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植物RNA沉默抗病机制与应用研究进展: 2024年; RNA沉默是真核生物基因表达调控的保守机制,在植物生长发育以及响应生物和非生物胁迫过程中发挥着非常重要的作用。跨界RNA沉默与种间RNA沉默为开发基于RNA沉默的作物病害防控体系提供了理论基础。本文概括了植物RNA沉默保守途径,归纳了RNA沉默在植物-病原互作研究中的代表性研究,阐述了基于RNA沉默开发的宿主诱导基因沉默、喷施诱导基因沉默和微生物诱导基因沉默技术的原理,以及应用研究现状,以期为开发基于RNA沉默的新型作物病害防控技术提供参考。; 田文谌婷刘清艳张博森郭惠珊赵建华; 关键词：RNA沉默

一种检测禾谷镰孢菌RNA沉默抑制子的方法: 本发明公开了一种检测禾谷镰孢菌RNA沉默抑制子的方法，属于微生物技术领域。该方法包括构建在禾谷镰孢菌内表达绿色荧光蛋白（eGFP）的重组菌株，之后向所述重组菌株中转入待鉴定的蛋白，最后转入靶向绿色荧光蛋白的RNA沉默载体...; 王双超聂建华郭立华

枣疯病植原体RNA沉默抑制子鉴定和靶标蛋白筛选: 枣(Ziziphus jujuba)是原产我国的乡土树种,也是我国的第一大干果树种。枣疯病是枣树上重要的病害之一,是一种由植原体引起的致死性病害,给枣产业的高质量发展造成严重的危害。植原体通过分泌致病效应因子蛋白,与寄主...; 乔泽森; 关键词：枣疯病 RNA沉默抑制子

RNA沉默剂及使用方法: 本公开内容的一些方面提供了用于降低靶RNA表达的核酸。在一些方面中，本公开内容提供了在设计用于RNA干扰的核酸中可用的核酸修饰和碱基配对构型。; 李珍志清·乔尔·周

一种植物抗病毒RNA沉默相关转录因子筛选方法及应用: 本发明公开了一种植物抗病毒RNA沉默相关转录因子筛选方法及应用，以植物矮牵牛作为研究对象，采用转录组测序和VIGS相结合的技术，首先构建TRV病毒侵染的差异表达基因数据库，从中选择极显著差异表达转录因子作为候选基因；分别...; 孙道阳毛雁翔

小干扰RNA沉默miR-885对结直肠癌SW620细胞的影响及机制研究被引量：1: 2023年; 目的探究小干扰RNA(siRNA)沉默miR-885对结直肠癌SW620细胞增殖和侵袭能力的影响及相关作用机制。方法取对数生长期的SW620细胞,随机分为空白组(不作处理)、miR-NC组(转染阴性对照质粒)、miR-885 siRNA组(转染miR-885 siRNA质粒)和miR-885 siRNA+氯化锂(LiCl)组(转染miR-885 siRNA质粒,并加入LiCl使其浓度为40 mmol/L)。采用实时荧光定量PCR法检测各组细胞的miR-885表达水平。采用CCK-8法检测各组细胞的增殖能力。采用Transwell实验检测各组细胞的侵袭能力。采用蛋白质印迹法检测各组细胞中β-连环蛋白(β-catenin)、磷酸化β-catenin(p-β-catenin)、糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)和p-GSK-3β的蛋白表达水平。结果与空白组、miR-NC组相比,miR-885 siRNA组细胞的miR-885相对表达量均降低,转染24、48、72 h时吸光度值(A值)均降低,侵袭细胞数均减少,p-β-catenin/β-catenin均降低,p-GSK-3β/GSK-3β均升高,差异均有统计学意义(P均<0.05)。与miR-885 siRNA组比较,miR-885 siRNA+LiCl组细胞的miR-885相对表达量升高,转染24、48、72 h时A值均升高,侵袭细胞数增多,p-β-catenin/β-catenin升高,p-GSK-3β/GSK-3β降低,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论siRNA沉默miR-885可减弱结直肠癌SW620细胞的增殖、侵袭能力,其作用机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路有关。; 周彬熊聪黄河祝滔; 关键词：结直肠癌增殖

甘蔗线条花叶病毒RNA沉默抑制子的寄主互作蛋白鉴定被引量：2: 2022年; 甘蔗线条花叶病毒(Sugarcane streak mosaic virus,SCSMV)是引起甘蔗花叶病的一种主要病原。SCSMV编码的P1蛋白是RNA沉默抑制子,在SCSMV抑制寄主的RNA沉默防御中发挥关键作用,但其作用机制尚未清楚。与寄主蛋白互作是RNA沉默抑制子发挥其抑制作用的主要途径之一,因此鉴定与病毒RNA沉默抑制子互作的寄主蛋白是研究抑制子作用机制的一个重要方法。为探究SCSMVP1抑制寄主RNA沉默的机制,本研究首先将SCSMVP1基因连接到质粒pGBKT7上构建诱饵质粒pGBKT7-P1,然后对pGBKT7-P1进行毒性和自激活检测,最后以pGBKT7-P1为诱饵,采用酵母双杂交技术从甘蔗cDNA文库中筛选与P1互作的寄主蛋白。结果显示,成功构建pGBKT7-P1诱饵质粒。将pGBKT7-P1诱饵质粒转入Y2HGold酵母菌株后,酵母菌株在SD/-Trp平板及液体培养基中生长良好,表明pGBKT7-P1诱饵质粒对Y2HGold酵母菌株无毒性。含pGBKT7-P1诱饵质粒的酵母菌株在SD/-Trp/X-α-Gal平板上长出白色菌落未变蓝,在SD/-Trp/X-α-Gal/AbA和SD/-Trp/-Leu/X-α-Gal/AbA平板上无菌落生长,表明pGBKT7-P1诱饵质粒无自激活活性。用pGBKT7-P1诱饵质粒对甘蔗cDNA文库进行筛选,经SD/-Trp/-Leu/X-α-Gal/AbA平板筛选1次及SD/-Trp/-Leu/-His/-Ade/X-α-Gal/AbA平板筛选3次后,获得42个阳性酵母克隆,提取阳性酵母质粒并导入大肠杆菌中扩大培养,经测序及blastx比对分析,获得13个可能与SCSMV P1互作的寄主甘蔗蛋白,分别是生长素应答蛋白IAA1、IAA15,转录因子NAC、GATA4、OFP4,真核翻译起始因子eIF5A,分子伴侣DnaJ,辅分子伴侣SBA1,重金属相关异戊二烯化植物蛋白HIPP35,mec-8和unc-52蛋白同系物抑制子SMU2,外膜孔蛋白OEP24,及2个未表征蛋白。基于这些蛋白的功能,推测P1可能通过与寄主蛋白互作来调控寄主防御反应相关基因的表达,和/或通过与寄主蛋白互作来影响寄主RNA沉默相关蛋白的合成、加工或转运,从而发挥其RNA沉默抑制子的�; 冯小艳王俊刚王文治沈林波赵婷婷冯翠莲张树珍; 关键词：RNA沉默抑制子 P1蛋白

小麦蓝矮植原体RNA沉默抑制子互作蛋白的筛选与分析被引量：1: 2022年; 【目的】揭示小麦蓝矮植原体(WBD phytoplasma)的致病机理及其与寄主的互作关系,为植原体病害防治提供理论依据。【方法】以SWP16为诱饵,将SWP16构建到诱饵载体pBT3-STE和pBT3-SUC上,在小麦酵母双杂交膜系统cDNA文库中筛选与SWP16互作的蛋白,并确定最佳的筛库条件。通过α-半乳糖苷酶活性检测试验对筛选到的互作蛋白进行二次验证,并运用Uniprot对其进行Gene Ontology(GO)注释分析。【结果】以pBT3STE-SWP16作为筛库的诱饵蛋白,确定20 mmol/L 3-AT为筛选文库的最佳浓度,从小麦cDNA文库中筛选到20种互作蛋白,包括Rieske蛋白、细胞色素b5、CASP蛋白等。经过复筛和α-半乳糖苷酶活性检测试验进一步验证了互作关系,其中14种互作蛋白参与运输、pH调节、光合作用、内质网应激反应、蛋白质泛素化等生理过程;18种互作蛋白存在于线粒体、内质网、细胞膜、细胞质、叶绿体和细胞壁等6种细胞组分中;20种互作蛋白的分子功能主要包括几丁质酶活性、反转运蛋白活性、脱水酶活性、转移酶活性和转录因子活性等。【结论】筛选获得20种与小麦蓝矮植原体效应蛋白SWP16互作的蛋白,有助于推动小麦蓝矮植原体与寄主互作关系的研究。; 杨彦君丁磊马欢吴云锋; 关键词：酵母双杂交

RNA沉默在马铃薯纺锤形块茎类病毒(PSTVd)致病中的作用研究: RNA沉默在类病毒与寄主互作中具有重要作用。一方面,寄主可通过RNA沉默抵御类病毒侵染;另一方面,类病毒可通过RNA沉默调控寄主基因表达,引起病害。本研究以番茄和马铃薯纺锤形块茎类病毒(PSTVd)为实验组合,研究RNA...; 张煜泓; 关键词：RNA沉默小RNA

甜菜孢囊线虫RNA沉默抑制子筛选及Hs34B08效应蛋白功能初步研究: 甜菜孢囊线虫是一类严重威胁甜菜生产安全的病原线虫,在全球50多个国家和地区均有发生和分布。该线虫寄主广泛,能够寄生超过218种寄主植物,给多种农作物造成了严重的危害,由于其危害严重性,我国将其列为进境检疫性有害生物名录,...; 蒋陈; 关键词：RNA沉默抑制子

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