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恙虫病东方体超快速检测方法的建立及评价: 2024年; 目的:建立一种可以在基层医疗机构使用的超快速恙虫病东方体(Orientia tsutsugamushi,Ot)核酸检测方法。方法:利用实时荧光定量PCR技术(quantitative real-time polymerase chain reaction,qPCR),通过比对分析数据库中恙虫病东方体全基因组序列确定靶基因,设计qPCR特异性引物和探针,优化反应体系和反应程序,建立超快速多重qPCR检测方法;利用经过数字PCR(droplet digital PCR,ddPCR)定量后的样本核酸作为标准物质,评价该方法的灵敏度、重复性以及最低检出限;通过比较基因组学分析,验证恙虫病东方体与同科属的易引起类似症状的病原体的特异性,通过检测24种(共45例)易引起类似症状的其他病原体核酸评价特异性;利用116例来源于云南省红河州金平县人民医院和复旦大学附属华山医院的临床全血样本,通过四格表卡方检验对多重qPCR超快速检测方法和传统qPCR检测方法的检测结果进行比较,采用Kappa一致性检验分析方法间的一致性。结果:恙虫病东方体与同科属的易引起类似症状的病原体的同源性较低,与常见的易引起类似症状的24种病原体无交叉反应,具有很好的特异性;最低检出限为156 copies/mL;具有很好的重复性,检测Ct值的变异系数≤3.13%;多重qPCR超快速检测方法和传统qPCR检测方法同时检测116例临床全血样本,检测结果的差异无统计学意义(P>0.05),两种方法具有很高的一致性(Kappa=0.9392,P<0.001),总符合率97.42%(CI:92.67%~99.12%),检测时间可缩短至30 min。结论:建立的多重qPCR超快速检测方法具有良好的灵敏度、重复性和特异性,可以快速诊断临床全血样本中的恙虫病东方体核酸,在基层医疗机构实现及时快速诊疗。; 金捷陆洪斌张怡王新宇吴晶李涛姜宁; 关键词：恙虫病恙虫病东方体

用于恙虫病东方体检测的CRISPR-Cas12a引物组及其应用: 本发明公开了用于恙虫病东方体的CRISPR‑Cas12a检测引物组及其应用。本发明提供了用于检测恙虫病东方体的CRISPR‑Cas12a系统，还提供了用于特异性扩增第一方面中所述恙虫病东方体靶点序列的RAA扩增引物；作为...; 齐永李越希毛颖清操敏王俊虎李文豪陆年宏卢永锋易海明陈超郭伟葛艺欣

佛山市南海区鼠类自然感染恙虫病东方体基因型分析: 2024年; 目的调查佛山市南海区鼠类自然感染恙虫病东方体(Orientia tsutsugamushi, Ot)的情况,了解当地Ot基因型的分布及特点,为防控恙虫病提供科学依据。方法 2017年7月利用鼠夹和鼠笼,在佛山市南海区恙虫病高发镇街采集鼠类动物样本,应用巢式聚合酶链反应(nested polymearse chain reaction, nPCR)扩增技术检测Ot 56kDa型特异性抗原(type-specific antigen, TSA)基因核酸片段,通过核酸序列比对确定Ot基因分型。用MEGA 10.0.5、DNAStar 7.1、MegAlign等生物信息学软件进行同源性与遗传进化分析。结果共捕获鼠类200只,褐家鼠检出56kDa TSA基因片段6份,黄胸鼠检出1份,阳性率为3.5%(7/200)。南海序列(L65、L68、L118、L119、L122、L150和L153)在核苷酸水平与Kawasaki、Gilliam、TA763、Kato、Kuroki、Karp基因型相似性为71.8%~100.0%,氨基酸水平相似性为54.9%~100.0%。同源性和系统进化分析表明,南海序列与Ot中的Karp型具有较高的同源性和较近的亲缘关系,与其他型同源性较低,亲缘关系较远。L65、L119、L150和L153与台湾TW45R株、云南TN16-28株的核苷酸同源性为100.0%。结论佛山市南海区存在鼠类Ot自然感染,褐家鼠为其主要宿主,当地恙虫病病原体属于Karp型。; 罗琳李鹏宾苏彦张彦丽柯志攀张佳惠邱宗耀; 关键词：恙虫病东方体自然感染系统进化分析

一种检测恙虫病东方体抗体的荧光免疫层析试纸条及其制备方法和应用: 本发明公开了一种检测恙虫病东方体抗体的荧光免疫层析试纸条及其制备方法和应用，所述试纸条包括硝酸纤维素膜，所述硝酸纤维素膜两端分别设有样品垫和吸水垫，所述样品垫、吸水垫和硝酸纤维素膜均置于底板上，其特征在于，所述硝酸纤维素...; 操敏燕书豪熊晓辉高豹蔡旭燊赵芷若

恙虫病东方体混合重组抗原应用于胶体金免疫层析试纸条的制备及效价检测: 2024年; 胶体金免疫层析试纸条具有携带方便、操作简单且敏感性、特异性高等特点,近年来开始广泛应用于疾病的诊断。为了实现对恙虫病的快速检测,笔者利用双抗原夹心法,以胶体金标记恙虫病东方体56 kDa混合重组蛋白,56 kDa混合重组蛋白和兔抗恙虫病东方体多克隆抗体分别喷在检测线及质控线上,制备了用于检测恙虫病东方体抗体的胶体金免疫层析试纸条。本研究制备的胶体金试纸条检测限为61 ng/mL,和疟疾、伤寒、血吸虫、出血热以及斑点热等阳性血清无交叉反应,特异性达90%(54/60),检测的敏感性为91.96%(103/112),在4℃下可稳定保存6个月。本试纸条能够应用于人体血清中恙虫病东方体总抗体的检测。; 赵芷若周东明操敏陶清源蔡旭燊燕书豪高豹吕恒谭伟龙; 关键词：恙虫病东方体胶体金快速检测试纸条

滇西部分地区鼠形动物和蝙蝠携带恙虫病东方体分子流行病学研究: 田佳伟

恙虫病东方体的全新重组蛋白抗原以及使用上述重组蛋白抗原的疫苗组合物: 本发明公开一种可有效地适用于恙虫感染与否的诊断并作为恙虫疫苗进行使用的从TSA56抗原的保守序列导出的全新重组蛋白抗原以及使用上述重组蛋白抗原的疫苗组合物。; 赵南赫河奈咏

2022年浙江省宁波市1例恙虫病东方体Boryong基因亚型感染病例调查分析: 2023年; 目的对2022年1例恙虫病疑似病例进行实验室检测和分析,了解浙江省宁波市恙虫病东方体基因型流行情况。方法对疑似病例进行流行病学调查,询问其病史;采集病例发热期血液,提取总DNA采用实时荧光定量PCR方法扩增目的基因tsa56,根据测得的序列构建系统进化树,确定该恙虫病东方体基因型。结果实时荧光定量PCR方法检出病例血液中存在恙虫病东方体;扩增序列经比对后与已知恙虫病东方体Boryong具有最近亲缘关系。结论宁波市实验室确诊1例恙虫病东方体感染病例,为Boryong基因亚型。; 徐可叶平国华; 关键词：恙虫病恙虫病东方体进化分析

一种杂交瘤细胞株5B3、恙虫病东方体56kDa蛋白单克隆抗体及其制备方法与应用: 本发明公开了一种杂交瘤细胞株5B3、恙虫病东方体56kDa蛋白单克隆抗体及其制备方法与应用，所述的杂交瘤细胞株5B3保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：C2022244。本发明提供的56kDa蛋白单...; 操敏燕书豪熊晓辉蔡旭燊赵芷若卢亚维

恙虫病东方体小鼠损伤模型与系统地理的重建: 【目的】为了了解分离自啮齿动物和人的恙虫病东方体(Orientia tsutsugamushi,Ot)56 k Da外膜蛋白的分子特征,Ot小鼠感染模型所引起的病理改变,Ot中国与全球系统地理的重建,为恙虫病的防治提供科...; 孔逸尘; 关键词：恙虫病东方体丛林斑疹伤寒动物模型

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