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不同剂量猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因疫苗肌肉注射诱导仔猪细胞免疫的研究: 2009年; 将猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF5基因疫苗(pcDNA-PRRSV-SC2-ORF5)分别以200μg、100μg和50μg3种剂量肌肉注射免疫21日龄仔猪,同时设空载体对照和生理盐水空白对照。于免疫后7d、15d、30d、45d、60d和70d采用流式细胞仪(FACS)和淋巴细胞增殖试验(MTT法)分别对免疫猪外周血中CD4+、CD8+T淋巴细胞数和淋巴细胞的转化功能进行检测。结果表明3个不同剂量的pcDNA-PRRSV-SC2-ORF5基因疫苗免疫仔猪后均能诱导产生良好的细胞免疫应答,实验组与对照组比较差异极显著(p<0.01)或显著(p<0.05)。大剂量基因疫苗免疫仔猪的外周血T淋巴细胞的增殖能力及CD4+、CD8+百分含量高于中剂量和小剂量基因疫苗免疫的仔猪,表现出一定的量效关系。; 希尼尼根程安春汪铭书陈希文豆文波李雪梅刘伍梅张平英刘菲陈孝跃; 关键词：细胞免疫 PRRSV 基因疫苗

猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因疫苗的构建及其在Marc-145细胞中的表达被引量：5: 2008年; 根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)LV和VR-2332株的核苷酸序列,设计合成了1对特异性引物,对PRRSV四川分离株SC1和SC2进行RT-PCR,扩增出病毒ORF5基因。利用真核表达质粒pcDNA3.1(+)成功构建了PRRSV四川分离株ORF5基因疫苗pcDNA-PRRSV-SC1-ORF5和pcDNA-PRRSV-SC2-ORF5。通过脂质体转染法和电穿孔转染法将pcDNA-PRRSV-SC2-ORF5转染Marc-145细胞,间接免疫荧光技术跟踪监测ORF5基因的表达情况,结果表明,脂质体转染法和电穿孔转染法分别在转染26 h和23 h后检测到ORF5基因特异性表达产物,且随着培养时间的延长,特异性表达产物增多,两者均在56 h达到高峰;这证明pcDNA-PRRSV-SC2-ORF5在Marc-145细胞中已高效表达,为PRRSV基因疫苗在临床上应用提供了实验依据。; 希尼尼根程安春汪铭书陈希文豆文波李雪梅刘伍梅刘菲张平英陈孝跃; 关键词：PRRSV ORF5 基因疫苗

猪IL-2真核表达质粒构建及对PRRSV-ORF5基因疫苗免疫佐剂作用的研究被引量：9: 2007年; 本研究应用真核表达载体pcDNA3.1(+)和猪白细胞介素2(IL-2)基因成功构建了IL-2的真核表达质粒(pcDNA-IL-2),探讨了pcDNA-IL-2作为分子免疫佐剂对猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)ORF5基因疫苗(pcDNA-PRRSV-SC2-ORF5)免疫猪的增强作用。经间接ELISA法、MTT比色法及流式细胞仪分别对pcDNA-IL-2与pcDNA-PRRSV-SC2-ORF5共同免疫猪、pcDNA-PRRSV-SC2-ORF5单独免疫猪、pcDNA3.1(+)空载体和灭菌水免疫对照猪的血清抗PRRSV抗体IgG、外周血T淋巴细胞的增殖活性、CD4+和CD8+细胞比例进行检测,结果表明pcDNA-IL-2与pcDNA-PRRSV-SC2-ORF5共同免疫猪的IgG含量、外周血T淋巴细胞的增殖活性、CD4+和CD8+细胞比例与pcDNA-PRRSV-SC2-ORF5单独免疫猪相比有显著差异(P<0.05)。说明pcDNA-IL-2能显著增强pcDNA-PRRSV-SC2-ORF5基因疫苗免疫猪的体液和细胞免疫应答,可作为PRRSV基因疫苗的良好佐剂。; 希尼尼根程安春汪铭书陈希文豆文波李雪梅刘伍梅张平英刘菲陈孝跃; 关键词：IL-2 免疫

基因枪轰击和肌肉注射不同剂量PRRSV ORF5基因疫苗诱导仔猪细胞免疫的比较研究: 目的:研究猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)病毒ORF5基因疫苗(pcDNA-PRRSV-ORF5)经基因枪和肌肉注射免疫对诱导仔猪产生细胞免疫应答的影响.方法:用pcDNA-PRRSV-ORF5经基因枪和肌注分别免疫两组仔...; 希尼尼根陈孝跃程安春汪铭书陈希文豆文波李雪梅刘伍梅张平英刘菲; 关键词：基因枪轰击肌肉注射; 文献传递

猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因疫苗的构建及其在Marc-145细胞中的表达: 根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)LV和VR-2332株的核苷酸序列,设计合成了一对特异性引物,对PRRSV四川分离株SCI和SC2进行RT-PCR,扩增出病毒ORF5基因.利用真核表达质粒pcDNA3.1(+)成...; 希尼尼根陈孝跃程安春汪铭书陈希文豆文波李雪梅刘伍梅刘菲张平英; 关键词：猪繁殖呼吸综合征病毒 ORF5基因疫苗 MARC-145细胞基因表达; 文献传递

基因枪轰击和不同剂量肌注PRRSV ORF5基因疫苗在仔猪组织和血液中的分布: 将猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF5基因疫苗分别以200μg、100μg、100μg+100μg猪白介素2真核表达质粒(pcDNA-IL-2)和50μg肌肉注射以及10μg基因枪轰击的方法免疫28日仔猪,并设空...; 豆文波程安春汪铭书希尼尼根陈希文刘菲贾仁勇陈孝跃; 关键词：基因疫苗基因枪轰击仔猪; 文献传递

基因枪轰击和不同剂量肌注PRRSV ORF5基因疫苗在仔猪组织和血液中的分布: 将猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF5基因疫苗分别以200μg、100μg、100μg+100μg 猪白介素2真核表达质粒(pcDNA-IL-2)和50μg肌肉注射以及10μg基因枪轰击的方法免疫28日仔猪,并设...; 豆文波程安春汪铭书希尼尼根陈希文刘菲贾仁勇陈孝跃; 关键词：肌注基因枪轰击仔猪; 文献传递

猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因疫苗肌肉注射诱导小鼠的细胞免疫被引量：5: 2006年; 将猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF 5基因疫苗(pcDNA-PRRSV-ORF 5)以50、100、200μg 3个剂量肌注免疫BALB/c小鼠,以PBS和空载体质粒pcDNA为对照,采用流式细胞仪(FACS)、淋巴细胞增殖试验(M TT法)分别对小鼠外周血中CD4+、CD8+T淋巴细胞数和淋巴细胞转化功能进行了检测。结果,3个剂量的pcDNA-PRRSV-ORF 5接种小鼠后,其外周血都对ConA有明显的反应性,试验组与对照组比较差异极显著(P<0.01)或显著(P<0.05),CD4+T淋巴细胞数在免疫后7 d高于对照组(P<0.01),CD8+T淋巴细胞在免疫后28 d高于对照组,大剂量基因疫苗免疫小鼠的细胞免疫应答高于中、小剂量。结果表明,pcDNA-PRRSV-ORF 5免疫小鼠能够诱导机体产生良好的细胞免疫应答,并表现一定的剂量依赖性。; 陈希文程安春汪铭书希尼尼根豆文波李雪梅刘伍梅王刚张平英; 关键词：细胞免疫小鼠

猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因疫苗的构建及其在Marc-145细胞中的表达: 根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)LV和VR-2332株的核苷酸序列,设计合成了一对特异性引物,对PRRSV四川分离株SC1和SC2进行RT-PCR,扩增出病毒ORF5基因。利用真核表达质粒pcDNA3．1(+)成...; 希尼尼根程安春汪铭书陈希文豆文波李雪梅刘伍梅刘菲张平英陈孝跃; 关键词：PRRSV ORF5 基因疫苗 MARC-145细胞; 文献传递

基因枪轰击和肌肉注射不同剂量PRRSV ORF5基因疫苗诱导仔猪细胞免疫的比较研究: 目的:研究猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)病毒ORF5基因疫苗(pcDNA-PRRSV-ORF5)经基因枪和肌肉注射免疫对诱导仔猪产生细胞免疫应答的影响。方法:用pcDNA-PRRSV-ORF5经基因枪和肌注分别免疫两组仔...; 希尼尼根程安春汪铭书陈希文豆文波李雪梅刘伍梅张平英刘菲陈孝跃; 关键词：PRRS; 文献传递

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