冯忠堂
作品数： 190被引量：493H指数：11
  • 所属机构:昆明医科大学
  • 所在地区:云南省 昆明市
  • 研究方向:医药卫生
  • 发文基金:云南省自然科学基金

相关作者

王廷华
作品数：547被引量：1,080H指数：14
供职机构：四川大学华西医院
研究主题：脊髓 脊髓损伤 BDNF 免疫组织化学 脑源性神经营养因子
杨智勇
作品数：168被引量：345H指数：8
供职机构：昆明医科大学
研究主题：帕金森病 神经干细胞 中脑神经干细胞 NURR1 小胶质细胞
邓兴力
作品数：104被引量：252H指数：8
供职机构：昆明医科大学
研究主题：帕金森病 中脑神经干细胞 神经干细胞 小胶质细胞 基因修饰
马以骝
作品数：107被引量：153H指数：6
供职机构：昆明医科大学
研究主题：神经内镜 挤压伤 内窥镜 手术治疗 切除
杨志敏
作品数：63被引量：130H指数：5
供职机构：昆明医学院第一附属医院
研究主题：挤压伤 脊髓 脊髓损伤 时相变化 神经干细胞
作品列表
嗅鞘细胞及其表达的NGF和BDNF对神经干细胞增殖分化的影响及机制探讨
目的：初步探讨嗅鞘细胞体外促进神经干细胞增殖分化的机制。方法：利用 RT-PCR 技术和免疫细胞化学技术对嗅鞘细胞和神经干细胞表达的细胞因子及其受体进行定性研究。共培养液培养2d 后,分别对这些细胞因子和受体进行半定量 ...
赵楠冯忠堂苏平盛箫磊庞江霞王廷华
文献传递
海洛因成瘾者免疫系统超微病理变化研究
2002年
应用透射电镜对4例海洛因成瘾者脾脏、淋巴结和胸腺进行观察。探讨了海洛因成瘾者免疫系统超微病理损害。结果表明:脾脏淋巴细胞数量减少,核内假包涵体形成;淋巴结内淋巴细胞数量减少,多见细胞凋亡,胞浆内细胞器减少,核内假包涵体形成;胸腺T淋巴细胞胞浆内线粒体肿胀,胞浆成分少,核异染色质少。认为海洛因成瘾者免疫系统存在萎缩和退行性改变,机体免疫功能下降。
李利华朱华冯忠堂赵永和邢豫明
关键词：海洛因成瘾者免疫系统脾脏胸腺透射电镜
pcDNA3-hNGFb真核表达载体的构建及其表达
2008年
目的构建人神经生长因子β(NGF-β)基因真核表达载体并观察其在L929细胞内的表达。方法以RT-PCR从人脑组织总RNA中扩增NGF-βcDNA,将其克隆到真核表达载体pcD-NA3中,经酶切鉴定和序列分析后,以Lipofectamine2000介导转染L929细胞,应用免疫细胞化学和western blot鉴定NGF-β在细胞内的表达。结果RT-PCR产物为750bp的特异片段,重组质粒pcDNA3-hNGFb酶切后产生750bp和5.2kb的片段,DNA测序证实750bp片段的碱基序列与人NGF-βcDNA完全一致。将其转染L929细胞后,免疫细胞化学、western blot结果表明NGF-β及其前体proNGF-β能在真核细胞中正确表达。结论成功构建了重组真核表达质粒pcDNA3-hNGFb,为后续的研究奠定基础。
邓兴力杨智勇董坚王廷华徐丹冯忠堂
关键词：神经生长因子真核表达重组质粒转染
海洛因成瘾者中枢神经系统超微病理变化研究被引量：2
2002年
应用透射电镜对4例海洛因成瘾者中枢神经系统的海马、基底节和延髓进行观察。探讨了海洛因成瘾者中枢神经系统超微病理变化。结果表明:不同脑区神经细胞呈急、慢性缺氧性变性、坏死,神经纤维数量减少,髓鞘变性、崩解,神经细胞胞浆内线粒体肿胀、内质网扩张及细胞器减少。认为海洛因对中枢神经系统超微结构影响显著。
李利华朱华姚宏赵永和邢豫明冯忠堂杨润祥
关键词：海洛因成瘾者中枢神经系统透射电镜海马基底节
大鼠脊髓挤压伤后NT-3、NT-4在腹角运动神经元表达的变化被引量：4
2001年
我们前面的研究已证实 ,神经生长因子和脑源性神经营养因子与成年大鼠挤压性脊髓损伤修复有关。在本研究中 ,通过免疫组织化学 ABC法 ,我们探讨了挤压伤后不同时间脊髓腹角神经元 NT- 3和 NT- 4的表达。结果显示 :在对照组 ,NT- 3和 NT- 4的阳性反应主要分布在脊髓腹角神经元。挤压性脊髓损伤后 7天和 2 1天 ,NT- 3阳性神经元的数量较对照组和 2 4小时组明显增加。比较之 ,损伤后 2 4小时和 7天 ,NT- 4阳性神经元的数量已较正常者增多 ,且 NT- T的反应强度 2 1天者较 2 4小时和 7天者有增多。结果表明 NT- 3和 NT- 4的表达在挤压性损伤后的脊髓腹角神经元被不同程度地上调。提示NT- 3和 NT-
冯忠堂路华王廷华马以骝杨志敏
关键词：NT-3NT-4运动神经元
长期口服天麻素对SAMP8鼠记忆力及额叶Sst表达的影响被引量：7
2010年
目的:研究长期口服天麻素对SAMP8鼠记忆力的影响及与额叶Sst表达水平的关系。方法:将4月龄雄性SAMP8鼠20只随机分成2组:天麻素治疗组和对照组。治疗组每只鼠平均每日饮10ml含60μg/ml天麻素的蒸馏水,对照组每日仅饮用蒸馏水,直至12月龄。然后,观察两组鼠皮毛、眼睑、运动等基本情况;并通过passive-avoidance-test实验检测两组鼠对疼痛刺激的短期记忆力;同时用QRT-PCR(quantitative real time polymerase c hain reaction)和Western Blot分别检测两组鼠额叶生长抑素(somatostatin,Sst)的转录水平和表达水平。结果:天麻素治疗组小鼠的毛发光泽好、眼睑无炎症、较活跃,而对照组小鼠脱毛明显、部分小鼠眼睑有炎症、运动少;Passive-avoidance-test实验中天麻素治疗组小鼠明室停留时间及进入暗室小鼠的比例与对照组相比具有显著性差别;QRT-PCR结果显示,天麻素治疗组小鼠额叶中Sst转录水平较对照组升高,二者比较差别具有显著性;Western Blot结果显示,天麻素治疗组小鼠额叶中Sst表达水平较对照组明显升高。结论:天麻素治疗可能通过增进额叶Sst的转录和表达水平以改善SAMP8鼠的学习记忆能力。
陈绍春路钢冯曜宇李圆圆杨智勇李力燕冯忠堂
关键词：天麻素SSTBLOT
pEGFPN1-GDNF真核表达载体的构建及其表达
2008年
目的构建人胶质细胞源性神经营养因子（GDNF）基因真核表达载体并观察其在COS-7细胞内的表达。方法应用RT—PCR从U251细胞总RNA中扩增GDNF cDNA，将其克隆至真核表达载体pEGFPN1，经酶切鉴定及序列分析后，以FugeneHD介导转染COS-7细胞，应用免疫细胞化学和Western blot鉴定其在细胞内的表达。结果RT—PCR产物为650bp的特异片段，重组质粒pEGFPN1-GDNF经双酶切产生650bp和4．7kb的片段，测序分析结果与文献报道结果完全一致。将其转染COS-7细胞后，免疫细胞化学、Western blot结果表明GDNF蛋白能在COS-7细胞中正确表达。结论成功构建了pEGFPN1-GDNF真核表达载体，为进一步开展帕金森病的基因治疗研究奠定了基础。
邓兴力刘如恩杨智勇冯忠堂郭京雷德强李红艳陈志华
关键词：胶质细胞源性神经营养因子真核表达重组质粒转染
趋化因子Fractalkine体外趋化骨髓基质细胞迁移的实验研究被引量：12
2006年
目的探讨趋化因子Fractalkine对骨髓基质细胞(BMSCs)的体外迁移作用。方法采用全骨髓法培养成年Wistar大鼠BMSCs,取第五代BMSCs行免疫荧光鉴定;后通过细胞免疫荧光及RT-PCR的方法检测BMSCs表达趋化因子受体CX3CR1的情况,利用Boyden小室法探讨趋化因子Fractalkine对BMSCs的体外趋化作用及其特异性。结果第五代BMSCs都表达间充质干细胞标记物Vimentin、Laminin及Fibronectin;CX3CR1细胞免疫荧光及RT-PCR结果证实BMSCs表达趋化因子受体CX3CR1,趋化因子Fractalkine(5、50、500ng/mL)体外可趋化BMSCs迁移,抗Fractalkine多克隆抗体可对抗其趋化迁移作用。结论Fractalkine/CX3CR1通路参与BMSCs体外迁移,为进一步研究BMSCs的迁移机制提供了理论依据。
丁鹏冯忠堂余化霖王嘉沪李玉保严琪薛黎萍林荣安
关键词：骨髓基质细胞趋化因子迁移体外
枕下远外侧手术入路相关解剖标志的显微解剖学研究被引量：2
2007年
目的探讨枕下远外侧手术入路相关标志的显微外科解剖。方法在30具(60侧)颅骨干标本上对枕大孔区的重要骨性结构(枕髁、舌下神经管等)的形状、大小及毗邻结构进行测量。在10具(20侧)10%福尔马林固定的成人连颈尸体头颅标本上进行模拟远外侧手术入路进行解剖,显露枕下区的椎动脉,测量相关参数。在手术显微镜下(×4～×10)对15具(30侧)10%福尔马林固定的成人尸头标本进行解剖,显露枕髁关节面,自后外向前内方向磨除枕髁,记录显露舌下神经管内口所磨除的枕髁量。结果①枕髁位于枕骨大孔两侧,舌下神经管位于枕髁中后1/3处,磨除枕髁至舌下神经管内口处,可较好地显露枕大孔区腹侧结构。②第2颈神经根的前支均从椎动脉寰枢椎段的背侧越过,椎动脉颅外段长度及弯曲变异较大,外周有静脉丛或静脉窦包裹。③从椎动脉前方切开硬膜,可避开在后组颅神经根丝间的操作,减少对脑干的牵拉。结论研究枕下远外侧入路的显微解剖,有助于在切除枕大孔腹侧及下斜坡区的肿瘤中保护重要结构。
刘亮陈礼刚官明夏祥国王永刚冯忠堂
关键词：椎动脉枕髁远外侧入路显微解剖
GDNF基因修饰大鼠胚胎中脑神经干细胞的建立被引量：2
2008年
目的建立脑源性神经营养因子(GDNF)基因修饰大鼠胚胎中脑神经干细胞。方法以RT-PCR扩增GDNF基因编码序列,将其克隆至质粒pEGFPN1构建重组质粒pEGFPN1-GDNF,经酶切鉴定及序列分析后,以FuGENE HD转染试剂介导转染大鼠胚胎中脑神经干细胞。免疫细胞化学、western blot鉴定GDNF的表达,诱导分化后免疫细胞化学鉴定其分化能力。结果RT-PCR产物为650bp的特异片段,重组质粒pEGFPN1-GDNF经酶切产生650bp和4.7kb的片段,序列分析结果与文献报道一致。免疫细胞化学、western blot表明GDNF基因修饰细胞能正确表达GDNF且基因修饰不影响其增殖与分化。结论建立GDNF基因修饰大鼠胚胎中脑神经干细胞,为进一步应用其开展帕金森病的细胞移植治疗研究奠定基础。
邓兴力刘如恩郭京冯忠堂王武雷德强李红艳陈志华
关键词：脑源性神经营养因子基因中脑神经干细胞基因转染
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