徐小洁
所属机构: 北京大学第一医院 所在地区: 北京市 研究方向: 生物学 发文基金: 国家自然科学基金
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叶棋浓 作品数:317 被引量:603 H指数:10 供职机构:军事医学科学院生物工程研究所 研究主题:真核表达 克隆 乳腺癌 转录活性 纯化 李玲 作品数:68 被引量:179 H指数:8 供职机构:大连医科大学附属第二医院 研究主题:真核表达 原核表达 克隆 纯化 细胞凋亡 冀全博 作品数:53 被引量:103 H指数:6 供职机构:中国人民解放军总医院 研究主题:骨肉瘤 真核表达 骨关节炎 骨肉瘤细胞 治疗靶标 梁迎春 作品数:31 被引量:38 H指数:4 供职机构:军事医学科学院生物工程研究所 研究主题:真核表达 克隆 原核表达 纯化 自噬 王涛 作品数:376 被引量:1,700 H指数:19 供职机构:东南大学医学院 研究主题:乳腺癌 晚期乳腺癌 乳腺肿瘤 内分泌治疗 真核表达
SPIN1促进非小细胞肺癌肿瘤的生长 本发明公开了SPIN1促进非小细胞肺癌肿瘤的生长。本发明提供了SPIN1蛋白及用于促进其表达的物质在如下任一中的应用:制备用于促进非小细胞肺癌细胞迁移和/或增殖的产品;或者制备用于促进非小细胞肺癌肿瘤生长的产品。实验证明... 冀全博 宋琪 徐亚梦 徐小洁 郑宇轩文献传递 组蛋白酵母双杂交诱饵载体的构建及其自激活作用检测 2013年 目的:构建组蛋白H2A、H2B、H3、H4的酵母双杂交诱饵载体,检测其在酵母细胞中的表达和自激活活性,为应用酵母双杂交系统筛选与组蛋白相互作用的蛋白奠定基础。方法:扩增H2A、H2B、H3、H4蛋白基因编码区cDNA序列,克隆至酵母表达载体pGBK-T7中,再将其转化至酵母细胞AH109中,提取酵母总蛋白,检测各种组蛋白的表达,并检测表达的组蛋白在酵母细胞中对报告基因有无自激活作用。结果:将H2A、H2B、H3、H4基因的cDNA克隆至酵母表达载体pGBK-T7中,其中组蛋白H4得到正确表达,且对报告基因LacZ、HIS3、Ade无激活作用。结论:可以利用酵母双杂交系统筛选与H4相互作用的蛋白质。 李玮妮 李法曾 张浩 陈立涵 程龙 徐小洁 刘婕 叶棋浓关键词:组蛋白 酵母双杂交 表观遗传 CD38靶向的PET显像剂及其应用 本发明公开了CD38靶向的PET显像剂及其应用。本发明公开的CD38靶向的PET显像剂,为偶联有NOTA且标记有放射性核素的daratumumab的F(ab')<Sub>2</Sub>片段。本发明的CD38靶向的PET显... 康磊 徐小洁 李翠翠 王荣福 霍焱文献传递 c-Myb截短突变体的构建及其对c-Myc蛋白表达的调节 2014年 目的:为了研究c-Myb蛋白各结构域的功能,构建c-Myb的6种截短突变体c-Myb-1~c-Myb-6的真核表达载体,测定不同突变体对c-Myc蛋白表达的影响。方法:以野生型c-Myb为模板,PCR扩增c-Myb-1~c-Myb-6片段,分别克隆到pcDNA3.0-FLAG载体,Western印迹检测克隆载体在293T细胞内的表达;将上述载体与野生型c-Myb转染乳腺癌细胞株MCF-7,检测其对c-Myb下游基因c-Myc表达的影响。结果:构建了c-Myb-1~c-Myb-6表达载体,与野生型c-Myb相比,c-Myb-1、c-Myb-4、c-Myb-5均能够促进MCF-7细胞中c-Myc的表达,而c-Myb-2、c-Myb-3、c-Myb-6则不能。结论:该研究为进一步探讨c-Myb在乳腺癌中的功能奠定了基础。 秦玺 程龙 饶春明 高凯 杨琦 史新昌 徐小洁 叶棋浓 王军志关键词:C-MYB 真核表达载体 C-MYC 靶向CCP22基因的干扰性RNA、含有该干扰性RNA的药物组合物及其应用 本发明涉及靶向CCP22(complement control protein 22,CCP22)的干扰性RNA(interfering RNA)、含有该干扰性RNA的药物组合物及其医药用途。 叶棋浓 冯帆 朱翠 严景华 韩聚强 徐小洁 王凌雪文献传递 人α-磷酸丙酮酸水合酶原核表达载体的构建及蛋白纯化 被引量:1 2016年 目的构建带PET-28a标签的人ENO1基因原核表达产物,观察其表达并纯化出带PET-28a标签的ENO1融合蛋白,为研究肿瘤糖酵解的相关机制奠定实验基础。方法以人乳腺文库为模板,利用PCR技术扩增出ENO1基因编码片段,将其插入到PET-28a载体中,鉴定正确的重组质粒转化大肠杆菌Rossate,小量诱导表达后,利用PET-28a-琼脂糖凝胶4B亲和珠纯化PET-28a-ENO1融合蛋白,经SDS-PAGE电泳和Western印迹检测,获得纯度较好的PET-28a-ENO1蛋白。结果利用PCR技术从乳腺文库中扩增得到大小约1300 bp的目的基因片段,插入PET-28a载体中,经双酶切鉴定及测序,结果表明PET-28a-ENO1质粒构建成功;转化Rossate菌并小量诱导,表达鉴定成功后纯化得到相对分子质量(Mr)约为57×103的目的蛋白。结论成功获得了人糖酵解相关基因ENO1的原核表达产物,为进一步研究ENO1在糖酵解过程中的作用机制奠定基础。 宋烨琼 董倩 梁迎春 李玲 洪甜 晋帅 徐小洁 叶棋浓 吕朝晖关键词:磷酸丙酮酸水合酶 原核表达 纯化 糖酵解 一种胸腹腔积液引流装置 本实用新型公开了一种胸腹腔积液引流装置,包括引流管,其特征在于,所述引流管上部的外壁上设有侧孔,胸腹腔积液通过侧孔进入引流管内;所述引流管的下部套有漏液收集袋;所述漏液收集袋的底部密闭固定在引流管的外壁上,漏液收集袋的上... 宋琪 盛炜 刘芳 张晓玲 陈美玲 汪丹 焦顺昌 冀全博 徐小洁文献传递 miR-424对雌激素受体α表达的抑制作用 被引量:1 2014年 目的:筛选能够抑制在乳腺癌发生中起关键作用的雌激素受体α(ERα)表达的microRNA(miRNA)分子,并在ERα阳性的乳腺癌细胞株中初步检测其生物学功能。方法:在ERα阳性的乳腺癌细胞ZR75-1中转染多种miRNA的表达载体,Western印迹检测ERα的表达水平,找到可以抑制ERα表达的miRNA分子;将该miRNA的表达载体转染ZR75-1后,在雌激素E2的作用下,检测该miRNA分子对细胞生长的影响。结果:经过筛选,得到能够抑制ERα表达的miRNA分子miR-424;生长曲线结果显示,miR-424能够在不依赖于E2的情况下阻抑ZR75-1的生长。结论:该研究为进一步研究miR-424在ERα信号通路中的生物学功能及研究乳腺癌的发生发展机制奠定了基础。 秦玺 徐小洁 饶春明 高凯 杨琦 史新昌 于雷 周勇 杨玉帅 程龙 叶棋浓 王军志关键词:雌激素受体Α MICRORNA 乳腺癌 人自噬相关基因3原核表达及蛋白纯化和鉴定 被引量:3 2015年 自噬相关基因3(autophagy related gene 3,ATG3)及其对应的蛋白是一种泛素样缀合酶。研究发现,细胞自噬体的形成,离不开2个必需系统的参与:1个是对于ATG12与ATG5两种自噬蛋白结合形成微管相关蛋白-轻链3(microtubule-associated protein light chain 3,LC3)前体的调节系统,此阶段需要El样酶ATG7和E2样酶ATG10共同参与活化,1个是对于自噬体LC3蛋白的脂化系统[1],它们都属于泛素样蛋白结合系统,而ATG3作为泛素样缀合酶,在LC3蛋白的脂化系统中起到重要作用。 纪贝贝 徐小洁 张立 黄蓉 范忠义 王涛 叶棋浓 杜楠关键词:原核表达 纯化 自噬 人抑癌基因NKX2-3真核表达载体的构建及其对肿瘤细胞生长的作用 被引量:1 2015年 目的:构建人抑癌基因NKX2-3的真核表达载体,并验证其对肿瘤细胞生长的影响。方法:采用PCR技术从人乳腺文库中扩增人NKX2-3基因,将其克隆到Flag-pc DNA3.0载体中,酶切和测序验证后转染人胚肾293T细胞,蛋白免疫印迹鉴定其表达;转染人结肠癌细胞HCT-116和肝癌Hep G2细胞,通过CCK8法测定细胞生长曲线。结果:从人乳腺文库中扩增得到约1080 bp的DNA片段,并克隆至Flag-pc DNA3.0载体上,测序结果与目的序列完全一致;转染人胚肾293T细胞后,目的基因获得表达;细胞生长曲线结果显示,转染Flag-NKX2-3的人结肠癌、肝癌细胞较空载体细胞生长慢。结论:构建了Flag-NKX2-3真核表达载体,为进一步研究NKX2-3在肿瘤中的功能奠定了基础。 冯滢滢 郭靖 刘家宏 徐小洁 张云静 陈云萍 叶棋浓 赵克关键词:真核表达 肿瘤细胞