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蛋白磷酸酶2A催化亚基α显性负性突变体表达载体对肝癌细胞生长的影响被引量：3: 2013年; 目的构建肝癌组织特异性启动子驱动的蛋白磷酸酶2A催化亚基Ⅸ显性负性突变体（DN—PP2Acca表达载体，研究其对肝癌细胞生长的影响。方法将甲胎蛋白（AFP）基因的增强子和磷酸甘油酸激酶（pgk）基因的启动子组合形成的肝癌组织特异性AFpg启动子。采用定点突变将野生型蛋白磷酸酶2A催化亚基仅（PP2AcⅨ）突变为DN—PP2Aca将AFpg启动子和DN—PP2Ac。编码序列构建成AFpg启动子调控的DN—PP2Aca 表达载体pGL3-Basic—AFpg—PP2Acc。荧光素酶报告基因实验检测AFpg启动子的转录活性。质粒pcDNA3．1（＋）、pGL3-BaSic、pcDNA3．1（＋）-DN—PP2Ac0a、pGL3-Basic-AFpg、pGL3-Basic-AFpg-PP2AcGa分别转染L02、SK—Hep-1、HepG2和Hep3B细胞，Westernblot检测PP2Ac蛋白表达水平，四甲基偶氮唑盐比色法检测细胞生长情况。成组t检验分析不同处理组间的细胞活力差异。结果L02、SK-Hep-1、HepG2和Hep3B细胞中，AFpg启动子相对荧光素酶活性分别为3．61±1．07、3．46±0．66、98．70±18．60、88．70±19．53，AFpg启动子在表达AFP的细胞中具有高转录活性。pGL3-Basic—AFpg—PP2AcⅨ可特异性地使DN—PP2AcⅨ表达于AFP阳性肝癌细胞HepG2和Hep3B，并抑制其生长，转染72h后，HepG2细胞活力下降42．65％±3．99％，Hep3B细胞活力下降39．87％±3．91％，与0h时比较，差异均有统计学意义（t值分别为13．0563和12．9920，P值均〈0．01）。pGL3-Basic-AFpg—PP2Ac0a对AFP阴性细胞的生长无明显影响。结论AFpg启动子调控的DN—PP2Aca表达载体特异性地抑制AFP阳性肝癌细胞的生长，可用于肝癌组织特异性基因治疗。; 李道明李伟陶敏陈凯龚斐然徐泽宽陈政; 关键词：肝细胞甲胎蛋白类

蛋白磷酸酶2A抑制剂对胰腺癌细胞株CFPAC-1c—Jun氨基末端激酶／蛋白激酶B／叉头转录因子信号通路的调控作用: 2013年; 斑蝥素可抑制蛋白磷酸酶2A（PP2A），并抑制胰腺癌细胞生长。我们发现，斑蝥素可激活c—Jun氨基末端激酶（JNK）。本研究旨在检测斑蝥素和经典PP2A抑制剂冈田酸对JNK／Akt／FKHR通路的影响。; 李伟陈凯李道明陶敏龚斐然徐泽宽; 关键词：蛋白磷酸酶2A 信号通路胰腺癌细胞株抑制剂蛋白激酶B

蛋白磷酸酶2A抑制剂对胰腺癌细胞丝裂原活化蛋白激酶信号通路的激活作用及对细胞生长的影响被引量：4: 2013年; 中药斑蝥中的有效成分斑蝥素（CAN）及其衍生物对多种肿瘤细胞具有抑制作用[1-2]，我们发现斑蝥素可抑制胰腺癌细胞的生长和转移[1]。斑蝥素是蛋白磷酸酶2A（PP2A）的选择性抑制剂，PP2A可使细胞信号通路中的多种激酶去磷酸化而失活，这些激酶包括与细胞生长密切相关的丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）：细胞外信号调节激酶（ERK）、c-jun氨基端激酶（JNK）和p38等。; 李伟陶敏陈凯陈政龚斐然徐泽宽; 关键词：丝裂原活化蛋白激酶蛋白磷酸酶2A 选择性抑制剂细胞信号通路胰腺癌细胞 C-JUN氨基端激酶

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苏州市科技计划项目(SYS201112)

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