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基于PI3K/AKT信号通路探讨DJ-1 蛋白 对抑郁症大鼠海马中神经递质的影响 2025年 1 蛋白 对抑郁症大鼠神经递质的影响。方法TUNEL(terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick-end labeling)试剂盒检测细胞凋亡率。酶联免疫吸附法测定血清中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)的含量,海马区中5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)、5-羟吲哚乙酸(5-hydroxyindoleacetic acid,5-HIAA)、多巴胺(dopamine,DA)的水平;蛋白 质印迹检测海马区DJ-1 、磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3 kinase,PI3K)、蛋白 激酶B(protein kinase B,AKT)、p-PI3K、p-AKT、Bcl-2和Bcl-2相关X蛋白 (Bcl-2 associated X protein,Bax)的表达。结果过表达DJ-1 后能明显降低中细胞凋亡率和血清中TNF-α和IL-6的含量,上调海马区5-HT、5-HIAA、DA的水平,上调p-PI3K、p-AKT和Bcl-2的表达,抑制Bax的表达,但PI3K抑制剂LY294002可部分解除过表达DJ-1 对神经元细胞的保护作用。结论过表达DJ-1 后能明显抑制抑郁症大鼠炎症性应激,降低细胞的凋亡率,上调中5-HT、5-HIAA和DA的含量,这可能与激活PI3K/AKT信号有关。关键词：DJ-1蛋白 抑郁症 神经递质 一株用绿色荧光蛋白 标记N{1 }1 蛋白 的重组蓝舌病毒 蛋白 标记N{1 }1 蛋白 的重组蓝舌病毒。本发明通过在野生型蓝舌病毒非结构蛋白 N{1 }1 的1 56位和1 57位氨基酸之间插入增强型绿色荧光蛋白 (enhanced green fluores...肺腺癌患者CT征象表现与P53、E-cadherin、TGF-β1 蛋白 表达的相关性 2024年 蛋白 (E-cadherin)、转化生长因子-β1 (TGF-β1 )蛋白 表达的相关性。方法选择2020年1 月至2022年1 2月在新乡市中心医院行手术切除的97例肺腺癌患者为研究对象,采用免疫组化法检测肺腺癌组织及癌旁组织P53、E-cadherin、TGF-β1 蛋白 表达情况,术前采用德国西门子64排多层螺旋CT增强扫描,分析CT征象与P53、E-cadherin、TGF-β1 蛋白 表达的相关性。结果肺腺癌组织P53、TGF-β1 蛋白 阳性表达率高于癌旁组织,E-cadherin蛋白 阳性表达率低于癌旁性组织(P<0.05);有棘突征、毛刺征和分叶征CT征象的肺腺癌组织中P53蛋白 阳性表达率高于无棘突征、毛刺征和分叶征CT征象者(P<0.05);有棘突征、毛刺征CT征象的肺腺癌组织中E-cadherin蛋白 阳性表达率低于无棘突征、毛刺征CT征象者(P<0.05);有血管集束征、毛刺征、分叶征CT征象的肺腺癌组织中TGF-β1 蛋白 阳性表达率高于无血管集束征、毛刺征、分叶征CT征象者(P<0.05)。结论肺腺癌组织P53、TGF-β1 蛋白 表达增高,E-cadherin蛋白 表达降低,其阳性表达率与肺腺癌患者CT征象存在一定的相关性。关键词：肺腺癌 抑癌基因 上皮钙黏蛋白 GmCG1 蛋白 在提高大豆蛋白 质含量中的应用 1 蛋白 在提高大豆蛋白 质含量中的应用，属于植物育种技术领域，为了提高大豆的蛋白 质含量。本发明公开GmCG1 蛋白 在提高大豆蛋白 质含量的应用，GmCG1 蛋白 的序列如S EQ ID NO.2所示。为后续制备高蛋白 ...不同表达系统来源的S ARS -CoV-2 N蛋白 以及联合S 1 蛋白 的免疫效果评价 2024年 S ARS -CoV-2全长N蛋白 以及联合S 1 蛋白 在小鼠体内的免疫原性进行评价.方法将蛋白 与氢氧化铝以及CpG佐剂混合后通过肌肉注射免疫小鼠,初次免疫后4 w进行加强免疫,通过ELIS A和S ARS -CoV-2假病毒检测结合以及中和抗体水平,通过IFN-γELIS pot检测细胞免疫应答水平.结果免疫S 1 蛋白 以及N蛋白 加强免疫后均能诱导产生高滴度的IgG抗体,并且均高于初次免疫(P<0.05),且真核系统与原核系统来源的N蛋白 诱导的IgG抗体滴度没有差异(P>0.05).N蛋白 与S 1 蛋白 分别联合氢氧化铝和CpG佐剂均诱导了较为平衡的Th免疫应答.假病毒中和试验结果显示S 1 蛋白 能诱导产生中和抗体,但N蛋白 无法诱导产生.从细胞免疫应答水平来看,S 1 蛋白 以及N蛋白 均能诱导IFN-γ分泌细胞的产生,真核系统来源的N蛋白 相较于原核系统诱导作用更强,差异有统计学意义(P<0.05).N蛋白 与S 1 蛋白 联合免疫小鼠与仅免疫一种蛋白 相比,无论是体液免疫还是细胞免疫均没有得到增强.结论本研究比较了不同表达系统来源的N蛋白 以及联合N蛋白 与S 1 蛋白 的免疫原性,为进一步揭示S ARS -CoV-2结构蛋白 诱导的免疫应答特点以及疫苗的研发提供了参考.关键词：新型冠状病毒 核衣壳蛋白 S1蛋白 一种LbCpf1 蛋白 的表达及其纯化方法和应用 1 蛋白 的表达及其纯化方法和应用，属于生物技术领域。本发明为解决现有LbCpf1 蛋白 纯化技术中存在周期长、操作复杂、成本高和蛋白 纯度较低的技术问题，本发明提供一种LbCpf1 蛋白 表达及其纯化方法，所述方法以p...MORF4L1 蛋白 抗体制备及生物信息学分析 2024年 1 原核表达载体和纯化表达产物,制备MORF4L1 蛋白 抗体并进行生物信息学分析。[方法]利用PCR将MORF4L1 基因片段酶切、克隆、转化至大肠杆菌Bl21 (DE3),经IPTG诱导表达蛋白 。利用His-Tag技术纯化重组蛋白 ,用重组蛋白 免疫新西兰白兔,采集抗血清后通过硫酸铵沉淀法将多克隆抗体从抗血清中纯化,应用Western Blotting验证多克隆抗体与内外源性MORF4L1 蛋白 的结合特异性。利用在线软件(GEPIA、UALCAN)进行生物信息学分析。[结果]成功构建了重组蛋白 ,蛋白 纯化后在相对分子质量(Mr)43000位置处有单一条带,重组His-MORF4L1 蛋白 与His抗体发生特异性结合。制备的抗血清与MORF4L1 蛋白 特异性结合,纯化后仅在相对分子质量(Mr)55000和25000位置处有条带。纯化的多克隆抗体与内外源性MORF4L1 蛋白 发生特异性反应。MORF4L1 的表达与肝癌不良预后相关。[结论]成功构建MORF4L1 蛋白 及抗体,MORF4L1 在肝癌中高表达预后差,对进一步研究MORF4L1 蛋白 的结构和生物学功能具有重要意义。关键词：重组蛋白 蛋白纯化 多克隆抗体 抗体制备 生物信息学分析 结肠腺癌组织中Cripto-1 蛋白 和锌指转录因子{1 }nail与基质金属蛋白 酶-9的表达及临床意义 2024年 1 (Cripto-1 )、锌指转录因子(S nail)和基质金属{1 }酶-9(MMP-9)的表达情况及临床病理特征。方法回顾性分析2020年1 月至2021 年8月于韶关市粤北人民医院胃肠外科92例行手术切除结肠腺癌患者的临床资料,手术切除标本92个。另选取癌旁不典型增生组织56例和正常结肠组织35例作为对照。采用免疫组化检测并比较Cripto-1 、S nail和MMP-9在结肠腺癌组织、不典型增生和正常结肠黏膜组织中的表达情况,采用S pearman相关分析Cripto-1 、S nail和MMP-9与结肠腺癌临床病理特征的相关性。结果结肠腺癌、不典型增生、正常结肠组织的CR-1 、S nail和MMP-9阳性率比较差异有统计学意义(P<0.05);结肠腺癌及不典型增生组织中CR-1 、S nail和MMP-9阳性率均高于正常结肠组织,结肠腺癌组织中S nail和MMP-9阳性率均高于不典型增生组织,差异均有统计学意义(P<0.05);结肠腺癌组织与不典型增生组织中CR-1 阳性率比较差异无统计学意义。肿瘤的浸润深度、临床TNM分期及淋巴结转移情况不同的患者Cripto-1 、S nail和MMP-9在结肠腺癌组织中的表达阳性率比较差异有统计学意义(P<0.05)。肿瘤浸润T3~T4、临床分期Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴结转移的患者结肠腺癌组织中CR-l、S nail和MMP-9的表达阳性率均高于肿瘤浸润T1 ~T2、临床分期Ⅰ~Ⅱ期和无淋巴结转移的患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结肠腺癌组织中CR-1 表达与S nail和MMP-9的表达呈正相关(r>0,P<0.05),MMP-9表达与S nail表达亦呈正相关(r>0,P<0.05)。结论Cripto-1 、S nail和MMP-9在结肠癌的浸润和转移中起协同调节作用。关键词：结肠腺癌 锌指转录因子 基质金属蛋白酶-9 免疫组织化学 血塞泰对缺血性脑卒中大鼠S TIM1 、Orai1 {1 }表达的影响 2024年 S )大鼠基质相互作用分子1 (stromal interaction molecule 1 ,S TIM1 )及钙释放激活钙通道蛋白 1 (calcium release-activated calcium channel protein 1 ,Orai1 )的影响。方法选取60只S PF级雄性S D大鼠,随机分为假手术组1 0只、造模组50只,采用线栓法制备大脑中动脉栓塞(medial cerebral artery occlusion,MCAO)模型。采用随机数字表法将造模成功的41 只大鼠分为模型组、血塞泰低剂量组(1 2.6 g/kg)、血塞泰中剂量组(25.2 g/kg)、血塞泰高剂量组(50.4 g/kg)和阿司匹林肠溶片组(1 8 mg/kg),其中血塞泰低剂量组9只,其余每组各8只;假手术组和模型组给予等量生理盐水灌胃。每组连续干预7 d。采用改良神经功能损伤评分(modified Neurological S everity S core,mNS S )评估各组大鼠神经功能损伤情况,TTC染色法检测大鼠脑组织的梗死面积,ELIS A法测定大鼠血清中的白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)含量,RT-PCR检测脑组织中S TIM1 、Orai1 mRNA的表达,免疫共沉淀检测脑组织S TIM1 、Orai1 的蛋白 相对表达水平。结果与假手术组相比,模型组大鼠mNS S 评分增加(P<0.01 ),脑梗死率增加(P<0.01 ),血清IL-6、TNF-α含量增加(P<0.01 ),脑组织S TIM1 、Orai1 mRNA表达水平和蛋白 相对表达水平升高(P<0.01 )。与模型组相比,血塞泰各剂量组和阿司匹林肠溶片组大鼠mNS S 评分下降(P<0.05),血清IL-6、TNF-α含量下降(P<0.01 ),脑组织S TIM1 、Orai1 mRNA表达水平下降(P<0.01 );血塞泰中、高剂量组和阿司匹林肠溶片组大鼠脑梗死率下降(P<0.01 ),脑组织S TIM1 、Orai1 的蛋白 相对表达水平降低(P<0.05,P<0.01 )。与阿司匹林肠溶片组相比,血塞泰低剂量组脑梗死率增加(P<0.01 ),血清IL-6、TNF-α含量增加(P<0.01 ),脑组织S TIM1 、Orai1 mRNA表达水平增加(P<0.05);血塞泰中剂量组血清IL-6、TNF-α含量明显增加(P<0.01 ),脑组织S TIM1 、Orai1 mRNA表达水平下降(P<0.0关键词：缺血性脑卒中 炎症 BAP1 蛋白 表达缺失对恶性间皮瘤患者的预后价值研究 2024年 1 相关蛋白 1 (BRCA1 -associated protein 1 ,BAP1 )表达缺失对恶性间皮瘤(malignant mesothelioma,MM)患者的预后价值。方法选取浙江省1 998年1 月至201 7年1 2月收治的82例MM患者,通过免疫组织化学分析检测BAP1 蛋白 的表达。用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,用多变量Cox比例风险模型分析生存率的影响因素。结果82例MM患者中女性61 例(74.4%),年龄(57±1 1 )岁。39例(47.6%)患者存在BAP1 蛋白 表达缺失。患者生存率与BAP1 蛋白 表达缺失及其年龄相关(χ^(2)=5.27、5.66,P=0.022、0.01 7)。亚组分析显示,BAP1 蛋白 表达缺失与年龄<57岁、女性、胸膜MM、上皮型MM、采用药物或手术治疗方法的MM患者预后较好相关(P<0.05)。多变量模型结果显示,BAP1 蛋白 阳性表达(HR=3.75,95%CI:2.23~6.30,P<0.001 )以及年龄≥57岁(HR=1 .66,95%CI:1 .01 ~2.72,P=0.049)是MM患者生存的危险因素。结论BAP1 蛋白 表达缺失可能是MM患者的独立预后因素,与患者较长的生存率相关。关键词：间皮瘤 恶性间皮瘤 预后
