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一种改进的异硫氰酸结合硅胶膜离心吸附柱提取孕妇外周血微量胎儿RNA的方被引量:3
2012年
孕妇外周血中存在胎儿RNA为无创性产前诊断提供了基础.但血液中富含RNA酶和微量胎儿RNA的特点,对从孕妇血浆中提取胎儿RNA带来困难.我们以ε血红蛋白基因和胎盘特表达基因4(PLAC4)mRNA作为研究对象,用改进的异硫氰酸结合硅胶膜离心吸附柱探索孕妇外周血中胎儿微量RNA的提取方,获得满意效果.30例孕妇和9例非孕妇外周血样品中总RNA经凝胶电泳测定显示3条带,分别为28S,18S和5.8S.其28S条带亮度为18S亮度的2倍.总RNA质量浓度(A260/A280)为1.97 g/L,光密度比值(A260-A320)/(A280-A 320)为1.86.30例孕妇外周血样本有7例提取到ε血红蛋白基因mRNA,ε血红蛋白基因mRNA的最小浓度为0.537μg/mL,最大浓度为1.79μg/mL,ε血红蛋白基因mRNA的浓度中位数为1.24μg/mL.30例孕妇外周血样本提取到PLAC4基因mRNA,浓度最小值为2.105×103 copies/mL,最大值为12.760×103 copies/mL,而9例非孕妇中均未提取到(P<0.01),浓度中位数为6.612×103 copies/mL.因此,改进的异硫氰酸与硅胶膜离心吸附柱纯化相结合,可有效抑制RNA降解,用于提取、纯化孕妇血液中微量胎儿RNA.
杨利丽刘红英杨和军刘顺梅
关键词:异硫氰酸胍无创性产前诊断RNA提取
异硫氰酸快速提取二球悬铃木组织总RNA的研究被引量:23
2007年
针对二球悬铃木组织中多酚物质含量较高的特点,采用异硫氰酸从二球悬铃木花序和叶片中提取到质量高、完整性好的总RNA,28S rRNA的亮度约为18S rRNA的2倍,通过RT-PCR克隆到二球悬铃木中与拟南芥Leafy基因同源的部分编码区。高质量的RNA为Northern杂交和利用同源序列克隆二球悬铃木的相关基因提供了前提条件。
李志能黄文俊张佳琪张俊卫包满珠刘国锋
关键词:二球悬铃木多酚异硫氰酸胍法总RNA提取
异硫氰酸提取梅花鹿鹿茸组织总RNA
实验采集了6只2岁梅花鹿鹿茸样品,应用异硫氰酸提取其总RNA,建立了最适鹿茸RNA提取条件,实验最终提取RNA的紫外吸收值:A<,260>/A<,280>=1.73~1.86, A<,260>/A<,230>=2.1...
赵靖波李光玉杨福合王凯英刘佰阳
关键词:异硫氰酸胍法梅花鹿凝胶电泳
文献传递
异硫氰酸提取梅花鹿鹿茸组织总RNA
2006年
采集6只2岁梅花鹿鹿茸样品,应用异硫氰酸提取其总RNA,建立了鹿茸总RNA适宜提取条件。实验最终提取RNA的紫外吸收值为:A260/A280=1.73~1.86,A260/A230=2.16~2.53,经甲醛变性凝胶电泳可以清晰看到28s、18s、5s 3条带,其亮度满足未降解RNA的特征,且无明显DNA污染。
赵靖波李光玉王凯英刘佰阳
关键词:异硫氰酸胍法梅花鹿鹿茸总RNA
异硫氰酸提取梅花鹿鹿茸组织总RNA
实验采集了6只2岁梅花鹿鹿茸样品,应用异硫氰酸提取其总RNA,建立了最适鹿茸RNA提取条件,实验最终提取RNA的紫外吸收值:A/A=1.73~1.86,A/A=2.16~2.53,经甲醛变性凝胶电泳可以清晰看到28s...
赵靖波李光玉杨福合王凯英刘佰阳
关键词:异硫氰酸胍法梅花鹿鹿茸总RNA
文献传递
改良异硫氰酸提取玛咖(Maca)叶片中总RNA研究被引量:7
2005年
为了获得质量较高的玛咖总RNA,对其总RNA的提取进行了研究。以玛咖无菌苗叶片为材料,通过改良的异硫氰酸提取其总RNA。结果:所提取的总RNA纯度高、完整性好,电泳条带清晰,OD260/OD280值达到1.90±0.03,总RNA的得率达到252.57±1.12μg/g。表明改良的异硫氰酸适合于玛咖叶片中RNA的提取,所提取的总RNA纯度高、完整性好,为进一步的玛咖分子生物学研究打下良好基础。
程华余龙江胡琼月孙友平陈善才
关键词:玛咖总RNA异硫氰酸胍法
异硫氰酸提取大鼠睾丸总RNA及质量鉴定被引量:3
1995年
本实验应用改良的异硫氰酸从睾丸中提取总RNA。经紫外分光光度计检测,OD260nm/OD280nm≥1.8,表明蛋白质污染少,RNA纯度较高。经变性琼脂糖凝胶电泳可见清晰的18s和28s两条带,经RNaseA消化的样品中条带消失,表明所提取物质确为RNA,并无降解。以雄激素受体cDNA为探针,应用分子杂交检定杂交信号居18s稍后,表明总RNA中这种特定的mRNA未发生降解。同时证明RNA提取过程中,如第一步-20℃沉淀时间过长,可引起RNA降解。
赵丹
关键词:核糖核酸雄激素异硫氰酸胍睾丸
异硫氰酸提取梅花鹿鹿茸组织总RNA
赵靖波李光玉杨福合王凯英刘佰阳
关键词:异硫氰酸胍法梅花鹿鹿茸总RNA
魔芋(Amorphophallus spp.)四种组织器官RNA提取方的比较被引量:4
2019年
由于魔芋植株各部位富含多糖,较难获得高质量的RNA。为了筛选出魔芋各组织器官总RNA提取最适合的方,本研究采用Trizol异硫氰酸、改良CTAB、RNAprep Pure Plant Kit和Plant RNA Kit五种方分别对花魔芋叶片、茎杆、根和球茎四种组织部位的总RNA进行了提取,并用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计对RNA质量进行综合评价。结果表明:用Trizol异硫氰酸提取魔芋各器官的RNA效果较差,杂质含量较高,降解严重;采用RNAprep Pure Plant Kit和Plant RNA Kit两种商业试剂盒仅提取出魔芋叶片的RNA,茎秆、根、球茎三种组织器官未能提取质量完整的RNA,所提取的RNA效果不稳定且浓度较低。改良CTAB提取的魔芋四种组织器官RNA均能得到完整、清晰的RNA条带,且四个器官的OD260/OD280均在1.8~2.0之间,采用改良CTAB提取魔芋各组织器官总RNA较为理想。本研究为不同器官来源魔芋植株样品的RNA提取方提供了科学依据。
魏环宇魏薇杨敏赵建荣杨敏赵建荣陈泽斌刘佳妮陈泽斌裴卫华
关键词:TRIZOL法异硫氰酸胍法改良CTAB法
策勒黑羊卵巢总RNA的提取
2017年
策勒黑羊具有全年发情、多胎的特点,是新疆策勒县特有的优良绵羊品种。为研究与保护策勒黑羊遗传资源,为后续开展逆转录酶聚合酶链式反应(RT-PCR)、斑点杂交试验和构建c DNA文库试验等提供条件,试验采用经典异硫氰酸(Trizol)提取策勒黑羊卵巢总RNA,通过核酸蛋白仪测定所提取RNA在不同波长下的吸光度值,计算RNA的提取量与纯度,并利用琼脂糖凝胶电泳显示提取结果和验证RNA的完整性。结果表明:采用Trizol提取得到的策勒黑羊卵巢RNA的浓度、纯度与完整性均可达到后续试验的要求,可为后续策勒黑羊种质资源保护和利用等生物学试验的开展提供参考依据。
蒋维东张晶宋显明艾东旭李莲瑞石长青
关键词:异硫氰酸胍法卵巢RNA提取策勒黑羊遗传资源

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李光玉
作品数:538被引量:1,048H指数:13
供职机构:中国农业科学院特产研究所
研究主题:梅花鹿 水貂 营养物质消化率 血清生化指标 蓝狐
王凯英
作品数:209被引量:362H指数:11
供职机构:中国农业科学院特产研究所
研究主题:梅花鹿 水貂 消化代谢 营养物质消化率 毛皮动物
赵靖波
作品数:73被引量:146H指数:7
供职机构:中国农业科学院特产研究所
研究主题:水貂 梅花鹿 毛皮动物 营养物质消化率 鹿茸
刘佰阳
作品数:65被引量:170H指数:8
供职机构:中国农业科学院特产研究所
研究主题:梅花鹿 消化代谢 雄性梅花鹿 毛皮动物 蛋氨酸螯合铜
杨福合
作品数:482被引量:1,062H指数:15
供职机构:中国农业科学院特产研究所
研究主题:梅花鹿 水貂 蓝狐 营养物质消化率 鹿茸