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快速液相色谱联用质谱法测定人血浆氟伏沙明的药物浓度被引量:1
2017年
目的:建立快速液相串联质谱方法,测定人血浆中氟伏沙明的药物浓度。方法:色谱柱为Inertsil~?ODS-SP(100 mm×2.1mm,3μm),流动相为乙腈:2 mmol·L^(-1)醋酸铵缓冲液(含0.3%甲酸)=40∶60(v/v),流速为0.3 ml·min^(-1),兰索拉唑为内标。采用电喷雾离子源,以多反应监测(MRM)方式进行正离子检测。用于定量分析的离子分别为m/z 319.1→m/z 69.8(氟伏沙明)和m/z 370.2→m/z 252.1(兰索拉唑,内标)。结果:氟伏沙明的血浆浓度在1~100μg·L^(-1)范围内线性良好,定量下限为1"g·L^(-1),日内精密度<5%,日间精密度<10%,回收率为85%~95%。结论:该法操作简单,灵敏,准确,重现性好,适用于氟伏沙明人体药动学及生物等效性研究。
李杰杨艺叶佳龙伍三兰
关键词:氟伏沙明血药浓度
基于FPLC-LC-MS/MS分析嗜盐古菌Haloarcula hispanica胞内类泛素化底物
2017年
本研究结合SLIC克隆技术和快速蛋白质液相色谱-高效液相色谱-串联质谱(FPLC-LC-MS/MS)法,对嗜盐古菌Haloarcula hispanica类泛素蛋白ThiS的泛素化底物和缀合位点进行鉴定分析。采用SLIC克隆法构建类泛素蛋白ThiS表达质粒/整合质粒,经转染后的菌株在DMSO呼吸作用诱导下表达并纯化His6-ThiS蛋白缀合体。通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析,质粒型类泛素ThiS的表达远远高于基因型菌株的表达量,而通过定点突变,将ThiS的第89号位点突变成赖氨酸K和精氨酸R,进而使用胰蛋白酶对ThiS肽段上的赖氨酸残基-双甘氨肽标签进行酶切处理,采用LC-MS/MS法鉴定其底物和底物修饰位点。鉴定得到钼喋呤合成酶MoaE,蛋氨酸亚砜还原酶MsrA和其同系物MsrB,以及Fe-S簇组装蛋白SufB等4种底物蛋白。该方法通过结合蛋白位点突变和质谱检测,能够准确、有效地检测泛素/类泛素蛋白的修饰底物及其修饰位点,为深入泛素的生物性功能研究提供了切入点。
吴一飞韦露莎陈辉
关键词:嗜盐古菌
FPLC直肠黏膜下多点注射治疗直肠癌淋巴结转移的临床研究
2016年
目的探讨复方氟尿嘧啶多相脂质体(FPLC)直肠黏膜下多点注射对直肠癌淋巴结转移的影响。方法将符合纳入标准的100例直肠癌患者随机分为观察组与对照组,各50例,观察组术前60 h、36 h分别于直肠黏膜下多点注射FPLC,80 mg/次,对照组不予以干预,两组均行直肠癌根治术,比较两组术后淋巴结转移、癌细胞凋亡指数(AI)、增殖指数(PI)及并发症情况。此外术后随访6~24个月,比较两组局部复发率。结果观察组MM率、淋巴结MM度分别为10.00%、1.57%,较对照组的30.00%、11.11%差异有统计学意义(P〈0.05)。观察组AI、PI分别为(2.087±0.076)、(37.167±18.254),较对照组的(1.035±0.083)、(44.869±20.125)差异有统计学意义(P〈0.05)。观察组随访12个月、24个月局部复发率分别为4.00%、10.00%,较对照组的16.00%、26.00%差异有统计学意义(P〈0.05)。结论 FPLC直肠黏膜下多点注射能有效抑制直肠癌患者术后淋巴结转移及微转移灶,特别是微转移灶,同时能明显促直肠癌细胞凋亡,抑制其增殖,最终降低其局部复发率。
宋士军王全志
关键词:直肠癌淋巴结转移
利用FPLC分析转基因小型猪血浆脂蛋白
蛋白CⅢ(Apolipoprotein CⅢ,ApoCⅢ)是一种低分子水溶性蛋白质,79个氨基酸残基,单链多肽,分子量为8.7~8.8kD,主要分布在血浆高密度脂蛋白(HDL)、极低密度脂蛋白(VLDL)和乳糜微粒(CM...
魏静元刘成雁王志嘉
关键词:血浆脂蛋白
本科生FPLC实验教学管理模式的探索与实践被引量:1
2012年
快速蛋白液相(FPLC)是近十几年来发展起来的,专门用于分离蛋白质、多肽及多核苷酸的现代液相色谱系统,是一类进口贵重仪器,将其引入我校本科生生物技术综合大实验教学,本文在教学实践的基础上,就实验的具体实施和教学效果,探索了实验教学模式及其管理模式。
刘林丽张恩平
关键词:FPLC实验教学
Variations in lipoprotein profiles of difference species,analyzed by a fluorescence detection combined FPLC technique
Different animal models have been used to study the pathomechanisms involved in dyslipidemia and evaluate the ...
YANG LiuZHU Hai-bo
关键词:LIPOPROTEINLIPIDSFPLCDYSLIPIDEMIASPECIES
快速蛋白液相色谱分离小麦高分子量谷蛋白亚基方法的研究被引量:2
2009年
高分子量谷蛋白亚基作为小麦贮藏蛋白的重要组成部分,其组成和含量对小麦面粉的烘烤品质和加工品质有重要影响。本研究以普通小麦品种小偃22号为材料,采用快速蛋白液相色谱(Fast Protein Liq-uid Chromatograth,FPLC)凝胶过滤来分离高分子量谷蛋白亚基,并从样品浓度、洗脱液和流速3个方面进行了研究,发现将原样品稀释8倍、洗脱液为尿素、流速为0.3 ml/min时洗脱效果最好。
李玉冰裴玉贺王海娟郭新梅张恩盈宋希云
关键词:小麦高分子量谷蛋白亚基凝胶过滤
一种利用FPLC测定脱氧胞苷激酶(dCK)活性方法
本发明涉及一种利用蛋白质层析系统(FPLC)测定脱氧胞苷激酶(dCK)酶活的方法,包括步骤:(1)30℃~40℃,将反应混合液放入气浴/水浴恒温振荡器中,120~150转/min,反应2~3小时,加入冰甲醇终止反应,冰浴...
朱利民柴艳倩
文献传递
FPLC在纯化马铃薯酪氨酸酶中的应用被引量:3
2007年
对马铃薯酪氨酸酶的分离纯化进行了初探。其粗酶最佳硫酸铵盐析浓度65%,最佳温度30℃,最佳pH7.5。分别预装Sephodex G75分子筛凝胶柱和Hi Trip QFF阴离子交换层析柱在FPLC自动分离得到纯化的酪氨酸酶,最高纯化倍数达60,并以L-DOPA作底物,测得比酶活为242.84 U/mg蛋白。对酶活最大的组分进行了SDS-PAGE表征,电泳呈现一条带,相对分子质量为5.6×104。米氏常数Km为2.0 mmol/L。
吕新宇刘英杰刘英莉李莉江敏
关键词:电泳
HiTrapQ柱FPLC快速纯化人血清白蛋白(HSA)
2004年
为研制新型三、四天线半乳糖肝受体功能显像剂,须将三、四天线半乳糖与人血清白蛋白(HSA)偶联,故必须制备较纯净人血清白蛋白(HSA)。在FPLC上用HiTrapQ柱快速纯化人血清白蛋白(HSA)。经PAGE和SDS-PAGE鉴定只有一条带。在FPLC上用HiTrapQ柱纯化HSA有速度快、纯化量大且方法较为简便等特点。
钦晓峰蔡刚明周杏琴周尧远蒋孟军谭成张荣军
关键词:FPLCHSA人血清白蛋白

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米力
作品数:67被引量:231H指数:8
供职机构:第四军医大学
研究主题:单克隆抗体 肝癌 肝肿瘤 HAB18 杂交瘤
陈志南
作品数:295被引量:846H指数:15
供职机构:东北石油大学艺术学院
研究主题:单克隆抗体 肝癌 肝肿瘤 HAB18G/CD147 CD147
陈旭升
作品数:210被引量:900H指数:18
供职机构:江苏省农业科学院
研究主题:棉花 陆地棉 杂交棉 纤维品质 抗虫杂交棉
张荣军
作品数:101被引量:159H指数:8
供职机构:江苏省原子医学研究所
研究主题:显像研究 重组水蛭素 核医学 TC 白桦酸
蔡刚明
作品数:83被引量:203H指数:9
供职机构:江苏省原子医学研究所
研究主题:时间分辨荧光免疫分析 人血清白蛋白 TC 时间分辨荧光免疫分析法 HBEAG