搜索到633篇“ 转基因番茄“的相关文章
- 利用种子红色荧光标记鉴定转基因番茄后代
- 2024年
- 转基因技术有助于番茄基因功能研究和遗传改良,其中转基因后代的筛选是一个非常重要但工作量大的环节。本研究基于番茄油体蛋白基因家族序列分析和番茄基因表达数据库SGN-TEA搜索结果,克隆了一个种子特异且高水平表达的油体蛋白基因SlOLE1(Solyc06g034040)。利用无缝克隆的方法将红色荧光蛋白基因TagRFP的编码区序列插入到SlOLE1基因的终止密码子前,形成一个嵌合基因SlOLE1-TagRFP。将嵌合基因插入到pBI121双元载体,构建植物表达载体pSlOLE1-TagRFP,利用农杆菌介导法转化番茄品种‘Money Maker’,T_(0)代植株的自交种子在荧光显微镜下呈现出明亮红色荧光或无荧光。PCR分子标记进一步验证发现,红色荧光种子萌发的幼苗均存在TagRFP序列,表明在种子阶段检测红色荧光筛选转基因番茄后代的准确率为100%。由此,本研究建立了一种利用SlOLE1-TagRFP嵌合基因,可以通过种子红色荧光可视化分析,简单快速、低成本地鉴定转基因番茄后代的方法。
- 章力魏凯李珊珊宁宇路菲菲王孝宣国艳梅刘磊李鑫杜永臣李君明黄泽军
- 关键词:番茄种子红色荧光蛋白
- Wus2和IPT转基因番茄类愈伤组织的转录组分析
- 2024年
- 以AC(Ailsa Craig)番茄为材料,采用Fast-TrACC(fast-treated agrobacterium co-culture)农杆菌转化体系,利用RNA-Seq测序和荧光定量PCR技术,比较了转化DRs(Wus2和IPT)形成的类愈伤组织与普通下胚轴之间的基因表达差异。基因表达结果分析表明,有60个差异表达基因在激素信号转导通路中富集,其中上调表达基因34个,下调表达基因26个;体细胞胚形成关键基因ECP63、AGL15、FUS3、ABI3、WUS和CUC2上调表达超过4倍;ENOD93和CKX2基因在类愈伤组织中的表达量上升超过1000倍,前者编码早期结瘤素蛋白ENOD93,后者编码细胞分裂素氧化酶2,用于催化细胞分裂素的降解,参与氮同化和光合作用的基因低表达。研究结果可为深入解析番茄类愈伤组织发生的分子机制和发掘关键调控基因奠定基础,为番茄活体体内转化提供理论依据。
- 何鑫鑫黄家权
- 关键词:番茄RNA-SEQ
- 一种转基因番茄的微囊泡纳米颗粒及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种转基因番茄的微囊泡纳米颗粒及其制备方法和应用,涉及生物技术领域。该制备方法包括以下步骤:(1)将lncENAF的DNA分子连接入基因表达载体,之后转化入感受态细胞,得到重组微生物菌株;(2)利用所述重组微...
- 李伟刘林王刚林
- APB-DOCK8转基因番茄疫苗防龋的实验研究
- 2023年
- 目的:观察转基因番茄防龋疫苗经灌胃免疫SD大鼠后的防龋效果,初步探索其免疫机制。方法:采用SD大鼠建立实验性龋齿模型,培育并鉴定转基因防龋番茄,将表达目的蛋白的转基因番茄防龋疫苗分次灌胃免疫SD大鼠,Elisa法检测SD大鼠唾液及血液样品中特异性抗PAcA的SIgA和IgG含量,取上下颌骨进行Keyes龋齿计分,取脾脏进行RNA-seq测序分析。采用SPSS 18.0软件包对数据进行统计学分析。结果:转基因番茄防龋疫苗中目的蛋白浓度为36.28μg/mL,免疫SD大鼠后,D组(8 mL/kg)在第6周产生的特异性SIgA和IgG抗体水平最高,且与其他组存在显著差异(P<0.05),龋齿计分也较其他组差异显著(P<0.05)。提取该组SD大鼠脾脏mRNA经RNA-seq测序,得到40个mRNA表达差异显著基因(P-adjust<0.05&|Fold Change|≥1.5)。26个基因显著上调,包括IGFBP6、COL15A1等,GO富集到体液免疫反应、B细胞活化、免疫球蛋白受体结合等;KEGG富集到56条信号通路,包括PI3K-AKT、NF-κB等信号通路,且F<0.001。14个基因显著下调,但下调基因GO和KEGG富集分析无统计学意义(F>0.1)。结论:转基因番茄防龋疫苗可能通过上调SD大鼠IGFBP6基因,介导PI3K-AKT信号通路的激活而减少龋齿发生。
- 龙茜廖成成肖琳琳刘建国管晓燕
- 关键词:龋病PI3K-AKT
- 人工小RNA转基因番茄对TYLCV的抗性鉴定
- 汲怀靖
- 一种培育apoaequorin转基因番茄的方法及其应用
- 本发明公开一种培育apoaequorin转基因番茄的方法及其应用,包括如下步骤:(1)构建apoaequorin转基因番茄重组表达载体,包含apoaequorin编码基因(AQ)、35S启动子序列和卡那霉素抗性基因序列;...
- 刘训言滕一波刘璐璐苏孟柯李宁洁
- 转基因番茄防龋疫苗中外源目的基因鉴定及表达检测被引量:3
- 2022年
- 背景:转基因植物可食性疫苗是以植物作为载体,将外源性基因整合到植物基因组当中,进一步激活动物或人体免疫系统以获得特异性免疫能力。但外源性基因的持续低表达量一直无法达到满意的免疫效果。目的:用分子生物学技术检测转基因番茄植株中pacA-ctxB融合基因表达及目的蛋白的表达量,为进一步观察可食用防龋疫苗的防龋效果提供研究基础。方法:(1)提取转基因番茄叶片总DNA,PCR检测外源性融合基因pacA-ctxB,实验分组3组:阳性对照组为质粒p2355-EPC10;空白对照组为普通番茄1株(红抗219);转基因组为转基因番茄9株;(2)BCA法检测转基因番茄果肉中总蛋白的水平;Western blot证实转基因番茄果实中PAcA/CTB目的蛋白的表达,目的蛋白检测分组2组:转基因组为表达外源性嵌合基因的转基因番茄5株(PCR检测阳性);空白对照组为普通番茄1株;酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测转基因番茄果实中PAcA/CTB目的蛋白浓度。结果与结论:(1)PCR扩增结果可见9株转基因番茄中有5株出现约1.7 kb特异性扩增条带,占总检测植株的55%;(2)转基因番茄总蛋白为3.15 g/L;Western blot可见PCR检测为阳性的转基因番茄蛋白提取样本在分子质量约为58 kD处均出现了高密度条带,非转基因番茄蛋白样本未见特异条带;ELISA测得目的蛋白表达量约4.12 mg/L,占番茄可溶性总蛋白的0.13%;(3)结果说明,外源性融合基因pacA-ctxB能够在番茄植株中表达及产生目的蛋白。
- 关薇薇顾瑜管晓燕吴家媛白国辉田源刘建国
- 关键词:防龋疫苗转基因番茄龋齿
- 沉默SlHSP17.7转基因番茄的获得及苗期耐低温性分析
- 2021年
- 以耐低温型克梅留斯基番茄为试材,采用农杆菌转化法将SlHSP17.7沉默载体成功转化到克梅留斯基番茄中,并进行相对电导率、丙二醛含量测定以及活性氧的NBT染色,研究沉默SlHSP17.7克梅留斯基番茄的耐低温性,以期明确SlHSP17.7与番茄耐低温性之间的关系。结果表明:沉默转基因株系膜脂过氧化程度和活性氧含量均高于对照,表现为不耐低温。可见,SlHSP17.7基因在提高番茄幼苗耐低温性方面发挥重要作用,这为提高番茄苗期耐低温能力及耐低温番茄新品种的培育提供新的思路。
- 吴媛媛史洁玮常晨亮吕书文姜晶
- 关键词:番茄低温胁迫功能分析
- 表达嵌合蛋白PAcA/CTB转基因番茄疫苗可通过胃肠道吸收的方式免疫大鼠被引量:3
- 2021年
- 背景:转基因植物防龋疫苗因其生产工艺简单、价格低廉、有较好的免疫原性及安全有效等优点逐渐展现出其独特的优势,成为近年研究的热点。目的:用含PAcA/CTB的转基因番茄以灌胃的方式免疫SD大鼠,观察其免疫反应性及免疫原性。方法:将雄性SD大鼠随机分成3组,建立动物龋齿模型1周后,阳性对照组大鼠灌胃灭活变异链球菌疫苗;实验组大鼠灌胃表达PAcA/CTB转基因番茄疫苗;阴性对照组大鼠灌胃普通番茄汁,每周灌胃免疫1次,连续4周。于免疫前、免疫后1,2,3,4周采集大鼠的血液及唾液样本,用ELISA法检测血清及唾液中抗变异链球菌PAcA的IgG、sIgA抗体水平;鼠龄57 d时片切大鼠上、下颌磨牙进行龋齿计分。实验方案经遵义医学院动物实验伦理委员会批准。结果与结论:①阳性对照组、实验组分别与阴性对照组比较,第1,2,3,4周小鼠唾液中sIgA型抗PAcA抗体水平均显著升高(P<0.01);②与阴性对照组比较,阳性对照组免疫后第1-4周,实验组免疫后第2-4周小鼠血液中IgG型抗PAcA抗体水平显著升高(P<0.05,P<0.01);③阳性对照组牙齿的损坏程度最小,少数达牙本质浅层,龋齿数量最少;其次是实验组;阴性对照组损坏最为严重,龋损数量最多;④结果说明,表达嵌合蛋白PAcA/CTB的转基因番茄疫苗能够通过胃肠道吸收的方式免疫大鼠,具有一定的免疫原性及免疫反应性,并且减少龋齿的发生。
- 关薇薇顾瑜管晓燕吴家媛白国辉田源刘建国
- 关键词:转基因防龋疫苗
- 转基因番茄防龋疫苗对SD大鼠脾脏基因表达变化的影响
- 目的:课题组保存了T代转基因番茄防龋疫苗种子和含有重组质粒pET30a-PAcA的大肠杆菌,在此基础上制备PAcA蛋白和多克隆抗体,培育T代转基因番茄,将其制作成纯番茄果汁后灌胃免疫SD大鼠产生免疫应答,利用RNA-se...
- 龙茜
- 关键词:龋病RNA-SEQ免疫机制
- 文献传递
相关作者
- 刘建国

- 作品数:306被引量:717H指数:13
- 供职机构:遵义医学院
- 研究主题:变形链球菌 变异链球菌 基因疫苗 防龋疫苗 龋病
- 白国辉

- 作品数:70被引量:164H指数:9
- 供职机构:内蒙古自治区疾病预防控制中心
- 研究主题:转基因番茄 变异链球菌 防龋疫苗 防龋 基因疫苗
- 管晓燕

- 作品数:87被引量:217H指数:9
- 供职机构:遵义医学院
- 研究主题:变异链球菌 转基因番茄 基因疫苗 防龋疫苗 大鼠正畸牙
- 田源

- 作品数:39被引量:81H指数:7
- 供职机构:遵义医学院附属口腔医院
- 研究主题:转基因番茄 防龋疫苗 变异链球菌 牙龈卟啉单胞菌 牙周炎
- 白朋元

- 作品数:24被引量:62H指数:6
- 供职机构:遵义医学院珠海校区
- 研究主题:转基因番茄 防龋疫苗 变异链球菌 CTB 龋病