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一种流感病毒分离检测试剂盒
本实用新型公开了一种流感病毒分离检测试剂盒,涉及病毒分离技术领域,包括储存筒,储存筒上的开口端设有筒盖,筒盖一侧开设有用于取放病毒试剂管的通槽;储存筒中转动布设定位杆,定位杆靠向筒盖的方向固定布设第一定位盘,定位杆端部贯...
张煜华李高波
流感样病例中的病毒载量对流感病毒分离效果的影响
2024年
目的分析流感样病例标本中的病毒载量对流感病毒分离效果的影响,从而提高流感病毒分离工作的质量和效率。方法2023年1-10月,在区哨点医院和周边区县收集320例核酸阳性流感样病例标本,采用吸附法和直接接种法接种于狗肾传代细胞中,比较流感病毒分离效率;再以实时荧光定量反转录聚合酶链式反应(RT-qPCR)中的Ct值为界,划分为3组进行对比;对相关因素进行分析。结果不同性别流感病毒细胞分离结果差异无统计学意义(直接接种法:χ^(2)=0.676,P>0.05;吸附法:χ^(2)=1.359,P>0.05)。采用直接接种法分离出的流感阳性毒株数明显高于吸附法,差异有统计学意义(χ^(2)=20.516,P<0.05)。Ct值越低,流感病毒分离阳性率越高,不同Ct值分离阳性率差异有统计学意义(直接接种法:χ^(2)=35.594,P<0.05;吸附法:χ^(2)=15.496,P<0.05)。不同接种方法中,甲型流感亚型H3N2和新甲H1N1分离的流感病毒阳性率差异无统计学意义(直接接种法:χ^(2)=1.563,P>0.05;吸附法:χ^(2)=1.214,P>0.05)。结论在流感病毒细胞分离实验中,采用直接接种法,选取流感病毒载量高(Ct值<30)的标本可以有效提高流感病毒分离阳性率。
胡攀攀周静周宗良周宗俞李雪娇乔洁李霞
关键词:流感病毒病毒载量细胞培养病毒分离
新疆某规模化肉牛场牛病毒性腹泻病毒分离与基因型鉴定
2024年
新疆许多规模化牛场存在牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的感染,且因病毒基因型具有多样性,给该病的防控、疫苗选择、净化带来了一定的困难,开展新疆地区规模化牛场BVDV基因分型鉴定,对BVDV防控具有重要的指导作用。采集BVDV胶体金抗原检测卡确定为阳性的犊牛抗凝血样品并分离淋巴细胞,在MDBK单层细胞上进行病毒分离,盲传5代,提取培养物RNA,以BVDV5′-UTR、N^_(pro)特异性引物进行逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测分析。结果显示,获得BL分离株1株,属于BVDV-1m亚型,研究结果丰富了新疆南疆地区规模牛场BVDV分子流行病学数据库。
黄琴陈红强张怡淼马颖超胡建军张伟
关键词:牛病毒性腹泻病毒基因型鉴定逆转录-聚合酶链反应
一株H9亚型禽流感病毒分离株及其制备的疫苗组合物和应用
本发明公开了一株H9亚型禽流感病毒分离株及其制备的疫苗组合物和应用,属于兽用医药技术领域。本发明分离得到的禽流感病毒JS121株,命名为H9亚型禽流感病毒JS121株(Avian influenza virus JS12...
贺笋肖燕潘晓梅曹剑
牛冠状病毒分离株、稳定表达牛冠状病毒N蛋白细胞系及在构建反向遗传操作系统中的应用
本发明公开了牛冠状病毒分离株、稳定表达牛冠状病毒N蛋白细胞系及在构建反向遗传操作系统中的应用。本发明从腹泻犊牛的粪便中分离获得牛冠状病毒内蒙古分离株,该毒株能较好适应细胞传代,在此基础上,采用高效酵母系统构建牛冠状病毒内...
尹鑫常继涛李燕华王芳姜志刚
鸭星状病毒1型SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法的建立及其在病毒分离鉴定中的应用
2024年
为实现鸭星状病毒1型(Duck astrovirus type 1,DAstV-1)的快速检测,本试验针对DAstV-1(WF1202株)保守区域设计特异性引物,建立了基于染料SYBR GreenⅠ的实时荧光定量PCR(qPCR)方法,利用所建方法对临床样本进行检测,并将其应用于阳性样本病毒分离和鉴定。结果表明所建qPCR检测方法的检测下限为4.64×10^(3)拷贝/μL,高于普通RT-PCR方法10倍;对禽类其他常见病原均为阴性,特异性良好;批内、批间变异系数(Cv)分别为0.85%~2.85%和0.21%~2.94%,均低于3.00%,表明其重复性良好。利用该方法对2020-2022年间10省份不同鸭场的35份组织病料进行检测,阳性率为25.71%(9/35),与普通RT-PCR检测结果的符合率为94.29%。任取1份阳性病料接种健康鸭胚进行病毒分离,收集尿囊液利用所建qPCR方法进行检测,确定为阳性后接种1日龄健康雏鸭进行动物回归试验,感染雏鸭呈现一过性发病但未出现死亡,qPCR检测DAstV-1均为阳性,剖检可见肝脏有轻微出血,病理组织学观察发现肝细胞空泡变性,说明所分离的DAstV-1毒株致病性较弱。综上,本试验成功建立了DAstV-1的荧光定量PCR检测方法,可为DAstV-1的临床诊断、分离鉴定及分子流行病学监测等提供技术支撑。
陶禹冯旭东樊彦丽王艳赵自亮杨晓伟张立武陈翔赵光伟
牦牛轮状病毒分离株及其应用
本发明公开了一株牦牛轮状病毒分离株及其应用,属于生物技术和病毒学技术领域,所述牦牛轮状病毒分离株保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏地址为中国武汉,保藏编号为CCTCC NO:V202244,保藏日期为2022年5月25日...
汤承岳华陈茜王远微
猫泛白细胞减少症病毒分离鉴定及VP2基因的遗传变异分析
2024年
为分析北京地区猫泛白细胞减少症病毒(Feline panleukopenia virus,FPV)的流行毒株及其VP2基因遗传变异情况,对FPV胶体金试纸条检测结果为阳性的病死猫组织进行病毒分离,通过细胞病变、荧光定量PCR、间接免疫荧光和全基因组测序等试验,分离鉴定到1株FPV,命名为FPVBJ-CP/2022株。对决定病毒宿主范围和抗原性的VP2基因系统进化树分析表明,分离株与FPVJF-3株、FPVBeijing-01/2018聚为一支,与FPV疫苗株、CPV群亲缘关系较远。VP2蛋白主要功能位点分析结果显示,VP2蛋白中决定病毒抗原性和宿主嗜性的10个关键位点氨基酸均未发生突变,但该分离株的VP2蛋白序列与GenBank其他FPV毒株的VP2蛋白相比,91位氨基酸由丙氨酸(A)突变为丝氨酸(S),505位氨基酸由天冬酰胺(N)突变为天冬氨酸(D),该突变是否对FPVBJ-CP/2022株VP2蛋白的功能和生物学特性造成改变,有待于进一步研究。论文通过对毒株的遗传变异分析,为更好地预防和控制FPV感染提供了研究基础。
张启龙李振河程敏姮栗云鹏高晓龙傅彩霞王林高敏余琦周德刚张玮李志军
关键词:猫泛白细胞减少症病毒VP2基因遗传进化分析
侵染云南早春西瓜的西瓜银色斑驳病毒和黄瓜花叶病毒分离鉴定
2024年
早春西瓜是云南热区的特色水果,近年来病毒病发生危害日益严重。为明确侵染早春西瓜的主要病毒,本研究采集了云南省西双版纳州勐海县的早春西瓜植株与果实病毒病样品,应用透射电子显微镜制样观察、间接酶联免疫吸附测定(ID-ELISA)和RT-PCR扩增克隆与测序分析进行检测鉴定。结果表明:侵染早春西瓜的病毒为西瓜银色斑驳病毒(WSMoV)和黄瓜花叶病毒(CMV);ID-ELISA对叶部样品WSMoV和CMV的检出率分别为70%和20%,复合侵染率为15%,RT-PCR对这两种病毒的检出率分别为100%和65%,复合侵染率为65%;并且,实验对发病果实种子进行RT-PCR扩增克隆和测序分析发现上述2种病毒复合侵染率达100%;系统发育树分析表明,云南西瓜WSMoV分离株21YV-40(GenBank登录号:OP617563)、21YV-43(GenBank登录号:OP867047)与云南分离株Banna-2011(GenBank登录号:KM242056)相似性最高,达到99.00%,云南西瓜CMV分离株CMVYN40(GenBank登录号:OP617565)、CMVYN46(GenBank登录号:OP617566)与泰国分离株A27(GenBank登录号:FN552545)相似性最高,达到98.00%。本研究明确了勐海县早春西瓜主要受到WSMoV和CMV的侵染且存在复合侵染,首次发现WSMoV和CMV复合侵染西瓜发病果实种子,为早春西瓜病毒病的防控提供了依据。
杜雨濛赵立华张绍智王田田张仲凯
关键词:早春西瓜黄瓜花叶病毒复合侵染
一种微生物病毒分离装置
本实用新型提供了一种微生物病毒分离装置,涉及微生物分离技术领域,包括分离槽;所述分离槽内开设有培养腔,且培养腔的前后两端均设置有内嵌板,所述培养腔内两组内嵌板之间安装有多组分隔板,且分隔板与内嵌板之间拆分连接;所述分离槽...
李运许岩钱铨

相关作者

王志亮
作品数:597被引量:2,483H指数:26
供职机构:中国动物卫生与流行病学中心
研究主题:新城疫病毒 小反刍兽疫病毒 非洲猪瘟 新城疫 小反刍兽疫
张秀美
作品数:344被引量:785H指数:12
供职机构:山东省农业科学院
研究主题:新城疫病毒 新城疫 禽流感病毒 传染性支气管炎病毒 鸡病
崔治中
作品数:604被引量:2,539H指数:34
供职机构:山东农业大学
研究主题:马立克氏病病毒 禽白血病病毒 禽白血病 REV 鸡群
田克恭
作品数:290被引量:784H指数:13
供职机构:北京世纪元亨动物防疫技术有限公司
研究主题:单克隆抗体 禽流感病毒 繁殖与呼吸综合征病毒 繁殖与呼吸综合征 犬细小病毒
陈化兰
作品数:571被引量:1,579H指数:19
供职机构:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
研究主题:禽流感病毒 禽流感 猪流感病毒 流感病毒 DNA疫苗