宫强
作品数： 152被引量：396H指数：10
  • 所属机构:河南科技大学食品与生物工程学院
  • 所在地区:河南省 洛阳市
  • 研究方向:农业科学
  • 发文基金:河南省科技攻关计划

相关作者

刘思国
作品数：377被引量：1,082H指数：17
供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
研究主题：牛分枝杆菌 结核分枝杆菌 胸膜肺炎放线杆菌 鸡传染性支气管炎病毒 牛结核病
王春来
作品数：190被引量：491H指数：11
供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室
研究主题：胸膜肺炎放线杆菌 副猪嗜血杆菌 牛分枝杆菌 猪胸膜肺炎放线杆菌 猪传染性胸膜肺炎
牛明福
作品数：134被引量：257H指数：8
供职机构：河南科技大学食品与生物工程学院
研究主题：禽多杀性巴氏杆菌 免疫效果 DNA疫苗 巴氏杆菌 抗菌肽
秦翠丽
作品数：139被引量：330H指数：9
供职机构：河南科技大学食品与生物工程学院
研究主题：禽多杀性巴氏杆菌 免疫效果 DNA疫苗 胚蛋 小鼠
郭设平
作品数：42被引量：158H指数：6
供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
研究主题：牛分枝杆菌 牛结核病 猪传染性胸膜肺炎 APX 融合蛋白
作品列表
牛抗菌肽Bac7-Bac5融合基因在大肠杆菌中的过表达,纯化及抑菌活性被引量：14
2007年
牛抗菌肽Bac7和Bac5是一种线性阳离子小分子多肽,在机体天然免疫和获得性免疫中都发挥着重要作用。根据Gen bank中公布的牛抗菌肽bac7和bac5成熟肽基因序列,人工合成了融合基因Bac7-Bac5片段,克隆于原核表达载体pET32(a+)中构建了重组表达载体pET-B7-B5,将其转化于E.coli BL21(DE3)中实现了重组蛋白B7-B5(rB7-B5)的过表达,表达的rB7-B5以包涵体形式存在,rB7-B5表达量约占细菌总蛋白的36.6%,分子量大小为33kDa,与预测大小相符。以8mol/L尿素变性包含体后用Ni亲和层析柱纯化目的蛋白,经多步透析法复性的rB7-B5对猪胸膜肺炎放线杆菌和耐药性大肠杆菌具有很好的抑菌活性,为新型抗菌制剂的研制和开发奠定了基础。
赵昆刘思国王春来宫强迟磊刘建东王勇云孟克常月红刘慧芳周媛媛孙延鸣
关键词：融合基因抑菌活性
银条α-低聚半乳糖体外肠道益生功能研究被引量：7
2013年
以银条为原料,通过乙醇浸提和D101大孔吸附树脂初步纯化,制备得银条α-GOS含量为76.39%,其中水苏糖占86.03%。采用体外厌氧粪样混合培养、荧光原位杂交技术和高效液相色谱法分析银条α-GOS对肠道菌群以及短链脂肪酸(SCFA)生成的影响。结果表明:银条α-GOS能促进双歧杆菌和乳酸菌的增殖,而对拟杆菌和梭状菌的增殖却有一定的抑制作用;银条α-GOS只是改变了肠道内菌群的组成,而对总体菌群的数量基本没有影响;银条α-GOS能显著刺激肠道微生物生成甲酸、乳酸、乙酸、丙酸和丁酸,提高肠道总SCFA的量,尤其是乳酸和乙酸的生成量。综上所述,银条α-GOS具有较好的肠道益生功能。
马丽苹赵君锋汪伦记宫强曾晓雄
关键词：银条荧光原位杂交技术短链脂肪酸
禽多杀性巴氏杆菌病菊粉果胶灭活疫苗的制备方法
禽多杀性巴氏杆菌病菊粉果胶灭活疫苗的制备方法，属于疫苗领域；首先制备禽多杀性巴氏杆菌菌悬液，加入甲醛，加入量为禽多杀性巴氏杆菌菌悬液体积的0.2-0.25%，6-37℃条件下静置20-22小时完成禽多杀性巴氏杆菌菌悬液的...
宫强曲宁田野
文献传递
牛分枝杆菌ag85b基因的瞬时表达
2008年
[目的]为牛结核病DNA疫苗的研制提供参考。[方法]利用PCR技术扩增出牛分枝杆菌ag85b基因片段,克隆到真核载体pcD-NA3.1(+)上,构建重组质粒pcAg85B,将重组质粒转染SP2/0细胞,间接免疫荧光试验检测该基因的表达情况。[结果]结果表明:在转染了重组质粒pcAg85B的SP2/0细胞中出现绿色荧光,说明ag85b基因在SP2/0细胞中成功进行了瞬时表达。[结论]为研究牛分枝杆菌ag85b DNA疫苗奠定了基础。
宫强刘思国
关键词：牛分枝杆菌克隆
高通量测序研究三种非消化性寡糖及其组合对小鼠肠道菌群的影响被引量：2
2019年
目的研究低聚果糖(Fructooligofructose,FOS)、低聚木糖(xylooligosaccharide,XOS)和低聚半乳糖(galactooligosaccharide,GOS)三种非消化寡糖及其组合对小鼠肠道菌群的影响,方法将140只雌性小鼠随机分为:对照组(空白)、低聚果糖、低聚木糖、低聚半乳糖、低聚木糖与低聚半乳糖(1:1.5)复合、低聚木糖与低聚果糖(2:1)复合、低聚半乳糖与低聚果糖(2:1)复合共7组。各组每天分别以400 mg/kg剂量灌胃,连续15 d。末次灌胃24h后,收集小鼠新鲜粪便,用高通量测序技术分析其中微生物群落组成和结构的变化。结果与对照组相比,试验组小鼠肠道有益菌与致病菌比例差异显著,复合寡糖组小鼠肠道菌群物种多样性和丰富度最高,单一寡糖灌胃组次之;在属水平上,与对照组比,试验组均显著(P<0.05)提高有益菌的物种丰度,其中低聚木糖与低聚半乳糖(1:1.5)复合组、低聚木糖与低聚果糖(2:1)复合组显著(P<0.05)提高乳杆菌属、双歧杆菌属的物种丰度。结论非消化寡糖能够提高小鼠肠道微生物菌群多样性及丰富度,能在一定程度上改善肠道微环境且复合组效果优于单一组。
赵思琪秦翠丽王辉宫强牛明福席振军
关键词：肠道菌群高通量测序
铜绿假单胞菌二价组合DNA疫苗pOPRL+pOPRF最佳免疫剂量研究
2020年
目的探讨铜绿假单胞菌二价组合DNA疫苗pOPRL+pOPRF在小鼠体内的最佳免疫剂量。方法分别以25μg,50μg,100μg和200μg的pOPRL+pOPRF免疫BALB/c小鼠。对各剂量免疫后诱导的血清抗体水平、脾淋巴细胞增殖水平以及IFN-γ和Il-2分泌水平进行检测,强毒攻击后测定各组小鼠的存活时间及保护率。结果 100μg和200μg组小鼠的血清特异性抗体水平、SI值及IFN-γ和Il-2的分泌水平明显高于25μg和50μg组(F=8.414,P<0.05)。且三免后100μg组小鼠脾淋巴细胞分泌的IFN-γ和Il-2的量高于200μg组(F=6.375,P<0.05)。攻毒后25μg、50μg、100μg和200μg组的保护率分别为35%、45%、85%和70%。结论 pOPRL+pOPRF二价组合DNA的免疫效果与免疫剂量有一定的相关性,在小鼠中的最佳免疫剂量为100μg。
宫强阮梦蝶郭洁真杜珍奇
关键词：铜绿假单胞菌DNA疫苗免疫效果免疫剂量
制备禽霍乱外膜蛋白H和A基因及融合DNA疫苗的方法
一种制备禽霍乱外膜蛋白H和A基因及融合DNA疫苗的方法包括利用聚合酶链式反应法获得禽霍乱外膜蛋白H和A基因、禽霍乱外膜蛋白H基因的酶切回收纯化、真核表达载体pcDNA3.1(+)的酶切回收纯化、纯化后的连接和转化、pcM...
宫强曲宁牛明福刘开永孙晓菲孙军杰王帅涛程茗李洋
文献传递
一种禽巴氏杆菌基因组疫苗的制备方法
一种禽巴氏杆菌基因组疫苗的制备方法，利用限制性内切酶Sau3AⅠ对目的基因进行酶切，利用限制性内切酶BamHI对真核表达载体pcDNA3.1(+)进行酶切，利用小牛小肠碱性磷酸酶对酶切后的真核表达载体pcDNA3.1(+...
宫强程茗牛明福孙晓菲张爱国孙军杰曲宁
文献传递
从禽多杀性巴氏杆菌提取脂多糖并制作脂多糖疫苗的方法
一种从禽多杀性巴氏杆菌提取脂多糖并制作脂多糖疫苗的方法/经过①制备禽多杀性巴氏杆菌培养液、②从禽多杀性巴氏杆菌培养液中收集禽多杀性巴氏杆菌菌体、③超声波对禽多杀性巴氏杆菌菌体进行破碎、④从超声波破碎的禽多杀性巴氏杆菌菌体...
宫强王帅涛张敏牛明福孙军杰秦翠丽李爱江
文献传递
铜绿假单胞菌flgE基因菊粉季铵盐纳米DNA的制备与免疫效果研究被引量：2
2021年
为提高铜绿假单胞菌flgE基因DNA疫苗的免疫效果,本实验对菊粉进行阳离子化后获得带正电荷的菊粉季铵盐,以其包裹裸DNA疫苗后制备成菊粉季铵盐纳米DNA疫苗,结果显示,flgE基因壳菊粉季铵盐纳米DNA疫苗在扫描电镜下呈现较为规则的圆球型,粒径100 nm~200 nm。以裸DNA疫苗和菊粉季铵盐纳米DNA疫苗免疫BALB/c小鼠,同时设置灭活疫苗、pcDNA3.1(+)空载体和PBS对照组。免疫1周时经断尾采血并分离血清,采用间接ELISA检测免疫后血清特异性抗体水平,结果显示小鼠免疫后菊粉季铵盐纳米DNA疫苗诱导的血清抗体水平虽低于灭活疫苗,但明显高于裸DNA疫苗(p<0.05)。同时每次免疫2周后,每组各随机取5只小鼠分离制备脾淋巴细胞悬液,采用MTT法检测免疫小鼠脾淋巴细胞增殖情况,双抗夹心ELISA测定脾淋巴细胞分泌的IFN-γ和IL-2的水平,结果显示,纳米DNA疫苗组小鼠的刺激指数(SI)及脾淋巴细胞分泌的IFN-γ和IL-2含量与灭活疫苗组相当,显著高于裸DNA疫苗组(p<0.05)。三免2周后以1.8×10^(10)cfu/只铜绿假单胞菌CAU0792菌液攻击各组小鼠,且计算存活数及保护率,结果显示灭活疫苗组、菊粉季铵盐纳米DNA疫苗组和裸DNA疫苗组的保护率分别为90%、75%和55%,表明菊粉季铵盐可增强裸DNA疫苗诱导的免疫应答水平和保护效果。本实验首次将菊粉进行季铵盐化后使其带有正电荷,有利于结合DNA分子形成纳米颗粒,从而增强了DNA疫苗的免疫原性,为铜绿假单胞菌DNA疫苗的研制及新型DNA疫苗佐剂的开发奠定了基础。
宫强李雅静翟文汉牛明福秦翠丽
关键词：铜绿假单胞菌免疫效果
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