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湖北省科技攻关计划(2002AA304806)
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相关作者:
张丽
张路
汪涯雅
周红升
戴敏
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相关机构:
华中科技大学
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华中科技大学
作者
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张东华
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戴敏
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周红升
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汪涯雅
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张路
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张丽
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中华肿瘤杂志
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2008
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负载慢性髓系白血病28的树突状细胞介导的抗淋巴细胞白血病效应
2008年
目的构建慢性髓系白血病(CML)28的树突状细胞(DC)核酸疫苗,观察其对淋巴细胞白血病的抗肿瘤效应。方法从pcDNA3.1HisA—CML28中克隆出6×His及CML28的cDNA全长,酶切后连接至真核表达载体pIRES2-增强型绿色荧光蛋白(EGFP);从健康人外周血中分离外周血单个核细胞(PBMC),在白介素4(IL4)和粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM—CSF)条件下诱导分化为DC;用电穿孔法将重组质粒pIRES2-EGFP—CML28导入DC,Westernblot检测His—CML28融合蛋白的表达,荧光显微镜检测EGFP的表达;用表达CML28的DC刺激同基因型淋巴细胞作为效应细胞,淋巴细胞白血病患者的PBMC作为靶细胞,以乳酸脱氢酶(LDH)释放实验测定其抗肿瘤效应。结果重组质粒pIRES2-EGFP—CML28导入DC后,能正确表达His—CML28融合蛋白及EGFP。经表达CML28的DC刺激的同基因型淋巴细胞能特异性杀伤淋巴细胞白血病患者的PBMC,杀伤率为68.3%,明显高于空白对照组(25.8%)和阴性对照组(20.7%),差异有统计学意义(P〈0.01);而对健康人PBMC的杀伤活性较弱,杀伤率为20.5%。结论CML28能诱导特异性的细胞免疫,负载CML28的DC疫苗在体外对淋巴细胞白血病具有显著的抗肿瘤效应。
张路
张东华
周红升
汪涯雅
戴敏
张丽
关键词:
树突状细胞
核酸疫苗
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