陈蔚文
作品数： 44被引量：100H指数：6
  • 所属机构:山东大学
  • 所在地区:山东省 济南市
  • 研究方向:医药卫生
  • 发文基金:国家自然科学基金

相关作者

张建业
作品数：91被引量：346H指数：10
供职机构：山东大学
研究主题：前列腺癌 细胞凋亡 前列腺肿瘤 启动子 前列腺特异抗原
张鹏举
作品数：31被引量：47H指数：3
供职机构：山东大学
研究主题：细胞凋亡 前列腺肿瘤 启动子 NKX3.1 转录因子
姜安丽
作品数：40被引量：92H指数：5
供职机构：山东大学医学院生物化学与分子生物学研究所
研究主题：启动子 NKX3.1 前列腺肿瘤 前列腺癌细胞 细胞增殖
赵健
作品数：25被引量：81H指数：6
供职机构：山东大学齐鲁医院
研究主题：肺肿瘤 垂体瘤转化基因 MICRORNA 基因表达 有丝分裂
胡晓燕
作品数：72被引量：237H指数：8
供职机构：山东大学医学院
研究主题：细胞凋亡 活性氧 前列腺肿瘤 PC12细胞凋亡 转染
作品列表
利用序列特异性DNA亲和层析分离纯化一种前列腺细胞核蛋白被引量：2
2001年
目的 :分离纯化RFA结合蛋白并加以鉴定 ,为进一步深入研究RFA及其结合蛋白相互作用和参与AR介导的PSA基因表达奠定基础。方法 :培养人前列腺癌细胞PC 3,提取核蛋白 ,以RFA序列为探针进行亲和层析分离纯化目的蛋白 ,层析前后均用电泳迁移率变动分析 (EMSA)检测目的蛋白的功能。经SDS PAGE测定纯化蛋白的分子量 ,然后切下目的蛋白条带 ,进行蛋白质鉴定。结果 :纯化蛋白在SDS PAGE图谱上 36kD附近呈现单一条带 ,氨基酸组成分析和质谱分析显示纯化蛋白条带含有 2种蛋白 ,与核内不均一核糖核蛋白A1,A2 (hnRNPA1,A2 )高度同源。结论 :①以DynalM 2 80链亲和素磁珠为固相介质的DNA亲和层析 ,具有简便、快速、无毒的优点 ,可在对目的蛋白了解甚少的条件下 ,以较高的纯度将其纯化 ;②RFA结合蛋白与hnRNP超家族成员hnRNPA1,A2高度同源 ,其与RFA相互作用的具体机制和意义有待进一步研究。
陈蔚文张建业赵健张莲英陈留存张孟业
关键词：核糖核蛋白前列腺特异抗原前列腺癌
前列腺癌相关基因AMACR的转录调控研究
近年来随着人口老龄化及饮食结构的改变,前列腺癌的发病率和死亡率有迅速上升的趋势,探索前列腺癌的综合治疗方法尤其是基因治疗已日益受到重视。AMACR是新近发现的前列腺癌高度相关的基因,本课题对其在前列腺癌细胞中的表达调控机...
陈蔚文
关键词：前列腺癌启动子转录
文献传递
miRNA let-7a1真核表达载体的构建及对肺癌细胞增殖的影响被引量：3
2009年
目的:构建miRNA let-7a1真核表达载体,研究其在肺癌A549细胞株的表达及对A549细胞增殖的影响。方法:以人肺癌细胞A549的总RNA为模板,RT-PCR扩增miRNApre-let-7a1基因序列,将miRNApre-let-7a1基因克隆到真核表达载体pSilencerTM4.1-CMVneo中,构建成pSilencerTM4.1-let-7a1重组体。将pSilencerTM4.1-let-7a1表达载体瞬时转染肺癌A549细胞,RT-PCR法检测miRNAlet-7a1在转录水平的表达。根据miRBaseTargets数据库,查hsa-let-7a1靶序列,构建let-7a1靶序列-报道基因融合质粒pMIR-report-let-7a1T,与pSilencerTM4.1-let-7a1表达载体共转染A549细胞,通过荧光素酶活性检测pSilencerTM4.1-let-7a1质粒对其靶序列的作用。MTT法检测pSilencerTM4.1-let-7a1转染A549细胞后,对细胞增殖的影响。结果:pSilencerTM4.1-let-7a1真核表达栽体和let-7a1靶序列-报道基因融合质粒经酶切及测序鉴定正确。pSilen-cerTM4.1-let-7a1转染A549细胞后,经RT-PCR证明能有效表达miRNAlet-7a1。pSilencerTM4.1-let-7a1质粒和pMIR-report-let-7a1T质粒共转染A549细胞后,通过报告基因检测,相对荧光素酶活性明显降低,表明pSilencerTM4.1-let-7a1转染A549细胞后,可表达let-7a1并具有生物学活性。MTT检测结果显示:pSilencerTM4.1-let-7a1转染后的A549活细胞数目明显减少。结论:成功构建了真核表达载体pSilencerTM4.1-let-7a1,转染肺腺癌A549细胞后能有效表达,miRNAlet-7a1基因过表达抑制A549细胞的增殖。
张菊关恒云张鹏举陈蔚文刘闻闻赵健胡晓燕姜安丽
关键词：MIRNA真核表达载体A549细胞细胞增殖
新型汽油防爆剂MMT对人前列腺细胞系PC-3M的凋亡作用
2007年
王立祥曾季平秦文陈蔚文张鹏举
关键词：PC-3M细胞前列腺
前列腺癌恶性进展的新机制和预后评估分子标志物的研究
韩博苑辉卿王林张晶陈蔚文杨晓庆田克立戚美刘志艳
近年来，中国前列腺癌发病率快速增长，正日益成为严重威胁中国老年男性健康的疾病。临床面临的两大挑战是如何精确区分前列腺癌的“惰性”与“侵袭性”和如何治疗去势难治性前列腺癌(CRPC)。该项目紧密围绕上述临床问题，在十多项国...
关键词：
关键词：前列腺癌分子标志物肿瘤治疗
前列腺特异的转录因子NKX3.1上调Dicer1基因的表达被引量：1
2010年
目的:研究前列腺特异转录因子NKX3.1对Dicer1基因表达的影响。方法:转染pcDNA3.1-NKX3.1至前列腺癌PC3细胞,通过G418筛选,有限稀释法克隆培养获得NKX3.1稳定转染的PC3细胞-PC3(+);采用基因芯片检测NKX3.1对前列腺癌PC3细胞基因组表达谱的影响。进一步应用RT-PCR、Western blot-ting进行验证。为进一步检测Dicer1表达增高、促进microRNA的成熟作用,构建了microRNA let-7a-1靶序列-报道基因融合质粒,转染PC3细胞和PC3(+)细胞,通过报道基因检测成熟microRNA let-7a-1对其靶序列的作用。结果:基因组芯片显示,NKX3.1稳定表达的PC3(+)细胞中,Dicer1表达明显高于PC3细胞。RT-PCR、Western blotting结果验证PC3(+)细胞中Dicer1mRNA和蛋白质的表达水平均高于PC3细胞。microRNA let-7a-1靶序列-报道基因融合质粒,转染PC3细胞和PC3(+)细胞后,报告基因检测,PC3(+)细胞中荧光素酶活性明显低于PC3细胞。结论:NKX3.1可上调前列腺癌PC3细胞中Dicer1的表达,促进microRNA的成熟及作用。
张菊关恒云张鹏举陈蔚文陈兆波倪娜娜朱闻捷王坤胡小燕姜安丽
关键词：PC3细胞
前列腺组织特异性表达载体pPSA-EGFP的构建被引量：2
2004年
目的:构建前列腺组织特异性表达载体。方法:利用基因重组技术将PSA基因上游5.8kb的调控序列克隆至真核表达载体pEGFP鄄1,构建前列腺组织特异性表达载体pPSA鄄EGFP;用脂质体Lipo鄄fectamine将载体pPSA鄄EGFP分别转染前列腺癌细胞株PC鄄3m、乳腺腺癌细胞株MCF鄄7、结肠腺癌细胞株HT鄄29、肝癌细胞株HepG2、宫颈癌细胞株HeLa和肺腺癌细胞株A549多种细胞,转染后48h荧光显微镜下观察GFP的表达情况,pPSA鄄EGFP和phAR共转染PC鄄3m细胞。结果:在pPSA鄄EGFP和phAR共转染的PC鄄3m细胞中绿色荧光蛋白表达明显,MCF鄄7细胞中绿色荧光蛋白表达微弱,其他细胞中荧光蛋白不表达。结论:构建的前列腺表达载体pPSA鄄EGFP具有组织特异性。
贾立宁张建业张莲英孔峰陈蔚文胡晓燕
关键词：EGFP前列腺组织特异性表达共转染PC-3M细胞组织特异性
maspin基因启动区的初步鉴定被引量：3
2005年
目的:研究maspin基因表达的调控机制。方法:利用PCR技术扩增maspin基因5'上游启动区860bp(-765～+95bp)不同的缺失片段,并将它们分别与荧光素酶(LUC)报告基因相连,构建了6种maspin-LUC报告基因表达质粒,通过转染实验检测maspin启动区不同长度片段在雄激素依赖性前列腺癌细胞(LNCaP)和雄激素非依赖性前列腺癌细胞(PC-3M)中驱动荧光素酶表达的活性。并转染雄激素表达受体(AR)到PC-3M细胞,观察雄激素及其受体对不同片段表达活性的作用。结果:maspin基因启动区(-312～247bp)之间含有与雄激素受体相关的负性调控元件,在(+14～95bp)之间含有一个功能性的中文(Sp1)调控元件。结论:maspin基因的表达受雄激素受体及Sp1的调节。
贺美兰姜安丽张鹏举陈蔚文刘志芳张建业
关键词：基因MASPIN核酸前列腺肿瘤
前列腺特异抗原启动子中一种DNA结合蛋白的研究
前列腺特异抗原(PSA)基因特异地在前列腺上皮细胞表达,且受雄激素调节.雄激素通过其受体(AR)激活PSA基因转录,PSA启动子-160bp附近存在雄激素应答元件(ARE),但是仅依赖雄激素应答元件(ARE)不足以介导雄...
陈蔚文Charles Y F Young张莲英陈留存赵健庞维秋张建业
文献传递
氯化钴诱导PC12细胞凋亡的分子机制被引量：7
2005年
目的确定氯化钴(CoCl2)诱导PC12细胞凋亡的分子机制。方法500μmolLCoCl2诱导PC12细胞24h后,检测活性氧(ROS)生成量的变化以及抗氧化剂N乙酰半胱氨酸(NAC)、二硫代苏糖醇(DTT)对细胞存活率和ROS生成量的影响;琼脂糖凝胶电泳检测NAC、DTT对CoCl2诱导PC12细胞DNA片段化的影响;利用RTPCR法检测凋亡相关基因bclxl和bax在PC12细胞调亡过程中的表达及NAC、DTT对基因表达的影响;化学发光法检测NAC、DTT对Caspase3表达的作用。结果在CoCl2诱导PC12细胞凋亡中,ROS生成量明显上升,为正常时的2.92倍;NAC、DTT可提高细胞存活率,由53.1%上升为94.8%和92.3%(P<0.01),并有效抑制ROS的生成,为正常时的24.2%和82.1%(P<0.01);同时抑制DNA片段化的发生。bclxl在细胞凋亡过程中表达明显下降,bax表达无明显变化;NAC和DTT可使bclxl的表达明显上升。Caspase3在细胞凋亡中被激活,NAC、DTT可抑制Caspase3的表达(P<0.01)。结论ROS介导了CoCl2诱导的PC12细胞凋亡,这一过程与抑制bclxl表达,激活Caspase3有关。
曾季平王立祥胡晓燕杨玲玲孔峰吴伟芳陈蔚文崔行
关键词：氯化钴PCI2细胞细胞凋亡活性氧
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