中央财政支持地方高校发展专项资金(CXTD16)
- 作品数：2 被引量：5H指数：1
- 相关作者：秦蕾白雪松阎斌伦毕可然张晓君更多>>
- 相关机构：淮海工学院中国矿业大学更多>>
- 发文基金：中央财政支持地方高校发展专项资金江苏省水产三项工程项目江苏高校优势学科建设工程项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 水生动物副溶血弧菌、霍乱弧菌的PCR同步检测方法被引量：4
- 2013年
- 副溶血弧菌和霍乱弧菌((non-O1/non-O139型),不仅对水产动物具有广泛和强的致病作用,而且危害人类的健康,是人和水产动物共患病的病原菌。以副溶血弧菌的toxR基因及霍乱弧菌的lolB基因设计2对引物,建立了副溶血弧菌和霍乱弧菌的PCR同步检测方法,相应的扩增目的片段分别为368bp和519bp。在PCR反应体系中副溶血弧菌和霍乱弧菌可扩增出目的基因片段,5株对照菌无任何扩增条带,表明所建立的双重PCR检测方法特异性较强,且所设计的2对引物间无交叉干扰现象;灵敏性试验结果表明,副溶血弧菌的检测最低限1.75×102 cfu/mL,霍乱弧菌的检测最低限1.25×102 cfu/mL,具有较好的灵敏性;人工染菌水产品检测结果显示,人工染菌的8种水产品均为阳性检测结果,而未染菌组均为阴性。本试验建立的双重PCR法特异性强、灵敏性高,可用于副溶血弧菌和霍乱弧菌引起的水产动物疾病的诊断及水产品的安全检测。
- 张晓君白雪松毕可然周宝芸秦蕾阎斌伦秦国民
- 关键词：副溶血弧菌霍乱弧菌
- 基于toxR和rtxA基因水生动物2种病原弧菌的同步检测方法的建立被引量：1
- 2013年
- 本研究选择副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)的toxR和霍乱弧菌(Vibrio cholerae)的rtxA基因序列设计2对特异性引物,建立了在同一反应体系中同步检测2种病原菌的双重PCR检测方法,扩增目的片段大小分别为368bp和417bp。特异性试验结果表明,在同一反应体系下,副溶血弧菌和霍乱弧菌扩增出目的条带,其他4种对照病原细菌无任何扩增条带;单一及双重PCR敏感性试验结果表明,稀释浓度在(109～102)CFU/mL,单一PCR与双重PCR均可扩增出目的条带,且单一PCR与双重PCR表现出了相同的灵敏度(102 CFU/mL),表明本实验优化的双重PCR反应条件良好;人工染菌样品均可扩增出两条目的条带,表明该方法可直接用于针对病原副溶血弧菌和霍乱弧菌感染的水生动物疾病的检测以及水产品的安全检测,在水产品致病菌的风险评估和大规模样本的分析检测领域具有较高的潜在应用价值。
- 白雪松张晓君阎斌伦毕可然秦蕾
- 关键词：副溶血弧菌霍乱弧菌双重PCR
