重庆市科技攻关计划(CSTC2005AB5201)
- 作品数：3 被引量：16H指数：2
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- 发文基金：重庆市科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 细胞培养与PCR法检测生殖器疱疹病毒的对比研究被引量：5
- 2008年
- 目的：比较不同方法检测生殖器疱疹病毒感染的效率。方法：采用病毒培养和PCR法检测疑为生殖器疱疹病毒感染者标本60例，并用PCR作病毒分型。结果：根据病史及临床表现确诊的生殖器疱疹患者标本60例中，病毒培养法阳性36例，阳性牢60％（36／60）；PCR检测单纯疱疹病毒（HSV）阳性45例，阳性率75％（45／60），和病毒培养相比，差异非常显著（χ^2=26．76，P〈0．01）；PCR分型结果显示阳性标本均为单纯疱疹病毒Ⅱ型（HSV-2）。水疱和脓疱标本的病毒培养和PCR检测阳性率均较高（80．0％～93．3％），糜烂、结痂、斑丘疹标本检测中PCR阳性率（20．0％～66．7％）高于病毒培养（0～33．3％）。结论：对疑为生殖器疱疹患者作病原学诊断，采集水疱、脓疱标本进行病毒分离或PCR检测较佳。
- 陈志瑾黎庶杨杰侯瑞胡福泉饶贤才
- 关键词：生殖器疱疹单纯疱疹病毒多聚酶链反应
- 肽抗生素hPAB-β在毕赤酵母中的表达与活性鉴定被引量：10
- 2007年
- 目的构建表达人源肽抗生素hPAB-β的重组毕赤酵母,为大量制备hPAB-β奠定基础。方法用PCR及引物延伸法得到天然及优化的hPAB-β序列,克隆入pPIC9K质粒,转化DH5α大肠埃希菌,用酶切和核苷酸测序鉴定。重组质粒经SalⅠ酶线性化,整合入毕赤酵母GS115中,在DNA,mRNA及蛋白水平鉴定阳性重组子。结果构建的含天然及优化序列的重组质粒酶切均可得到相应大小的插入片段,与预期相符,测序结果表明序列和阅读框均正确。线性化的重组质粒转入GS115后,得到7个不同的高拷贝阳性转化子,均能表达重组肽并具有良好的抑菌活性。结论本研究成功构建含天然及优化hPAB-β序列的重组毕赤酵母工程菌,能够用于肽抗生素hPAB-β的制备。
- 侯瑞饶贤才陈志瑾杨杰胡晓梅丛延广谭银玲胡福泉
- 关键词：毕赤酵母
- 转座突变株插入位点侧翼序列的研究被引量：1
- 2007年
- 目的比较用于扩增弗氏枸橼酸杆菌转座突变株插入位点侧翼序列的3种PCR方法,以选择最有效、最简便的扩增方法进行转座突变基因的分析。方法分别采用step-outPCR、随机引物巢式PCR和反向PCR对弗氏枸橼酸杆菌转座突变株基因组中插入位点的侧翼序列进行扩增,并取产物进行直接测序,以对方法的有效性进行比较。结果随机引物巢式PCR方法简便,但扩增产物的条带较多,不利于后续的测序操作。Step-outPCR产物中非特异性片段更多,方法不可取,反向PCR法最为简便有效。结论反向PCR法适宜用于扩增弗氏枸橼酸杆菌转座突变株插入位点的侧翼序列,可以对突变基因进行定位。
- 陈志瑾朱军民饶贤才丛延广
- 关键词：PCR
