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一种辣椒种子携带辣椒斑驳病毒的综合脱毒处理方法
本发明公开了一种脱除辣椒种子携带辣椒斑驳病毒的方法,属种子处理技术领域。具体通过以下步骤完成:(1)酸处理,(2)碱处理,(3)引发,(4)干燥,(5)发芽检测,(6)病毒检测。该方法克服了现有技术的不足,利用本发明提...
王德欣邱艳红吴萍徐秀兰张海军孟淑春夏阳王红阳郭宇刘树华李龙飞贾志杨
茄科植物编码的CAB13蛋白在辣椒斑驳病毒病防治中的应用
本发明涉及基因工程技术领域,尤其涉及茄科植物编码的CAB13蛋白在辣椒斑驳病毒病防治中的应用。所述茄科植物编码的CAB13蛋白包括如SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列。所述应用包括:防治辣椒斑驳病毒病、调控植物的...
张军民林玮鸿张秦张树根周涛邢永萍王振泉杜开通
利用酵母双杂交系统筛选与辣椒斑驳病毒126 kDa蛋白互作的辣椒寄主因子
2024年
【目的】辣椒斑驳病毒(pepper mild mottle virus,PMMoV)是世界范围内危害辣椒的主要病毒之一。126 kDa蛋白是PMMoV编码的重要致病因子,但致病机制目前仍不清楚。本研究旨在筛选与126 kDa蛋白互作的辣椒寄主因子,为解析PMMoV的致病机制提供理论依据。【方法】首先,通过同源重组法构建诱饵载体pGBK-126 kDa;并以辣椒叶片为试验材料,利用Trizol法提取辣椒叶片总RNA,制备辣椒酵母cDNA文库;之后,使用pGBK-126 kDa对cDNA文库进行筛选,并通过NCBI和Uniprot等对筛选结果进行序列比对和生物信息学功能分析,根据比对分析结果,选取可能参与到植物抗病通路的寄主因子,克隆其全长CDS构建到pGADT7载体,酵母双杂交(Y2H)、双分子荧光互补(BiFC)和荧光素酶互补(LCI)进一步验证126 kDa与寄主因子之间的互作;最后,通过瞬时过表达寄主蛋白分析其在PMMoV侵染过程中的作用。【结果】提取获得高质量辣椒RNA,无降解;获得高质量酵母cDNA文库,成功构建诱饵质粒pGBK-126 kDa,筛选得到与126 kDa蛋白互作的辣椒寄主因子18个;生物信息学分析结果显示,18个寄主因子广泛参与到植物酶系统、物质及能量代谢调节过程、DNA结合转录过程、激素合成过程以及防御响应等多个通路;选取的其中3个寄主因子(LA2、PDHE1、BXL1)在一对一酵母双杂交互作验证中均存在与126 kDa的相互作用,表明初筛的结果可靠;通过BiFC和LCI进一步验证了126 kDa与BXL1之间体内外互作;瞬时过表达BXL1发现PMMoV的侵染受到了显著抑制。【结论】成功构建了pGBK-126 kDa诱饵质粒,基于该质粒对酵母cDNA文库进行筛选得到18个互作的寄主因子,广泛涉及植物生命活动过程中的多个通路,筛选结果验证可靠,其中,BXL1存在与126 kDa的体内外相互作用,并能够抑制PMMoV的侵染。研究结果可为深入探究PMMoV的侵染机制提供良好的理论和材料基础。
何勇范晓珠陈新月段书静胡婷婷谢如雪王宇晴陈静
关键词:辣椒轻斑驳病毒辣椒酵母双杂交致病机制
辣椒斑驳病毒的单克隆抗体及其应用
本发明公开了一种抗辣椒斑驳病毒的单克隆抗体及其应用,涉及辣椒斑驳病毒生物防治技术领域,所述单克隆抗体为抗体37‑C2‑G8或抗体38‑B3‑D9‑B3;抗体37‑C2‑G8的重链可变区CDR1、CDR2、CDR3的氨...
严丹侃王芳韩科雷马超陈莹李婷
极端东方假单胞菌在防治辣椒斑驳病毒中的应用
本发明属于微生物生物防治技术领域,具体的涉及一种对辣椒斑驳病毒具有防治作用的极端东方假单胞菌及其应用。本发明的极端东方假单胞菌AV3(<I>Pseudomonas extremorientalis</I> AV3)已在...
严丹侃王芳陈莹马超韩科雷李婷
极端东方假单胞菌在防治辣椒斑驳病毒中的应用
本发明属于微生物生物防治技术领域,具体的涉及一种对辣椒斑驳病毒具有防治作用的极端东方假单胞菌及其应用。本发明的极端东方假单胞菌AV3(Pseudomonas extremorientalis AV3)已在中国典型培养物...
严丹侃王芳陈莹马超韩科雷李婷
辣椒斑驳病毒RT-LAMP快速检测方法的建立
2023年
辣椒斑驳病毒(pepper mild mottle virus,PMMo V)是发生在辣椒上的一种重要病毒病。通过逆转录环介导等温扩增技术(RT-LAMP),以PMMo V外壳蛋白CP序列为靶标基因,设计F3/B3、FIP/BIP 4条引物,构建了基于RT-LAMP技术的PMMo V快速检测方法。结果表明,该方法在60 min内便可完成对PMMo V的特异性检测,灵敏度比传统RT-PCR技术高10倍,检测过程中与其他相关病毒无交叉反应。本试验建立的PMMo V RT-LAMP检测方法操作简便、特异性强、灵敏度高,可用于田间生产中对PMMo V的快速检测。
邵煜尊张万红王惠王玉洁苗圃申莉莉李莹焦裕冰杨金广
关键词:辣椒轻斑驳病毒
一种辣椒斑驳病毒侵染诱导型启动子及其应用
本发明公开了一种辣椒斑驳病毒侵染的诱导型启动子,是本申请新发现的辣椒斑驳病毒侵染诱导表达的启动子,该诱导型启动子序列如SEQ ID NO.1所示。将所述诱导型启动子与目的基因组合构建表达载体,并转入宿主细胞中,在辣椒...
鲁宇文陈益罗朝鹏彭杰军郑红英陈剑平燕飞
辣椒斑驳病毒侵染性克隆的Cre-LoxP重组系统及其应用
本发明涉及植物基因工程领域,具体涉及一种辣椒斑驳病毒侵染性克隆的Cre‑LoxP重组系统及其应用。本发明提供了一种辣椒斑驳病毒PMMoV‑GFP侵染性克隆的Cre‑LoxP重组系统,其包括pJM23载体、pJG102...
彭杰军郑红英赵晋平钱靖燕飞鲁宇文林林程晔陈剑平
一种检测辣椒斑驳病毒和炭疽菌的引物组、试剂盒及方法
本发明涉及植物病毒、病菌生物检测技术领域,具体涉及一种基于重组酶介导等温核酸扩增技术(RT‑RAA)检测辣椒斑驳病毒和炭疽菌的引物组、试剂盒及方法。本发明中所设计的检测PMMoV的正向引物PM‑F2的序列如SEQ ID...
宋雪梅燕飞曹宇浩严丹侃韩科雷

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郭京泽
作品数:26被引量:107H指数:7
供职机构:天津出入境检验检疫局动植物与食品检测中心
研究主题:辣椒轻斑驳病毒 辣椒 反转录PCR DNA条形码 辣椒种子
郑红英
作品数:86被引量:226H指数:8
供职机构:浙江省农业科学院
研究主题:侵染 病毒 原核表达 抗血清制备 分离物
杨洪一
作品数:99被引量:328H指数:10
供职机构:东北林业大学
研究主题:菌根真菌 PCR 草莓 微生物学 RT-PCR
王亚南
作品数:124被引量:532H指数:12
供职机构:河北农业大学
研究主题:苹果 RT-PCR 苹果锈果类病毒 苹果树腐烂病 苹果树
吴元华
作品数:369被引量:2,109H指数:24
供职机构:沈阳农业大学
研究主题:烟草 嘧肽霉素 烤烟 烟草花叶病毒 黄瓜绿斑驳花叶病毒