湖北省自然科学基金(2006ABA094)
- 作品数:3 被引量:7H指数:2
- 相关作者:赵云斌余谨黄巍刘继红凌青更多>>
- 相关机构:华中科技大学武汉市医学科学研究所武汉血液中心更多>>
- 发文基金:湖北省自然科学基金武汉市青年科技晨光计划更多>>
- 相关领域:医药卫生理学更多>>
- 火焰原子吸收光谱法测量铜和铅增敏作用的研究被引量:5
- 2010年
- 目的:报道了酸、表面活性剂/有机溶剂以及超声对火焰原子吸收光谱法测定铜和铅的增敏作用。方法:在试液中加入一定浓度的酸、表面活性剂/有机溶剂以及进行超声处理,用火焰原子吸收光谱法测定梯度浓度铜和铅的吸光度值比较灵敏度变化,并对增敏的原因作了初步探讨。结果:火焰原子吸收法测定2.0 g/ml~10.0 g/ml的铜,灵敏度最大可提高5.04倍(试液含0.1%SDS,经10 min超声作用后测定)。火焰原子吸收法测定10.0 g/ml~30 g/ml的铅,灵敏度最大可提高5倍(试液含0.1%SDS和3%正丁醇,经10 min超声作用后测定)。结论:在试液中加入一定浓度的酸、表面活性剂/有机溶剂可提高火焰原子吸收光谱法测定铜和铅的灵敏度,超声作用后灵敏度进一步提高。
- 凌青余谨赵云斌刘继红
- 关键词:火焰原子吸收光谱法超声铅铜
- 高效液相色谱法测定抑制剂对肿瘤坏死因子-α转化酶的抑制作用被引量:2
- 2010年
- 目的对高效液相色谱法(HPLC)测定抑制剂对肿瘤坏死因子-α转化酶(TACE)的抑制作用进行方法改进,以提高其准确度和普及性,并用于测定抑制剂GM6001及抑制剂A对TACE的抑制作用。方法TACE与多肽底物经37℃孵育15 min后,加入Ala-Dpa作为内标物,用高效液相色谱法进行分析。以55%甲醇水溶液为流动相,检测波长353 nm。根据剩余底物与内标物的色谱峰面积比,从校准曲线中得出底物的转化量,据此计算TACE的酶活性。结果底物与内标物的色谱峰面积比与底物浓度呈良好线性关系,相关系数为0.996 8,线性范围10μmol/L至400μmol/L。精密度试验表明,采用内标法定量,精密度得到显著改善。经测定,抑制剂GM6001及抑制剂A对TACE的半数抑制浓度IC50分别为317.5 nmol/L和175.8 nmol/L。结论以Ala-Dpa作内标物,HPLC测定TACE酶活性,为TACE抑制剂的筛选提供了一种更准确、更实用的方法。
- 申玲玲顾久玲黄巍赵云斌
- 关键词:高效液相色谱法内标法
- 血浆Ⅳ型胶原酶含量显色测定法的建立及其应用被引量:1
- 2010年
- 目的建立一种显色法检测血浆Ⅳ型胶原酶活性,探讨健康人群血浆中活性形式Ⅳ型胶原酶的参考区间范围。方法以琥珀酰明胶作为酶切底物,采用TNBS显色剂对酶切产生的末端氨基显色,使用酶标仪在405nm处测量其吸光度。通过对其显色剂用量、显色稳定性和最佳检测波长等因素进行探讨,得出测定血浆Ⅳ型胶原酶的最优分析条件,采用回收实验、精密度实验对其进行方法学评价,并与夹心ELISA进行比较。采用该方法检测了112名健康人血浆Ⅳ型胶原酶含量。使用SPSS软件进行统计学分析,建立健康人血浆Ⅳ型胶原酶含量双侧95%可信区间。结果显色法检测血浆Ⅳ型胶原酶,总测定时间〈1.5h,线性范围1.5—10.0mg/L,最低检出限为0.965mg/L,与ELISA法相关性良好(R2=0.9997,P〈0.01),批内变异系数〈3.564%,批间变异系数〈9.821%。健康人血浆Ⅳ型胶原酶含量双侧95%的可信区间为33.38~49.80mg/L。结论血浆Ⅳ型胶原酶含量显色法可以应用于检测血浆中活性形式Ⅳ型胶原酶的含量,并建立了健康人血浆Ⅳ型胶原酶含量参考区间。
- 余谨赵云斌黄巍尹建平
- 关键词:胶原酶类三硝基苯磺酸