吴绍精
所属机构: 深圳出入境检验检疫局 所在地区: 广东省 深圳市 研究方向: 农业科学 发文基金: 深圳出入境检验检疫局科研项目
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基于锁式探针的两种豆类检疫性细菌高通量检测方法研究 豌豆细菌性疫病菌(Pseudomonas syringae pv.pisi,PSPI)和菜豆晕疫病菌(Pseudomonas syringae pv.phaseolicola,PSPHA)均属于我国进境植物检疫性有害生物... 李志锋 吴绍精 王忠文 章桂明 程颖慧 冯建军关键词:锁式探针 滚环扩增 液相芯片 文献传递 烟草环斑病毒RT-RealtimePCR检测方法 被引量:15 2007年 烟草环斑病毒(Tobacco ringspotvirus,TRSV)是我国公布的二类检疫危险性有害生物,对农业生产危害较大。受该病毒侵染的一些寄主植物出现隐症,并伴随病毒浓度降低,给检测工作造成困难。根据TRSV外壳蛋白基因序列设计合成了一对引物及一条MGB探针,优化了反应条件,建立了TRSV实时荧光RT-PCR检测方法。该方法与常规的DAS-ELISA方法和RT-PCR方法相比,灵敏度分别提高了200倍和4倍,并且对不同寄主上的TRSV均有较好的检测效果。 杨伟东 郑耘 陈枝楠 章桂明 吴绍精关键词:烟草环斑病毒 RT-PCR 多重实时荧光PCR检测牛、山羊和绵羊源性成分 被引量:45 2009年 根据牛、山羊和绵羊线粒体细胞色素b基因序列,设计特异性引物和以不同荧光素标记的Taqman探针。通过对PCR反应体系和反应条件的优化筛选,建立能同时鉴别牛、山羊和绵羊源性成分的多重实时荧光PCR方法。采用本文方法与国标GB/T20190-2006方法分别对17种不同源性动物DNA和200份不同来源样品DNA进行牛羊源性成分检测,数据显示两者检测结果符合率达100%,特异性相当。与国标方法相比,本试验方法不需电泳、酶切和测序,即可在一个PCR反应中同时鉴别检测牛、山羊和绵羊3种源性成分,检测效率提高近3倍;灵敏度更高,比国标方法灵敏10倍;适用性更广,除了饲料,还适用于肉品、奶品、生皮和动物油脂等动物产品的牛羊源性成分检测。 曾少灵 秦智锋 阮周曦 花群义 卢体康 吕建强 陈书琨 曹琛福 张彩虹 孙洁 陈兵 吴绍精关键词:细胞色素B基因 动物源性食品中药物多残留分析的研究进展 被引量:13 2016年 近年来食品安全检测领域的多残留分析方法在分析通量、成本和适用性方面显示了突出优势。动物源性样品基质复杂、兽药和迁移的农药残留的浓度很低,以多残留方式分析需要发展高效的样品前处理方法和高选择性的检测技术。由于色谱-质谱联用技术在多残留分析中有超过90%的应用,本文综述了近5 a来色谱-质谱检测的动物源性食品的多残留分析。 张毅 岳振峰 郭文 吴绍精 沈金灿 肖陈贵 林黎 华红慧 侯乐锡 易冰清关键词:动物源性食品 农药 兽药 多残留 色谱-质谱联用技术 二重实时荧光PCR方法检测山羊和绵羊源性成分 被引量:2 2008年 本研究根据山羊、绵羊线粒体中的cytb基因序列,利用ABI primer express 3.0和DNAStar软件设计了特异性引物和探针。通过对引物和探针浓度、Mg2+浓度、dNTP浓度和Taq酶用量以及反应条件等因素的优化筛选,建立了能同时鉴别山羊和绵羊源性成分的二重实时荧光PCR方法。所建方法灵敏性高、特异性好,对17种不同源性的动物DNA和50份不同来源的样品DNA进行实时荧光PCR检测,结果表明引物与探针能特异地鉴别检测出山羊和绵羊源性成分。实验结果表明该检测方法适用于饲料、肉制品、奶制品和生皮等动物源性产品的山羊和绵羊源性成分鉴定。 曾少灵 秦智锋 阮周曦 花群义 陈书琨 吕建强 张彩虹 曹琛福 孙洁 陈兵 吴绍精关键词:CYTB基因 实时荧光PCR MALDI-TOF质谱技术检测豆类作物病原细菌 被引量:2 2015年 本文通过基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术分析豆类作物上7种主要病原细菌,建立了MALDI-TOF MS分析方法。结果表明:构建的MALDI-TOF质谱检测数据库可以快速、准确地区分和鉴定该作物上的主要病原菌。该分析方法具有属特异性和致病变种特异性,可用于豆类作物主要病原细菌的检测。 冯建军 龙海 李志锋 吴绍精 李一农 章桂明关键词:MALDI-TOF MS 植物病原细菌 豆类 从印度进口的洋葱中检出洋葱黄矮病毒 被引量:1 2007年 本文报道了从印度进口的洋葱中检出洋葱黄矮病毒。从印度进口的洋葱种球经过隔离试种,有1株洋葱幼苗发生整株矮化,叶片出现无规则的黄色条纹、皱缩等症状,经DAS—ELISA、RT-PCR检测和序列分析验证,确认该批从印度进口的洋葱鳞球茎中携带有洋葱黄矮病毒(Onion yellow dwarfvirus)。 郑耘 陈枝楠 杨伟东 吴绍精关键词:RT-PCR DAS-ELISA