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大连市科技计划项目(2008B12NC080)

作品数：1 被引量：1H指数：1
相关作者：肇慧君张瑞刘霞张秀云吴斌更多>>
相关机构：辽宁出入境检验检疫局大连工业大学河南农业大学更多>>
发文基金：大连市科技计划项目更多>>
相关领域：生物学更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇生物学

主题

  • 1篇蛋白基因
  • 1篇衣壳
  • 1篇衣壳蛋白
  • 1篇衣壳蛋白基因
  • 1篇原核表达
  • 1篇猪繁殖
  • 1篇猪繁殖与呼吸...
  • 1篇猪繁殖与呼吸...
  • 1篇克隆
  • 1篇呼吸综合征
  • 1篇呼吸综合征病...
  • 1篇基因
  • 1篇基因克隆
  • 1篇核衣壳
  • 1篇核衣壳蛋白
  • 1篇核衣壳蛋白基...
  • 1篇繁殖
  • 1篇繁殖与呼吸综...
  • 1篇繁殖与呼吸综...
  • 1篇ORF7

机构

  • 1篇大连工业大学
  • 1篇河南农业大学
  • 1篇辽宁出入境检...

作者

  • 1篇贾赟
  • 1篇吴斌
  • 1篇张秀云
  • 1篇刘霞
  • 1篇张瑞
  • 1篇肇慧君

传媒

  • 1篇大连工业大学...

年份

  • 1篇2011
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF7基因的克隆、高效表达与鉴定被引量：1
2011年
根据猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV)VR2332株ORF7的全长基因序列设计一对特异性引物,应用RT-PCR扩增出完整的ORF7基因,并将PCR产物克隆至pMD-18T载体进行测序分析。双酶切测序后重组质粒pMD-18T-N得到目的片段连接至原核表达载体pET-28a(+)上,构建重组质粒pET-28a(+)-N。再转化至BL21宿主菌,对诱导表达条件(IPTG质量浓度、诱导时间、诱导温度)进行优化。结果显示,在37℃、0.2 mmol/LIPTG诱导5 h可实现重组N蛋白的高效表达。该重组N蛋白经Ni-NTA亲和层析柱纯化后,Western-blotting分析显示,重组的N蛋白与PRRSV阳性血清发生特异性反应,表明表达的重组N蛋白具有较好的反应活性。
张秀云吴斌肇慧君贾赟刘霞张瑞
关键词：基因克隆原核表达
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