通路之一。 张军峰 姚翠微 刘华锋 梁东 陈孝文关键词:肾小管上皮细胞 转分化 白细胞介素-18 P38MAPK IL-18对肾小管上皮细胞E-cadherin表达的影响 2009年 探讨白细胞介素18(IL-18)对人肾小管上皮细胞E-cadherin表达的影响,进一步明确IL-18促进肾小管上皮细胞转分化的机制。应用体外细胞培养技术培养人肾小管上皮细胞株(HK-2细胞)。采用终浓度分别为0、1、10、100 ng/ml的IL-18处理HK-2细胞24 h、48 h、72 h。然后应用免疫细胞化学法检测HK-2细胞E-cadherin的表达百分数;采用RT-PCR法检测HK-2细胞E-cadherin mRNA的表达。结果表明,IL-18呈剂量时间依赖性地降低E-cadherin阳性的HK-2细胞百分数(P<0.01),且呈剂量时间依赖性地减少HK-2细胞E-cadherin mRNA的表达(P<0.01)。提示IL-18可抑制肾小管上皮细胞E-cadherin的表达,促进肾小管上皮细胞转分化。 姚翠微 陈伟 梁东 陶静莉 陈孝文 刘华锋关键词:白细胞介素18 肾小管上皮细胞 E-CADHERIN 狼疮肾炎患者肾组织和外周血IL-18BP表达和分泌的研究 被引量:1 2010年 目的探讨白细胞介素18结合蛋白(IL-18BP)在狼疮性肾炎(LN)疾病发展中的作用。方法收取在该院已确诊但未治疗的LN患者30例,正常对照18例,免疫组织化学法检测肾组织IL-18BP的表达,并采用图像分析系统进行半定量分析;ELISA法检测外周血IL-18BP水平,并对LN患者肾组织和外周血IL-18BP表达和分泌量进行相关性分析。结果 LN患者肾组织IL-18BP表达量显著高于正常对照组(P<0.01),LN患者血清IL-18BP水平也高于正常对照组(P<0.05);IL-18BP在LN肾组织中的表达与其血清水平呈明显正相关(P<0.01)。结论 IL-18BP的高表达和高分泌可能对IL-18的过度分泌具有一定的拮抗作用,从而对LN发展起着一定的保护作用。 姚翠微 陶静莉 黄敏 唐德燊 刘华锋关键词:白细胞介素18结合蛋白 白细胞介素18 IL-18对HK-2细胞E-钙黏蛋白表达的作用及其可能的胞内信号途径 被引量:12 2009年 目的:探讨白细胞介素-18(IL-18)是否通过核因子-κB(NF-κB)细胞内信号转导途径诱导近端肾小管上皮细胞转分化。方法:实验分单纯IL-18刺激组和SN50预孵育组,单纯IL-18刺激组采用终浓度分别为0、1、10、100μg/L的IL-18处理人肾小管上皮细胞株(HK-2细胞)72h,SN50预孵育组在此基础上预先应用终浓度为100mg/L的NF-κB特异性抑制剂SN50预处理细胞0.5h。然后应用免疫细胞化学法检测HK-2细胞E-cadherin的表达百分数;采用RT-PCR法检测HK-2细胞E-cadherin mRNA的表达。结果:NF-κB特异性抑制剂SN50可拮抗IL-18对HK-2细胞E-cadherin mRNA和蛋白表达的抑制作用。结论:IL-18可通过核因子-κB(NF-κB)细胞内信号转导途径诱导近端肾小管上皮细胞转分化。 陈伟 梁东 姚翠微 陶静莉 陈孝文 刘华锋关键词:IL-18 肾小管上皮细胞 IL-18通过JNK途径诱导肾小管上皮细胞转分化 被引量:5 2009年 目的探讨白细胞介素18(IL-18)是否通过JNK细胞内信号转导途径诱导近端肾小管上皮细胞转分化。方法应用体外细胞培养技术培养人近端肾小管上皮细胞株(HK-2细胞),分别予不同浓度的JNK通路特异性阻断剂SP600125预孵育HK-2细胞30min后,加入IL-18共培养,于24h、48h和72h3个时点分别收集细胞。应用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测α-SMA mRNA的表达水平,应用酶联免疫吸附法(ELISA方法)测定细胞α-SMA的表达水平。结果SP600125可抑制IL-18诱导的HK-2细胞α-SMA基因和蛋白的表达,且呈一定程度的剂量依赖趋势。结论JNK通路可能是调控IL-18所诱导肾小管上皮细胞转分化的信号通路之一。 姚翠微 张军峰 刘华锋 梁东 唐德燊 陈孝文关键词:肾小管上皮细胞 转分化 白细胞介素18 JNK通路