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- 一种检测血液中线粒体肌酸激酶含量的试剂盒及测定方法
- 本发明涉及蛋白检测技术领域,且公开了一种检测血液中线粒体肌酸激酶含量的试剂盒及测定方法,试剂盒包含如下组分:组分A:包被磁性微球的广泛型线粒体肌酸激酶‑2抗体(2D5);组分B:标志发光标志物的广泛型线粒体肌酸激酶‑1抗...
- 牟晓峰张磊王晔朱婕毕庆庆
- 线粒体肌酸激酶CKMT1B介导AKT/mTOR/STAT3通路调控结直肠癌细胞功能的机制研究
- 研究背景:结直肠癌(Colorectal cancer,CRC)是全球第三大常见癌症,也是世界范围内第二大高死亡率的癌症类型。肌酸激酶(Creatine Kinase,CK)是细胞能量稳态的中央控制器,通过肌酸向磷酸肌酸...
- 李海月
- 关键词:结直肠癌
- 广泛型线粒体肌酸激酶基因在结直肠癌中的表达及生物学意义
- 2021年
- 目的广泛型线粒体肌酸激酶(uMtCK)基因在肿瘤的中发生和发展中起着重要作用,目前uMtCK在结直肠癌进展中的作用仍不清楚。本研究旨在阐明uMtCK在结直肠癌发生中的潜在作用和调控机制。方法荧光定量PCR验证uMtCK在本中心结直肠癌生物样本库中的表达水平。小分子RNA敲低结直肠癌细胞内uMtCK表达,通过CCK⁃8增殖实验、Transwell和Westernblot检测uMtCK对结直肠癌细胞增殖、迁移及转移能力的影响及潜在的调控机制。结果与邻近正常组织相比,uMtCK在结直肠癌组织中呈高表达,其表达与T分期(P=0.002)、N分期(P=0.002)、TNM分期(P=0.000)和无瘤生存率密切相关。下调uMtCK的表达可显著抑制增殖能力、降低迁移和侵袭能力,同时逆转PI3K/AKT/mTOR信号通路。结论uMtCK通过调节PI3K/AKT/mTOR信号通路调控结直肠癌细胞增殖及转移能力,是结直肠癌的潜在治疗靶点。
- 唐兴奎林玉坤何嘉琳罗喜俊梁俊杰朱显军
- 关键词:结直肠癌增殖
- 人类线粒体肌酸激酶的固定化及酶学性质研究被引量:2
- 2019年
- 目的人源肌酸激酶uMtCK具有良好的催化肌酸生成磷酸肌酸的活性,开发固定化uMtCK酶法生成磷酸肌酸,实现其工业化应用价值。方法将异源表达的uMtCK固定在纳米磁性材料Fe3O4@Histidine-Ni上,制备固定化酶Fe3O4@Histidine-Ni/uMtCK,并进行催化反应。与游离酶uMtCK比对酶学性质和动力学参数,测定固定化酶Fe3O4@Histidine-Ni/uMtCK的重复使用次数。结果与游离酶uMtCK相比,固定化酶Fe3O4@Histidine-Ni/uMtCK的最适反应温度提高5℃,最适pH降低0.5个单位,在50℃、pH7.5下孵育2h,残余酶活为51%,而游离酶仅为27%;uMtCK的KmCr为10.7mmol/L,为Fe3O4@Histidine-Ni/uMtCK的1.1倍;Fe3O4@Histidine-Ni/uMtCK的kcat/KmCr值是5.3L/(mmols),是uMtCK的1.3倍;Fe3O4@Histidine-Ni/uMtCK在经历9次循环使用后,活力还能保持50%以上,显示了良好的稳定性和重复使用性。结论与uMtCK相比,Fe3O4@Histidine-Ni/uMtCK具有良好的热稳定性和重复使用性,具有一定的工业化价值。
- 吕广新史北辰樊帅杨兆勇张志斐陈静
- 关键词:肌酸激酶磷酸肌酸
- 实时荧光定量PCR检测结直肠腺癌患者组织中广泛型线粒体肌酸激酶基因的表达被引量:2
- 2019年
- 目的:分析实时荧光定量PCR检测结直肠腺癌患者组织中广泛型线粒体肌酸激酶(uMtCK)基因的表达。方法:选取2016年1月至2017年12月在广州市番禺中心医院治疗的98例结直肠腺癌患者作为研究对象,另选取同期100例健康体检者作为对照组,采用实时荧光定量PCR检测患者肿瘤组织及癌旁组织的uMtCK mRNA的表达。结果:结直肠腺癌患者肿瘤组织中均存在uMtCK mRNA表达,其范围为7.5×10~5~5.3×10~8拷贝μg RNA,平均(9.2±5.8)×10~6拷贝μgRNA;结直肠腺癌患者癌旁组织中的uMtCK基因表达为4.4×10~3~6.8×10~5拷贝μgRNA,平均(8.5±3.2)×10~4拷贝μgRNA。与对照组比较,差异均有统计学差异(P<0.05)。结论:结直肠腺癌患者组织中uMtCK mRNA含量升高,实时荧光定量PCR检测结直肠腺癌患者组织中uMtCK基因的表达,其最终结果可采用绝对拷贝数表示,定量结果准确可靠。
- 罗喜俊何嘉琳梁俊杰朱显军梁伟雄唐兴奎
- 关键词:实时荧光定量PCR检测结直肠腺癌癌旁组织
- 线粒体肌酸激酶检测在中晚期结直肠癌治疗中的应用分析被引量:2
- 2018年
- 目的对应用线粒体肌酸激酶检测方式对病情处于中晚期阶段的结直肠癌疾病患者接受放化疗的效果进行评价的临床价值进行研究。方法选择我院收治的接受放化疗的病情处于中晚期阶段的结直肠癌疾病患者153例,再抽取同期接受健康体检的健康人资料153例,分别将其定义为研究组和对照组。对对照组和研究组在放化疗前后的癌胚抗体水平和线粒体肌酸激酶水平进行测定,对比两组研究对象和研究组在放化疗前后的上述两项指标的测定结果与阳性率。结果研究组研究对象治疗前的癌胚抗体和线粒体肌酸激酶水平和阳性率明显高于对照组,组间数据比较差异显著(P <0. 05);研究组研究对象在治疗后癌胚抗体和线粒体肌酸激酶水平和阳性率明显低于治疗前,组内数据对应比较差异显著(P <0. 05)。结论病情处于中晚期阶段的结直肠癌疾病患者的线粒体肌酸激酶水平会呈现异常升高表现,通过放化疗技术对其进行治疗可以使这一指标水平明显降低,在病情诊断和治疗效果监测过程中,联合检测癌胚抗体水平可以有效提高检测阳性率,使监测的准确度更加理想。
- 陈兴秀赵兴丽郑东星谢红霞高建红刘毅
- 关键词:结直肠癌线粒体肌酸激酶放化疗
- 线粒体肌酸激酶1对人鼻咽癌细胞株CNE-1顺铂敏感性的作用研究被引量:2
- 2018年
- 目的探讨线粒体肌酸激酶1(ubiquitous mitochondrial creatine kinase,CKMT1)在人鼻咽癌细胞株CNE-1对顺铂(cisplatin,DDP)敏感性中的影响。
方法瞬转CNE-1得CKMT1过表达细胞或空载体细胞(EV),MTT法绘制生长曲线、计算DDP IC50,不同浓度DDP处理下平板克隆形成实验,流式细胞术检测细胞周期与凋亡,Western Blot检测凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2/C-PARP及转录因子p-STAT3-Tyr705水平。采用GraphpadPad Prism5软件进行统计学处理。
结果CKMT1和空载体细胞的转染效率均达90%以上;前者的增殖速度高于后者;但前者DDP IC50为2.76 μmol/L,显著低于后者的4.60 μmol/L(t=6.91,P〈0.01),且在一定浓度DDP作用下前者的克隆形成率较低;细胞周期在G2/M期阻滞更明显。DDP浓度为2 μmol/L时,CKMT1凋亡率(18.33±0.67)%显著高于EV(11.80±0.70)%(t=6.75,P〈0.01);CKMT1的促凋亡蛋白C-PARP和Bax显著高于EV(t=72.63,P〈0.01;t=4.22,P〈0.05),而凋亡抑制蛋白Bcl-2在CKMT1中的表达显著低于EV(t=49.08,P〈0.01);且p-STAT3-Tyr705水平也更低(t=221.60,P〈0.01)。结论DDP作用下,CKMT1可能通过一定的机制抑制STAT3的活化,进而提高CNE-1对DDP的敏感性。
- 蓝瑞隆黄菲陈瑞庆王锃陈俊英林经安傅冷西
- 关键词:鼻咽肿瘤线粒体肌酸激酶顺铂
- 人类线粒体肌酸激酶uMtCK的底物结合位点分析被引量:2
- 2018年
- 研究人类线粒体肌酸激酶uMtCK的结合位点,将其与底物肌酸和ATP结合有关的关键氨基酸进行突变,并对突变体进行酶动力学和圆二色谱数据分析,探讨这些关键氨基酸在底物识别和催化过程中的作用。结果显示,与野生酶相比,突变体Q313A和R336A的KmCr分别提高了2.6和2.9倍,kcat下降了19%和55%;同样地,与ATP结合相关的突变体R125A和R287A分别使得KmATP升高了3.2和4.2,kcat下降了72%和38%。以上结果表明突变体R125A、R287A、Q313A和R336A影响对底物的结合,同时也降低了酶促反应的速度。利用圆二色谱比较野生酶与不同突变体的二级结构并无明显变化,但进一步的结构模拟表明底物结合位点氨基酸在与底物之间的氢键对底物的识别和酶催化过程中发挥着重要作用。
- 孟浩毅李丹阳孙正阳杨兆勇张志斐袁丽杰
- 关键词:肌酸激酶定点突变酶动力学
- 肿瘤患者血清线粒体肌酸激酶水平变化及其诊断意义研究进展被引量:4
- 2015年
- 线粒体肌酸激酶(Mt CK)存在于细胞内线粒体内膜和外膜间隙,属肌酸激酶同工酶系列,其主要生理作用是在有氧情况下通过磷酸肌酸穿梭机制提供肌肉收缩所需能量。近年来,很多研究发现Mt CK在肿瘤患者血清中高表达,且大多数是患有恶性肿瘤患者的血清中Mt CK呈高表达,在预后不好的病人中过表达尤其明显,推测其对恶性肿瘤的临床诊断及预后判断具有重要意义。同时,分子生物学研究认为Mt CK过表达可以使细胞在某种程度上获得一定的生长优势以抵抗调亡。
- 张宁宁陆伟
- 关键词:肿瘤线粒体肌酸激酶
- 广泛型线粒体肌酸激酶在肝癌分子诊断中的基础与临床研究
- 目的:通过检测uMtCK在慢性乙肝患者、活动性肝硬化患者及原发性肝癌患者血清及病理组织中的表达情况,研究其与原发性肝癌临床诊断的相关性;通过检测 uMtCK在体外肝癌细胞系表达及检测其与体外肝癌细胞增殖及凋亡的关系,为揭...
- 张砚
- 关键词:肝癌肿瘤标志物线粒体肌酸激酶细胞增殖
相关作者
- 陈兴
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- 作品数:182被引量:645H指数:12
- 供职机构:珠海市妇幼保健院
- 研究主题:住院患者 老年冠心病患者 线粒体肌酸激酶 幽门螺杆菌 耐药性
- 成继民
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- 作品数:142被引量:325H指数:9
- 供职机构:白求恩国际和平医院
- 研究主题:免疫组织化学 毛细血管瘤 误诊 KI-67 预后
- 张乃哲
![](/images/user-pic.gif)
- 作品数:5被引量:13H指数:2
- 供职机构:河北省医学科学研究院
- 研究主题:线粒体肌酸激酶 BAX KI-67 子宫内膜增殖 表达及意义
- 王更银
![](/images/user-pic.gif)
- 作品数:106被引量:289H指数:7
- 供职机构:解放军白求恩国际和平医院
- 研究主题:新生儿溶血病 输血 脐带间充质干细胞 人脐带间充质干细胞 汗腺细胞
- 王爱华
![](/images/user-pic.gif)
- 作品数:60被引量:202H指数:8
- 供职机构:第二军医大学长征医院
- 研究主题:血清 同工酶 淀粉酶 氧化型低密度脂蛋白 TOLL样受体4