王远志
作品数: 173被引量:521H指数:12
  • 所属机构:石河子大学医学院
  • 所在地区:新疆 石河子市
  • 研究方向:农业科学
  • 发文基金:国家自然科学基金

相关作者

陈创夫
作品数:760被引量:1,547H指数:15
供职机构:石河子大学动物科技学院
研究主题:布鲁氏菌 原核表达 绵羊 牛病毒性腹泻病毒 克隆
张辉
作品数:418被引量:1,081H指数:15
供职机构:石河子大学
研究主题:布鲁氏菌 原核表达 结核分枝杆菌 羊种布鲁氏菌 基因
袁俐
作品数:98被引量:201H指数:8
供职机构:石河子大学医学院
研究主题:结核分枝杆菌 结核病 耐药性 临床分离株 毒素-抗毒素系统
李永祥
作品数:39被引量:109H指数:8
供职机构:石河子大学医学院
研究主题:结核分枝杆菌 临床分离株 耐药性 AG85B 耐药
盛金良
作品数:157被引量:274H指数:10
供职机构:石河子大学
研究主题:绵羊 牛病毒性腹泻病毒 原核表达 BVDV 蛋白
布鲁氏菌Ⅳ型分泌系统效应蛋白BspB的原核表达及布鲁氏菌免疫逃逸分析被引量:5
2015年
目的克隆并表达布鲁氏菌Ⅳ型分泌系统效应蛋白BspB并推测其免疫逃逸机制。方法以羊种布鲁氏菌16M基因组为模板,利用PCR扩增布鲁氏菌分泌蛋白BspB(BAB1-0712)基因,连接pMD19-T载体后测序,将测序正确的基因片段经双酶切后克隆至pET-30a载体中,转化大肠埃希菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达,通过SDS-PAGE和Western blot分析鉴定表达产物。结果成功克隆了BspB基因,片段大小为564bp;SDS-PAGE检测,BspB蛋白分子质量单位约为27.5ku;Western blot分析显示,BspB蛋白均可被布鲁氏菌阳性血清识别。该蛋白测序后与先天性免疫分子IL-1R、MyD88、TLR-2、TLR-4、SIGIRR比对,具有一定的同源性。结论重组蛋白BspB具有免疫反应原性,可作为候选诊断抗原;由于其序列与IL-1R、MyD88、TLR-2、TLR-4及SIGIRR有一定同源性,BspB可能在布鲁氏菌感染宿主过程中发挥免疫逃逸的作用。
李默易德武王远志陈创夫于潞张俊波郭飞
关键词:布鲁氏菌原核表达免疫逃逸
新疆绵羊布鲁氏菌外膜蛋白OMP2b的克隆与表达被引量:3
2005年
表达新疆绵羊布鲁氏菌外膜抗原蛋白OMP3b的表达蛋白OMP2b,探索其作为诊断抗原和亚单位疫苗的可能性。采用PCR方法,从新疆绵羊布鲁氏菌基因组DNA中扩增出omp2b基因片段,将该片段克隆于原核表达载体PET-28a(+),构建成重组质粒,经IPTG诱导,SDS-PAGE检测。结果表明,获得长约1083bp的PCR片段,序列分析结果与已知绵羊布鲁氏菌外膜蛋白OMP2b同源性达89.72%;SDS-PAGE检测表达产物,在相对分子质量39ku处有表达带。获得了新疆绵羊布鲁氏菌外膜蛋白OMP36的表达蛋白omp2b基因片段,并在大肠杆菌中实现了表达。
滕文军陈创夫任雪艳王远志杨丽鹃包彗芳刘文进
关键词:克隆
ApoBR在布鲁氏菌侵染过程中对细胞凋亡影响的研究
研究目的:载脂蛋白B(Apo BR)受体是鼠源巨噬细胞膜上载脂蛋白B的受体,定位于巨噬细胞膜上的外围膜蛋白。已有研究证明Apo BR为外膜蛋白OMP-25与巨噬细胞膜作用的潜在受体,它能够调节TNF-α的分泌,同时导致一...
车召堂李亚王浩陈创夫郭飞王远志张辉
文献传递
绵羊白细胞内的慢病毒cDNA gag基因的PCR检测
2005年
对5只新疆卡拉库尔羊进行绵羊慢病毒免疫琼脂凝胶扩散检测试验,3只阳性,2只阴性,然后采用PCR技术,以绵羊外周血白细胞基因组为模板,扩增绵羊慢病毒gag基因,将该基因克隆到pBS-T载体上,将重组子转入感受态细胞DH5α,用IPTG/X-gel筛选阳性菌落,通过菌落PCR,酶切初步鉴定后测序,结果表明PCR的检测结果和AGIDT的结果一致,所测序列与Genbank中的Visna病毒的gag基因序列有一定的同源性。
张辉阿合买提.买买提王远志白丽简子健
关键词:GAG基因白细胞慢病毒梅迪-维斯纳病
乙胺丁醇耐药结核分枝杆菌embB基因分析被引量:4
2007年
了解结核分枝杆菌耐乙胺丁醇(EMB)分离株embB基因突变情况,研究其应用价值。通过聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)和PCR-限制性片段长度多态性(RFLP)技术分析98株新疆部分地区结核分枝杆菌临床分离株embB基因。以H37Rv标准株为对照,52株药物敏感株的embB基因SSCP均泳动正常,RFLP和测序分析与对照株相同。46株耐EMB分离株中,28株(60.9%)embB基因SSCP泳动异常;5株RFLP分析异常;测序分析5株均为306位密码子突变,为ATG→ATA。部分结核分枝杆菌耐EMB是由于其embB基因突变所致,PCR-SSCP和PCR-RFLP技术可能成为测定部分结核分枝杆菌EMB耐药简便、快速的方法。
张向晖李奇凤杨坚王远志吴万贵王仙邢建新袁俐
关键词:结核分枝杆菌乙胺丁醇PCR-SSCPPCR-RFLP
山羊痘病毒疫苗株RR基因的克隆与序列分析
2009年
用绵羊睾丸细胞培养山羊痘病毒疫苗株G14-STV44-55,提取其基因组为模板,设计还原酶(RR)基因的特异引物进行PCR扩增,并克隆至pGEM-TEasy载体,蓝白斑筛选,酶切和测序签定,并对目的基因进行了序列分析。结果获得了RR基因的阳性克隆PGM-RR,DNA片段长度2 669 bp,内存在BglII等4个单一限制性内切酶酶切位点,编码区5′端含有早期转录终止信号TTTTTN(T)T。RR基因核苷酸和推测的氨基酸同源性与GENEBANK中发表的9个参考毒株的同源性分别在97%和99%以上,说明羊痘病毒RR基因具有高度的保守性。
李有文魏风陈创夫王远志张辉任艳郭志儒
关键词:山羊痘病毒
烟草坏死病毒植物病毒载体的构建
2006年
烟草坏死病毒A是单链RNA病毒,它的全基因组序列已被测出,含有6个开放表达阅读框。利用套叠PCR的方法将克隆于pMD18-T载体上烟草坏死病毒A基因的ORFⅣ与ORFⅤ(外壳蛋白)之间的非编码区形成突变SphI位点,最后将突变后的TNV-A全基因插入植物表达载体pE1802的SalI/SmaI之间,构建成植物病毒载体pE1802-TNV。
韩亚杰祝建波王远志董玲任雪艳陈创夫
关键词:套叠PCR
2020年新疆生产建设兵团第三师中小学结核分枝杆菌感染筛查情况分析被引量:8
2022年
目的:分析新疆生产建设兵团第三师中小学所有在校师生学校结核病感染及患病情况。方法:按照《关于开展在校学生结核病筛查工作的通知》的要求,第三师疾病预防控制中心于2020年3—5月对辖区内34066名在校中小学师生开展结核感染筛查[包括肺结核可疑症状、结核菌素皮肤试验(TST)、痰涂片、胸部X线摄片(简称“胸片”)检查]。结果:TST阳性反应者2068名,阳性率为6.07%;强阳性反应者302名,强阳性率为0.89%。且随着学生年级的增长,TST阳性率和强阳性率均增加[分别由小学组的5.23%(1174/22463)和0.38%(85/22463)升高到高中组的10.34%(206/1993)和3.36%(67/1993)],差异均有统计学意义(χ^(2)值分别为91.92、245.01,P值均<0.001);教职工的阳性率和强阳性率[分别为13.70%(158/1153)和3.04%(35/1153)]明显高于学生[分别为5.80%(1910/32913)和0.81%(267/32913)],差异均有统计学意义(χ^(2)值分别为121.93、62.73,P值均<0.001);但维吾尔族师生的强阳性率[0.74%(162/21878)]明显低于汉族师生[1.15%(140/12188)],差异有统计学意义(χ^(2)=14.84,P=0.001)。对强阳性的302名师生行痰涂片及胸片检查,5例胸片异常的学生确诊为活动性肺结核患者,18例密切接触的TST强阳性师生进行了预防性服药。结论:PPD强阳性率随学生年级的增长而升高,应定期对高年级学生开展TST筛查,对及时掌握结核病新近感染及防止学校聚集性结核病疫情的发生有重要作用。
王坤鹏何晶晶赵永年叶志萍姜媛媛赵立志杨红春张春菊周孝勇王世一王远志汉锋欧喜超
关键词:结核菌素试验
ApoBR在布鲁氏菌侵染过程中对细胞凋亡影响的研究被引量:4
2014年
目的探讨载脂蛋白B受体基因ApoBR在布鲁氏菌侵染小鼠巨噬细胞RAW264.7所引起的细胞凋亡的影响。方法构建、筛选干扰ApoBR基因的慢病毒干扰载体,并干扰小鼠巨噬细胞ApoBR的表达;以牛种布鲁氏菌2308株侵染巨噬细胞,分别在侵染后4、8、12和24h收集细胞和上清液,采用实时荧光定量PCR和ELISA法检测ApoBR基因、肿瘤坏死因子TNF-α以及凋亡相关基因Bax、Bcl-2表达水平;做胞内菌的CFU计数,利用流式细胞仪检测细胞的凋亡率。结果慢病毒转染后pLentiLox-253和pLentiLox-1325组ApoBR mRNA细胞抑制率分别为53.3%和57.4%;TNF-α表达水平较对照组升高(P<0.05);CFU计数显示,细菌侵染后8h,巨噬细胞凋亡抑制率达到最高,253实验组抑制率为71.7%,1325实验组抑制率为67.0%;在不同时间点促凋亡基因Bax表达水平上调,而抑制凋亡基因Bcl-2表达水平下调。结论载脂蛋白B受体蛋白在布鲁氏菌早期感染引起的细胞凋亡过程中起到减缓细胞凋亡的作用,为进一步研究布鲁氏菌在巨噬细胞内的分子机制奠定了基础,也为寻找治疗布鲁氏菌的有效药物和疫苗提供了理论依据。
车召堂李亚王浩陈创夫郭飞王远志张辉
关键词:慢病毒载体细胞凋亡
伯氏疏螺旋体外膜蛋白OspA胶体金免疫层析法快速检测技术的建立被引量:3
2014年
目的建立一种快速诊断莱姆病螺旋体的胶体金免疫层析试纸条检测方法。方法以莱姆病伯氏疏螺旋体标准株B31DNA为模板,PCR扩增OspA基因,构建重组质粒pET-30a-OspA,以IPTG诱导原核表达并用亲和层析方法对重组蛋白OspA进行纯化;用柠檬酸钠还原法以OspA作为检测线,优化试纸条制备条件,制备莱姆病诊断试纸条,检测其特异性和敏感性;用该方法对20份绵羊血清进行检测,并用WB验证结果的准确性。结果构建了外膜基因OspA的原核表达体系,获得高纯度的OspA蛋白;用40nm金颗粒制备的莱姆病胶体金试纸条,最适胶体金标记pH值为6.2,SPA蛋白的最佳标记量是6μg/ml,该蛋白不与布鲁氏菌、大肠杆菌等阳性血清反应,能重复多次与莱姆病阳性血清特异性反应。用该方法检测20份动物血清样品2份阳性(10%),与WB结果一致。结论以纯化的OspA蛋白为包被抗原制备的免疫层析试纸条特异性强,敏感性高,与WB验证结果符合率高,且具有准确、快速、方便的优点,可用于临床样品的检测。
钱红石峰陈创夫王远志程婷婷张辉陈荣贵
关键词:莱姆病螺旋体免疫层析