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陈盛霞
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- 所属机构:江苏大学临床医学院
- 所在地区:江苏省 镇江市
- 研究方向:医药卫生
- 发文基金:国家自然科学基金
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- 吴亮
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- 目的:建立高效液相色谱(HPLC)测定糖化血红蛋白(GHb)方法,并对其进行评价。方法:以Bio-Rex 70阳离子交换树脂为填料,在HPLC仪上采用梯度洗脱分离测定GHb,对其分析性能进行评价。对50例健康人和50例糖尿病患者标本中糖化血红蛋白A1c(HbA1c)的含量进行测定。结果:Hb、HbA0和HbA1c的吸收光谱一致,吸收峰均为415 nm。该法能使HbA1c与HbA1(a+b)、HbA0清楚分离,HbA1c峰面积或峰高与标本中HbA1c含量成正比。对临床标本测定的变异系数为0.54%~1.15%;平均回收率为97.7%,质控品的实测值在标示值范围内;在0~15.8%范围内线性良好;未见脂血、黄疸对测定的干扰;标本稳定性与保存条件和标本特性有关。健康人和糖尿病患者HbA1c检测结果分别为3.3%~6.1%和6.8%~14.4%。结论:Bio-Rex 70-HPLC法测定糖化血红蛋白具有精密度好、准确度高、线性范围宽等优点,可用于GHb或HbA1c常规方法的评价和临床标本的分析。
- 涂国华姜旭淦李礼吴亮逯兆喜陈盛霞
- 关键词:糖化血红蛋白高效液相色谱离子交换树脂
- 卡氏肺孢子虫肺炎动物模型实验诊断的研究
- 目的:比较采用SD大鼠和Wistar大鼠建立卡氏肺孢子虫肺炎(Pneumocystis carinii pneumonia,PCP)动物模型的差异,寻找适用的实验诊断方法.方法:SD大鼠和Wistar大鼠均随机分成实验组...
- 陈盛霞
- 关键词:卡氏肺孢子虫肺炎动物模型GIEMSA染色PCRPCR-ELISA
- 文献传递
- 基于算子的图像分解
- 2013年
- 图像的形态学卡通纹理分解与图像层级分解是近年来图像分析领域的研究热点。针对现有图像分解算法求解过程复杂且不易对图像层级分解的问题,提出了一种基于算子的快速图像分解算法。在该方法中,由局部奇异线性算子来刻画图像的纹理成分,剩余图像信号则被描述为卡通成分;同时通过引入自适应参数调节的方法来实现对剩余信号的分解,进而实现图像的层级分解。其中,自适应参数由图像局部全变差变化率来确定。实验结果表明,该算法具有较好的运行效率,同时具有较好的分解视觉效果。
- 李峰曾晓辉陈盛霞沈玉娟
- 关键词:积分算子微分算子图像分解
- NLRP3炎症小体介导单核细胞增生李斯特菌感染小鼠和巨噬细胞的细胞焦亡被引量:4
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- 目的:探讨单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes,Lm)感染引起小鼠和巨噬细胞的细胞焦亡作用机制。方法:体内实验,C57B/6小鼠分为Lm组和阴性对照组(NC组),分别经小鼠尾静脉注射Lm菌液5×104 CFU/鼠和无菌PBS,24 h后取脾脏、肝脏、脑组织,蛋白质印迹法检测焦亡及核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)炎症小体相关蛋白的表达。体外实验,分Lm组、NC组、LPS+ATP组、Lm+MCC950组和LPS+ATP+MCC950组。以感染复数(multiplicity of infection,MOI)=10 Lm感染THP-1源巨噬细胞,ELISA检测细胞上清液IL-1β,实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法分别检测细胞焦亡及NLRP3炎症小体mRNA和蛋白的表达,免疫荧光检测Lm感染后凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD,ASC)斑点及与NLRP3的共定位。结果:Lm感染小鼠和巨噬细胞后,消化道皮肤素D(gasdermin D,GSDMD)蛋白表达水平均明显升高(P<0.05),且出现GSDMD蛋白氨基端裂解片段(gasdermin D N-terminal,GSDMD-NT)。Lm感染巨噬细胞1 h、3 h、6 h,NLRP3、caspase-1、IL-1β、IL-18 mRNA水平均明显升高(P<0.05),且3 h升高最明显。Lm感染小鼠的脾、肝、脑组织NLRP3、pro-caspase-1、pro-IL-1β及裂解片段caspase-1 p20、IL-1β-17蛋白表达量均明显升高(P<0.05)。Lm感染巨噬细胞后IL-1β分泌水平升高,细胞上清液中检测到裂解片段caspase-1 p20、IL-1β-17的分泌,细胞裂解液中NLRP3、pro-caspase-1、pro-IL-1β蛋白表达升高(P<0.05),荧光显微镜观察到ASC斑点形成且与NLRP3蛋白存在共定位。加入NLRP3特异性抑制剂MCC950预处理后,巨噬细胞GSDMD-NT明显减少(P<0.05)。结论:Lm感染导致的细胞焦亡主要与NLRP3炎症小体的激活有关。
- 袁琳朱昱蓉林琳黄霜姜旭淦陈盛霞
- 关键词:单核细胞增生李斯特菌白细胞介素-1Β
- 阴道毛滴虫巨噬细胞迁移抑制因子的原核表达及多克隆抗体制备被引量:1
- 2019年
- 目的:原核表达阴道毛滴虫巨噬细胞迁移抑制因子(macrophage migration inhibitory factor of Trichomonas vaginalis,Tv MIF)并制备多克隆抗体。方法:采用PCR技术扩增Tv MIF基因,并克隆至p TG19-T载体,酶切及测序鉴定后,再定向插入p ET-30a(+)载体。将重组载体转化至大肠埃希菌BL21(DE3)中,用IPTG诱导蛋白表达。采用镍柱亲和层析法纯化Tv MIF蛋白,并免疫新西兰白兔制备多克隆抗体,蛋白质印迹法检测多克隆抗体。结果:从阴道毛滴虫c DNA中扩增出Tv MIF基因片段,测序结果与基因库收录序列一致。成功构建p ET-30a-TvMIF重组质粒,重组Tv MIF蛋白约为15. 5 k Da,以可溶性蛋白形式存在。获得Tv MIF重组蛋白的多克隆抗体,蛋白印迹法检出Tv MIF的特异性条带。结论:成功获得阴道毛滴虫MIF蛋白并制备了多克隆抗体,可用于后续研究阴道毛滴虫致病机制。
- 卢叶朱雨莲朱莉刘卿朱昱蓉凌薇唐昌霞姜旭淦陈盛霞曹建平
- 关键词:阴道毛滴虫巨噬细胞迁移抑制因子原核表达多克隆抗体
- 人可溶性生长刺激表达基因2蛋白的真核表达、纯化和鉴定被引量:1
- 2020年
- 目的构建人可溶性生长刺激表达基因2(sST2)蛋白的重组真核表达载体,获得高纯度的人sST2重组蛋白。方法根据人sST2基因序列设计引物,利用RT-PCR技术获得人sST2基因;构建人sST2-pcDNA3.1-his(-)重组真核表达载体;脂质体法转染COS7细胞,表达人sST2重组蛋白,并用镍柱亲和层析法纯化;用western blot和ELISA法对人sST2重组蛋白进行鉴定。结果PCR扩增产物用琼脂糖凝胶电泳分析,结果显示产物长度与预期一致,约为1000 bp;同源性比对分析结果显示,人sST2基因成功插入PGH-T载体;用Bam HⅠ和Hin dⅢ对重组真核表达载体双酶切后凝胶电泳分析,结果显示产物电泳位置与预期一致;表达产物经SDS-PAGE电泳结果显示在相对分子质量(M r)约为65000处有一明显条带,与预期蛋白质位置一致;western blot鉴定结果显示人sST2重组蛋白有His标签,ELISA鉴定结果显示人sST2重组蛋白有与抗sST2抗体结合的特异性抗原表位。结论通过重组DNA技术成功构建人sST2基因重组真核表达载体,通过蛋白质纯化技术成功获得人sST2重组蛋白。
- 汪慧张天成凌薇陈盛霞姜旭淦
- 关键词:真核表达蛋白质纯化
- HIV感染者血清IL-1α、IL-7、IL-12和IL-15水平的变化及意义被引量:2
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- 目的:观察HIV感染者血清IL-1α、IL-7、IL-12和IL-15水平的变化。方法:采用ELISA法检测20例HIV感染者及20例健康体检者血清IL-1α、IL-7、IL-12和IL-15水平。结果:HIV感染者血清IL-1α、IL-7、IL-15水平显著高于正常对照组(P均<0.01),IL-12水平显著低于正常对照组(P<0.01)。结论:HIV感染者血清IL-1α、IL-7、IL-12和IL-15水平发生明显变化,可用于HIV感染者病情的评估和预后判断。
- 周成林杨启生殷竹娟丁晓花苏兆亮陈盛霞
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- 2005年
- 目的 建立卡氏肺孢子虫 (P .c )DNA的聚合酶链反应 酶联免疫吸附测定 (PCR ELISA)方法 ,并探讨其应用价值。 方法 实验组患卡氏肺孢子虫肺炎的SD大鼠和Wistar大鼠各 2 8只 ,采用PCR法扩增大鼠肺组织DNA和支气管肺泡灌洗液 (BALF)DNA ,用PCR ELISA检测其扩增产物。 2 8只患病大鼠分别制作肺组织印片及BALF涂片 ,姬姆萨 (Giemsa)染色镜检 10 0个视野中有无P .c包囊 (或滋养体 ) ,与PCR ELISA检测扩增产物结果比较。 结果 两种方法检测大鼠肺组织DNA阳性率及BALFDNA阳性率 ,结果相同 ,均分别为 96 4% (2 7/2 8)和10 0 % (2 8/2 8)。Giemsa染色镜检P .c包囊 (或滋养体 ) ,结果为阳性的大鼠 ,PCR ELISA检测扩增产物结果也均为阳性。阴性对照组 ,两种大鼠的肺组织和BALF各 10份标本 ,均有 1只大鼠阳性。 结论 PCR ELISA检测大鼠卡氏肺孢子虫DNA ,敏感性较高 ,特异性较好 ,操作简便 ,具有实用价值。
- 陈盛霞姜旭淦仇锦波徐会娟帅连云
- 关键词:BALF卡氏肺孢子虫PCR-ELISA染色镜检DNA
- 临床革兰阴性杆菌整合子携带情况及其与耐药性的相关性分析被引量:11
- 2019年
- 目的研究临床分离的4种革兰阴性杆菌耐药性与整合子的关系。方法收集江苏大学附属医院2017年10月—12月临床分离的肺炎克雷伯菌56株、大肠埃希菌49株、铜绿假单胞菌45株及鲍曼不动杆菌48株,Vitek 2 Compact全自动鉴定和药敏分析仪及K-B法进行药敏试验;多重PCR法检测细菌携带Ⅰ类、Ⅱ类和Ⅲ类整合子情况,并比较细菌耐药性与携带整合子之间的关系。结果 4种革兰阴性杆菌中共有37.37%的菌株检出Ⅰ类整合酶基因,其中鲍曼不动杆菌的阳性率为54.17%,大肠埃希菌的阳性率为46.94%,肺炎克雷伯菌的阳性率为39.29%,铜绿假单胞菌的阳性率为6.67%,所有菌株均未检测到Ⅱ类和Ⅲ类整合酶基因。4种革兰阴性杆菌中,铜绿假单胞菌、大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌携带Ⅰ类整合子菌株对部分药物的耐药率较未携带整合子菌株差异有统计学意义,而携带Ⅰ类整合子的鲍曼不动杆菌的耐药率较未携带菌株差异均无统计学意义。结论Ⅰ类整合子在镇江地区临床分离革兰阴性杆菌中普遍存在,且与铜绿假单胞菌、大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药性存在一定的相关性。
- 周亚玲陈红朱丽华段秀杰臧福平高悦吴亮姜旭淦陈盛霞阴晴
- 关键词:革兰阴性杆菌整合子耐药性
- 江苏及周边地区副溶血性弧菌分子流行病学特征研究被引量:13
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- 目的了解江苏及周边地区副溶血性弧菌的分子流行病学特征。方法对2010年江苏及周边地区食物中毒事件中分离的、经API生化鉴定的63株副溶血性弧菌进行毒力基因(tdh、trh)测定、血清学分型和脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型。结果 tdh阳性率79.4%(50/63),trh阳性率1.6%(1/63);病人株血清型以O3∶K6为主(26/57),食品株以O1∶KUT为主(4/6);PFGE分型显示A-E群间相似度大于60%。结论江苏及周边地区中不同地区的副溶血性弧菌具有高度同源性,该地区副溶血性弧菌引起的食物中毒可能具有相同的污染源。
- 刘丽萍陈盛霞徐岚李薇薇裴晓燕郭云昌
- 关键词:副溶血性弧菌血清型同源性食源性致病菌