国际科技合作与交流专项项目(2008DFA32020)
- 作品数：6 被引量：49H指数：4
- 相关作者：李哲周权男黄天带孙爱花黄华孙更多>>
- 相关机构：中国热带农业科学院海南大学更多>>
- 发文基金：国际科技合作与交流专项项目国家自然科学基金海南省重点科技项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 拟南芥WUS基因的克隆及植物表达载体的构建与鉴定被引量：2
- 2013年
- 为了研究AtWUS基因在橡胶树胚性易碎愈伤组织中的表达对体细胞胚发生的生物学作用,用构建的根癌农杆菌EHA105(携带pCAMBIA2301-35S-AtWUS)对橡胶树胚性易碎愈伤组织进行转化。根据已报道的AtWUS序列设计特异引物,进行RT-PCR和序列分析,同时用重叠延伸PCR技术(gene splicing by overlap extension PCR,简称)构建AtWUS-EGFP融合基因。结果表明:与GenBank上EGFP基因和拟南芥AtWUS序列同源性为100%,分别构建了pCAMBIA2301-35S-AtWUS(含有GUS和NPTII基因)和pER8-AtWUS-EGFP(含有HPTII基因)载体,采用电击转化法转进根癌农杆菌EHA105中。最后,通过GUS检测法鉴定了pCAMBIA2301-35S-AtWUS已经整合到橡胶树中。本研究分别成功构建了组成型植物表达载体pCAMBIA2301-35S-AtWUS和诱导型植物表达载体pER8-AtWUS-EGFP,为橡胶树遗传转化的研究奠定了基础。
- 毕政鸿李哲
- 关键词：EGFP基因融合基因重叠延伸PCR橡胶树
- 橡胶树品种热研88-13易碎胚性愈伤组织的诱导及其植株再生被引量：9
- 2010年
- 以高产优质橡胶品种热研88-13的幼嫩种子内珠被为外植体材料,对愈伤组织诱导培养基和继代培养基中的影响因素如植物生长调节剂的种类和浓度、钙离子浓度等进行了研究。经过连续6个月的继代选择培养,逐渐诱导出易碎的胚性愈伤组织,适宜的易碎胚性愈伤组织诱导培养基为:MH基本成分,添加0.5 mg/L KT,2.0 mg/L 2,4-D,11.0 mmol/L CaCl2,80.0 g/L蔗糖和2.0 g/L Phytagel。组织学切片证明长期继代培养的易碎胚性愈伤组织维持了胚性的状态。取继代培养2 a多的易碎胚性愈伤组织诱导体细胞胚的形成,得到了16 000多个体细胞胚。将这些胚进行进一步的转移培养,得到了115株再生植株。
- 李哲孙爱花黄天带周权男戴雪梅黄华孙林位夫Ludovic LardetPascal MontoroMarc-Philippe Carron
- 关键词：橡胶树体细胞胚继代培养植株再生
- 巴西橡胶树热研88-13和热研8-79品种的核型分析被引量：2
- 2010年
- 采用常规压片法对巴西橡胶树高产品种热研88-13和热研8-79的染色体数目和核型进行了研究。结果表明,热研88-13与热研8-79的体细胞染色体数目均为2n=36,热研88-13的核型公式为2n=2x=36=28m+8sm(4 SAT),热研8-79的核型公式为2n=2x=36=28m+8sm(2 SAT),二者均属于Stebbins型的2B型。
- 倪燕妹马帅李哲
- 关键词：巴西橡胶树染色体核型分析
- 橡胶树热研88-13品种珠心易碎愈伤组织诱导及其胚状体发生被引量：4
- 2010年
- 以橡胶树热研88-13品种的幼嫩种子的珠心组织为材料,诱导出胚性愈伤组织。对胚性愈伤组织诱导培养基、继代培养基中不同的影响因素如植物生长调节剂的种类和浓度、钙离子浓度等进行了研究,筛选到了合适的影响因素。经过连续5个月的继代选择培养,逐渐诱导出易碎的胚性愈伤组织。对易碎胚性愈伤组织进行了长期继代培养。组织学切片证明长期继代培养的愈伤组织维持了胚性的状态。取继代培养了2年多的橡胶树热研88-13品种的珠心易碎胚性愈伤组织诱导胚状体,得到了186个胚状体,正在诱导植株再生。
- 李哲戴雪梅孙爱花黄天带周权男黄华孙林位夫Ludovic LardetPascal MontoroMarc-Philippe Carron
- 关键词：橡胶树胚状体
- 根癌农杆菌介导的橡胶树花药愈伤组织遗传转化体系的建立被引量：32
- 2010年
- 为建立根癌农杆菌介导的橡胶树遗传转化体系,以花药愈伤组织为受体,研究了农杆菌菌株、共培养温度、共培养时间、乙酰丁香酮(AS)等因素对遗传转化效率的影响。结果表明,农杆菌菌株、共培养温度和共培养时间对转化效率具有显著影响,AS不影响转化效率。2.2万个花药愈伤组织经EHA105菌株侵染后,转入未添加AS的培养基,22℃共培养6d,通过50mgL-1卡那霉素抗性筛选、叶片GUS染色、uidA和NptII基因PCR特异扩增、PCR产物测序及NptII基因Southern检测,鉴定出11株转基因植株,并通过嫁接和次生体胚发生,获得来自8个转基因株系的681株转基因植株,移栽成活253株。
- 黄天带李哲孙爱花周权男华玉伟黄华孙
- 关键词：橡胶树根癌农杆菌花药愈伤组织
- 大蕉幼雄花易碎胚性愈伤组织长期继代培养及其植株再生被引量：6
- 2010年
- 大蕉未成熟雄花接种到胚性愈伤组织诱导培养基中,4～5个月后可诱导出胚性愈伤组织,并可在继代培养基上长期增殖。这些继代培养了6年多的松软易碎的胚性愈伤组织转移到含有0.2mg/L6-BA的分化培养基中,可诱导出芽,得到了53株再生植株,这些再生植株可进一步扩大繁殖。组织学切片证明长期继代培养的愈伤组织维持了胚性的状态。
- 李哲
- 关键词：植株再生
