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介导等温扩增技术及扩增产物分析方法的比较
2024年
介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)自开发以来,以其操作简便、灵敏度高、特异性好、扩增效率高等优点得到广泛地研究,在细菌、病毒、寄生虫、转基因成分等检测和鉴定中发挥重要作用,检测样品涵盖食品、境、医疗、动植物检疫鉴定领域。LAMP技术最大的优点之一是扩增产物分析方法简便快速、不需要特殊的设备,特别适合在基层检验机构和现场检验推广应用。随着分析方法的研究,LAMP技术与相关技术偶联,使得产物分析方法灵敏度大大提高,检测速度更快、更方便。该文对LAMP相关技术及LAMP扩增产物检测分析方法的研究进行比较与分析,以期为LAMP方法的应用和开发提供建议和方向。
刘培海白庆华王凯李大伟李林杰相湛昌雷质文
关键词:环介导等温扩增扩增产物分析方法
通过介导等温扩增检测靶标核酸点突变的方法
各种实施方案总体涉及核酸扩增和检测领域,特别是介导等温核酸扩增和使用设计的检测探针检测扩增子。此外,各种实施方案还涉及通过介导等温扩增确定样品中靶标核酸分子中点突变的存在或数量的方法和试剂盒,该方法和试剂盒可用于识别...
陈明浩黄健贤
一种基于介导等温扩增技术的水体污染源检测方法
本发明提供了一种基于介导等温扩增技术的水体污染源检测方法,S1、采集水样,提取水样DNA;S2、确定需要检测的污染源,污染源为人源、反刍源、猪源、禽源中的一种;S3、向介导等温扩增检测的反应体系加入水样DNA,反应体...
吴仁人徐丰顺张杨柯常栋邓志毅吴永洁肖世杰李锦才蒋能乐
介导等温扩增技术在农业病害检测中的应用综述
2024年
介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)是一种新型核酸等温扩增技术,其原理是当温度为60~65℃时,DNA处于动态平衡状态,DNA双链打开,此时依赖Bst DNA聚合酶的链置换活性,使DNA可以在60~65℃的恒温下进行合成。其扩增引物是基于靶基因的6个特异性区域设计的,扩增阶段需要引物与样品DNA完全结合,才可以进行扩增,所以LAMP技术具有高特异性与高灵敏性。其反应温度恒定,不需要额外的控温设备,理想条件下仅需保温杯,即可进行DNA扩增。在田间检测时,只需提取样品总DNA,即可于田间进行病害检测,缩短了检测流程及时间,使病害检测更高效更便捷。在反应前或反应后加入特定染色剂,即可通过染色剂的变色情况进行反应结果的判定,使反应结果可视化。目前该技术已凭借其特异性高、灵敏性高、所用仪器简单(恒温水浴锅或保温杯即可)、检测效率高和检测结果可视化等优点,广泛应用于临床病原微生物检测、食品微生物检测、境微生物检测、植物或微生物基因鉴定等领域。在农业病害的病原微生物(真菌、细菌、病毒、线虫)快速检测和诊断领域,已有很多研究针对各种病害建立了相应的LAMP检测技术。本文简要综述了LAMP技术原理、反应结果判定、优缺点和该技术目前在农业常见病原物检测中的应用,并对LAMP技术的应用前景进行了进一步的展望。
王一波孙泓希史普想孙继军韩宁任亮张丽丽王海新
关键词:环介导等温扩增技术
一种双水相体系介导等温扩增检测核酸的方法
本发明公开了一种双水相体系介导等温扩增检测核酸的方法,具体为:双水相的制备:电子天平称取聚乙二醇和葡聚糖粉末,加入去离子水中,形成混合物水溶液,搅拌并静置至溶液变得清澈透明,形成两相分离完全的聚乙二醇/葡聚糖双水相溶液...
苑昊马君秋孟涛郭婷
一种高特异性的介导等温扩增方法及其应用
本发明公开了一种高特异性的介导等温扩增方法,包括以下步骤:1)设计扩增引物;2)设计sgRNA;3)扩增;4)扩增产物的特异性检测。本发明所述的扩增方法可以达到飞克级别的污染去除,有效地降低了传统LAMP方法检测的假阳...
周小明鲍益娟
基于介导等温扩增技术的空间微生物安全水平评价方法
2024年
以金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、青霉、黑曲霉4种典型空间微生物风险菌为试验对象,在筛选得到靶标微生物的特异性介导等温扩增(LAMP)引物的基础上,成功建立基于LAMP的靶标微生物定量检测技术,检出限为200 copies/μL。该方法表现出良好的检测灵敏度、检测特异性和检测精密度,为空间微生物安全水平评价提供了一种切实可行的方法,为保障航天员健康和人机系统的安全性提供了重要的技术手段。
张倍铭李安一李晓丹孙威叶建设马俊吕雪飞
关键词:环介导等温扩增核酸检测肺炎克雷伯菌青霉黑曲霉
介导等温扩增法检测烟草疫霉菌的引物及其检测方法
本发明公开了一种介导等温扩增法检测烟草疫霉菌的引物及其检测方法,所述的引物由B3、F3、FIP和BIP四条特异性引物组成,其核苷酸序列分别为SEQ ID No.1‑4所示。所示检测方法包括以下步骤:(1)待测样品的病原...
祖庆学聂忠扬林松饶陈张翼飞杨超刘杰陈俊
一种基于多重实时荧光的介导等温扩增检测方法及其应用
本发明提供了一种基于多重实时荧光的介导等温扩增检测方法及应用。具体地,本发明提供了一种检测呼吸道病原体的多重实时荧光介导等温扩增检测体系:(a)LAMP引物;(b)四氢呋喃探针;和(c)耐高温核酸内切酶IV,其中当所...
王培培孙益乐郭安亮虞人一
基于实时介导等温扩增技术快速检测玉米转bar基因方法
本发明公开了基于实时介导等温扩增技术快速检测玉米转bar基因方法,具体检测方法步骤如下:步骤一:选取试验设备和转基因检测原料及辅料,检验人员对原材料进行检验,并且对试验设备及转基因检测设备进行试运行,并且向工作人员进行...
徐亚维王俊玲胡延生薛健楚海娇张馨予邓川

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郑小波
作品数:298被引量:1,325H指数:23
供职机构:南京农业大学
研究主题:引物 大豆疫霉 稻瘟病菌 组合物 环介导等温扩增
黄昆仑
作品数:524被引量:1,282H指数:18
供职机构:中国农业大学食品科学与营养工程学院
研究主题:快速检测试剂盒 靶序列 生物物种 试剂盒 扩增体系
石磊
作品数:249被引量:885H指数:15
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研究主题:整合子 环介导等温扩增 LAMP 整合酶 引物
许文涛
作品数:594被引量:1,177H指数:16
供职机构:中国农业大学
研究主题:生物传感器 快速检测试剂盒 靶序列 生物物种 试剂盒
张伟
作品数:217被引量:1,473H指数:20
供职机构:河北农业大学食品科技学院
研究主题:环介导等温扩增 跨越式 环介导等温扩增技术 实时荧光 LAMP