-
闫广谋
-
-
- 所属机构:吉林大学
- 所在地区:吉林省 长春市
- 研究方向:农业科学
- 发文基金:吉林省科技厅科技发展计划项目
相关作者
- 王兴龙
- 作品数:207被引量:790H指数:16
- 供职机构:吉林大学
- 研究主题:新城疫病毒 布鲁氏菌 口蹄疫病毒 原核表达 克隆
- 张西臣
- 作品数:505被引量:963H指数:13
- 供职机构:吉林大学
- 研究主题:微小隐孢子虫 柔嫩艾美耳球虫 旋毛虫 克隆 原核表达
- 宫鹏涛
- 作品数:298被引量:313H指数:8
- 供职机构:吉林大学
- 研究主题:旋毛虫 原核表达 微小隐孢子虫 克隆 柔嫩艾美耳球虫
- 李建华
- 作品数:284被引量:76H指数:5
- 供职机构:吉林大学
- 研究主题:医用 旋毛虫 孢子虫 汽车 线控
- 任林柱
- 作品数:103被引量:189H指数:8
- 供职机构:吉林大学
- 研究主题:口蹄疫病毒 新城疫病毒 猪圆环病毒 克隆 病毒感染
- 大肠杆菌噬菌体裂解酶突变体与融合蛋白Colicin-Lysep3的构建及其菌外裂解活性的研究
- 在动物生产及动物疾病防治中,经常发生不规范、超量使用抗生素的情况,诱使很多病原菌产生耐药性。“超级细菌”(多重耐药性的病原菌)的产生使细菌耐药问题变得更加复杂和严峻。细菌耐药性问题有愈演愈烈的趋势,已经严重威胁到公共卫生...
- 闫广谋
- 关键词:大肠杆菌革兰氏阴性菌噬菌体细菌耐药性
- 文献传递
- 一种分子标记、免疫保护性能增强的结核杆菌弱毒疫苗及构建方法
- 本发明提供了一种分子标记、高免疫保护性的结核杆菌弱毒疫苗及制备方法,使用基因定向改造的技术,定向的改造已经沉默的BCG免疫保护性基因,以提高BCG的免疫保护性。提供的结核杆菌弱毒疫苗具有分子标记、免疫保护性能增强的特点,...
- 闫广谋张楠张西臣李建华宫鹏涛李赫杨举
- 文献传递
- 布鲁氏菌分子标记和毒力缺失弱毒疫苗及制备方法
- 本发明涉及布鲁氏菌疫苗,特别是涉及了布鲁氏菌疫苗株的分子标记与毒力基因缺失。本研究通过构建自杀质粒,采用定向同源重组的方法(基因打靶),将萤光素酶改造基因(Luc NF+)代替了布鲁氏菌弱毒疫苗S19株Bp26基因部分片...
- 闫广谋王兴龙
- 文献传递
- 牛种布鲁菌VirB12蛋白的原核表达及纯化被引量:1
- 2013年
- 目的原核表达并纯化牛种布鲁菌(Brucella)VirB12蛋白。方法利用PCR法从牛种布鲁菌基因组中扩增VirB12基因,插入pET-30a(+)载体,构建重组表达质粒pETV12,转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。表达的重组蛋白经组氨酸结合树脂柱纯化后,进行SDS-PAGE及Western blot分析。结果重组表达质粒pETV12经双酶切及测序证明构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约22 000,纯化的重组蛋白纯度达94%,可被布鲁菌免疫兔血清特异性识别。结论原核表达并纯化了牛种布鲁菌VirB12蛋白,为进一步研究VirB12蛋白的结构、功能及相关疫苗的研制奠定了基础。
- 唐峰闫广谋唐雨顺刘永华李冰
- 关键词:布鲁菌原核细胞基因表达
- 新城疫病毒TL1株M基因的克隆和序列分析被引量:1
- 2007年
- 采用RT-PCR方法扩增了新城疫病毒(NDV)TL1株M基因,将扩增产物提纯后克隆入pGEM-Teasy载体,通过酶切、PCR和测序验证克隆正确。测序拼接得出M基因的序列长度为1232bp,该基因的ORF总长为1095bp,编码364个氨基酸。与GenBank下载的15株参考毒株M基因比较,核苷酸同源性为85.2%~98.1%,编码的氨基酸同源性为85.8%~98.9%。NDVTL1产生M蛋白分子中有7对碱性氨基酸,5个保守的Cys残基,与鹅源新城疫SF02株、ZJ1株具有类似的特征。这些结果为揭示NDVTL1株的分子生物学背景,阐明NDV种间传播机制奠定了基础。
- 王学理王兴龙李晓艳刘锴任林柱崔丽瑾闫广谋段小宇
- 关键词:新城疫病毒M基因
- 一种牛结核杆菌抗体免疫胶体金检测试纸条及其制备方法
- 本发明公开一种结核杆菌抗体免疫检测胶体金试纸条及其制备方法。用金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)标记胶体金制成胶体金抗体检测试纸条的金胶垫。CFP10和MPT64蛋白是致病性结核杆菌高特异性、免疫原性蛋白。从结核杆菌基因组中...
- 闫广谋张楠宫鹏涛李建华张西臣杨举
- 文献传递
- 布鲁氏菌分子标记、毒力缺失疫苗株△S19-2的构建被引量:17
- 2007年
- 通过构建自杀质粒,用定向同源重组的方法,把改造的萤火虫萤光素酶报告基因Luc NF+替换布鲁氏菌S19疫苗株Bp26基因部分片段,构建出布鲁氏菌Bp26基因缺失突变株△S19-1。在此基础上,用同样的方法,敲除△S19-1上的毒力基因Bmp18,构建成△S19-2。用PCR与萤光素酶报告基因在布鲁氏菌中表达的方法进行验证,结果表明Bp26基因与Bmp18基因改造成功,△S19-2具有Bp26基因分子标记、Bmp18毒力基因缺失的特点。
- 闫广谋王兴龙任林柱刘锴高建勇王学理张辉李晓燕
- 关键词:布鲁氏菌分子标记同源重组
- 柔嫩艾美耳球虫Rhomboid相关基因重组卡介苗的研制及应用
- 李建华张西臣王秋悦张国才宫鹏涛杨举侯洪烈闫广谋段玲欣邓柏林陈超
- 该研究针对鸡球虫免疫预防中缺乏理想基因工程苗的现存问题,利用基因工程技术首先将柔嫩艾美耳球虫侵入相关基因Rhomboid克隆入重组卡介苗载体,通过PCR、酶切鉴定阳性重组质粒。然后将重组质粒经电穿孔方法转入卡介苗中,45...
- 关键词:
- 关键词:重组卡介苗柔嫩艾美尔球虫病基因工程
- 蜡样芽孢杆菌ATCC14579毒力基因plcR缺失株的构建及其一般特性被引量:5
- 2010年
- 蜡样芽孢杆菌是土壤中的优势菌,具有作为益生菌的潜在能力,同时它也是条件致病菌,能引起食物中毒等。蜡样芽孢杆菌的多种毒力因子受到多效性调控子(pleiotropic regulator,plcR)的调控,在其条件致病性作用中起着重要作用。真养产碱杆菌JMP34(Alcaligenes eutrophus)质粒上的2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-dichlorophenoxyacetic acid,2,4-D)单加氧酶(tfdA)基因可以降解2,4-D。本研究利用同源重组技术使tfdA基因置换掉蜡样芽孢杆菌的plcR基因,构建了蜡样芽孢杆菌ATCC14579突变株B.cereus△plcRΩtf-dA,并对其毒性、一般生理生化特性进行分析。研究结果表明,突变株B.cereus△plcRΩtfdA的毒性显著减弱;生理生化实验结果显示突变株与野生株并没有明显区别,且突变株并没有表现出tfdA酶活性。所有的结果表明plcR控制着蜡样芽孢杆菌ATCC14579的致病性,同时剔除plcR并不破坏其酶系统。本研究为今后构建蜡样芽孢杆菌工程菌提供了新的思路和依据。
- 吴威郑经成闫广谋王思洮盛相鹏胡丹张阳阳韩文瑜
- 关键词:蜡样芽孢杆菌同源重组
- 新城疫病毒TL1株P、NP、L蛋白基因表达载体的构建及鉴定被引量:2
- 2007年
- 将新城疫病毒TL1株的P、NP、L基因通过RT-PCR方法从尿囊液中扩增后分别克隆进pGEM-Teasy载体,再分别亚克隆到真核表达载体pCI-neo上,命名为pCI-P、pCI-NP、pCI-L,通过酶切、PCR和测序验证克隆正确.纯化后的重组质粒单独转染BHK-21细胞,经间接免疫荧光试验检测到了P、NP、L蛋白的表达.新城疫病毒TL1株的P、NP、L基因的克隆成功,为即将进行的新城疫病毒的反向遗传操作奠定了基础.
- 王学理李晓艳关洪玉任林柱刘锴殷小宇闫广谋王兴龙
- 关键词:新城疫病毒间接免疫荧光